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        土壤有效磷檢測中改變標(biāo)準(zhǔn)溶液磷濃度和顯色劑含量的試驗

        2011-01-30 11:44:14楚雄州動物疫病預(yù)防控制中心675000楊冬月
        云南農(nóng)業(yè) 2011年1期
        關(guān)鍵詞:顯色劑容量瓶標(biāo)準(zhǔn)溶液

        □楚雄州動物疫病預(yù)防控制中心 675000 楊冬月

        □楚雄州農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測中心 675000 虞繼權(quán)

        按照《云南省測土配方施肥暨地力評價技術(shù)》一書檢測土壤有效磷,配制的一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中,最高濃度是0.50ug.ml-1,此濃度相對應(yīng)的吸光度值是0.2,而依據(jù)相關(guān)資料證明,當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線吸光度范圍是0.2~0.8(透射比為15%~65%)時,在此范圍中測定的樣品濃度相對誤差較小。為此,可采用的方法之一是調(diào)節(jié)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。根據(jù)《云南省測土配方施肥暨地力評價技術(shù)培訓(xùn)教材》、《化驗員讀本儀器分析》,證實顯色劑的用量影響標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,而且顯色劑的用量與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度之間的關(guān)系可通過實驗確定。鑒于此,所做的實驗分兩步,第一步:配制一組磷含量是1.0ug.ml-1,而顯色劑含量不同的溶液,顯色劑的含量從低到高,依次增加,測定這組溶液的吸光度。根據(jù)吸光度—濃度之間的關(guān)系,在一定的濃度值之間(此處濃度值指顯色劑的濃度)吸光度出現(xiàn)穩(wěn)定值,與這個穩(wěn)定的吸光度值相對應(yīng)的顯色劑的量就是實驗需確定的數(shù)據(jù),它是配制標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度達(dá)1.0ug.ml-1時所需添加的顯色劑的量。第二步:為了比較在標(biāo)準(zhǔn)曲線中加入第一步試驗得出的顯色劑的量后所檢測的樣品結(jié)果,與按照《云南省測土配方施肥暨地力評價技術(shù)培訓(xùn)教材》一書配制的標(biāo)準(zhǔn)曲線檢測的樣品結(jié)果是否一致,從第一步試驗中選定一個在范圍內(nèi)的顯色劑的用量,配制成一組磷濃度是0.0ug.ml-1到1.0ug.ml-1的標(biāo)準(zhǔn)曲線,檢測樣品,記錄吸光度值,再按照教材配制一組磷濃度是0.0ug.ml-1到0.5ug.ml-1的標(biāo)準(zhǔn)曲線,檢測同一個樣品,記錄吸光度值,判定兩個吸光度值是否一致,從而進(jìn)一步驗證磷濃度是0.0ug.ml-1到1.0ug.ml-1的標(biāo)準(zhǔn)曲線中所添加的顯色劑的量是否正確。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1)磷標(biāo)準(zhǔn)溶液[C(P)=100mg.L-1]。稱取經(jīng)105℃下烘干2h的磷酸二氫鉀(優(yōu)級純)0.4390g,用水溶解后,加入5ml濃硫酸,定容至1L。

        2)5mg.L-1磷標(biāo)準(zhǔn)溶液。吸取5.00ml濃度為100mg.L-1的磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液于100ml容量瓶中,定容。

        3)鉬銻抗顯色劑。稱取1.50g抗壞血酸(分析純),溶于100ml7.5mol.L-1硫酸鉬銻貯備液中。

        4)7.5mol.L-1硫酸鉬銻貯備液。取蒸餾水約400ml,燒杯浸在冷水內(nèi),然后緩緩注入分析純濃硫酸208.3ml,并不斷攪拌,冷卻至室溫。另取分析純鉬酸銨20g溶于約60℃的200ml蒸餾水中,冷卻。然后將硫酸溶液徐徐倒入鉬酸銨溶液中,不斷攪拌再加入100ml酒石酸銻鉀溶液(濃度是0.5%),用蒸餾水稀釋至1000ml,搖勻,貯于棕色試劑瓶中。

        5)分析天平。感量0.0001g。

        6)分光光度計。可在660nm下測定吸光度,北京普析TU1901雙光束紫外分光光度計。

        1.2 方法

        1)磷含量是1.0ug.ml-1,顯色劑含量不同的各溶液吸光度的測定。分別吸取5mg.L-1磷標(biāo)準(zhǔn)溶液10.00ml于八個50ml的容量瓶中,依次加入釩鉬酸銨顯色劑 0ml、2ml、4ml、6ml、8ml、10ml、12ml、14ml,充分搖動逐盡 CO2后用水定容,即為含磷是1.0ug.ml-1,含顯色劑濃度不同的一組溶液,在室溫高于20℃處放置30min后,用1cm光徑比色皿在波長660nm處測定吸光度。

        2)樣品的制備。吸取5mg.L-1的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液5ml于50ml的容量瓶中,加入顯色劑5.00ml,充分搖動逐盡CO2后用水定容,作為待測樣品。

        3)濃度最高點1.0ug.ml-1的標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:吸取50mg.L-1磷標(biāo)準(zhǔn)溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于 50ml容量瓶中,各加入顯色劑10ml,充分搖動逐盡CO2后用水定容,即為含磷 0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ug.ml-1磷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,在室溫高于20℃處放置30min后,用1cm光徑比色皿在波長660nm處比色測定經(jīng)過2)條處理的樣品濃度。

        4)濃度最高點是0.5ug.ml-1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:按照《云南省測土配方施肥暨地力評價技術(shù)培訓(xùn)教材》操作,吸取5mg.L-1磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml于 50ml容量瓶中,各加入顯色劑5.00ml,充分搖動逐盡 CO2后用水定容,即為含磷0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ug.ml-1磷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,在室溫高于20℃處放置30min后,用1cm光徑比色皿在波長660nm處比色測定經(jīng)2)條處理的樣品濃度。

        2 結(jié)果與分析

        1)磷的濃度值是 1.00ug.ml-1,加入 8ml、10ml、12ml顯色劑的溶液測得的吸光度值分別是0.470、0.467、0.467,根據(jù)紫外分光光度計光度準(zhǔn)確度是±0.004Abs(0.5~1.0Abs),這三個值可以看作是相同。檢測結(jié)果見表1。所以當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的最高濃度值是1.00ug.ml-1時,加入 8ml、10ml或 12ml的顯色劑,檢測結(jié)果都相同。為了節(jié)省試劑用量,為了移液方便、快速,確定顯色劑用量是10ml。

        表1 濃度是1.00ug.ml-1溶液加入不同量顯色劑的吸光度

        2)按照3)條檢測樣品,結(jié)果濃度是0.466ug.ml-1,另外按照4)條檢測同一個樣品,結(jié)果濃度是0.465ug.ml-1,兩個檢測值可視為相同。所以,配制含磷濃度是0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ug.ml-1的標(biāo)準(zhǔn)曲線,各溶液加入10ml顯色劑,這個標(biāo)準(zhǔn)曲線中測定的樣品與按《云南省測土配方施肥暨地力評價技術(shù)培訓(xùn)教材》測定的同一個樣品比較,結(jié)果相同。在實際檢測中,按照3)條配制的標(biāo)準(zhǔn)曲線適用可行。

        3 討論

        1)由于各地方的土壤含磷量不同,不同類型的土壤含磷也不同,在檢測中,可適度調(diào)整檢測磷的標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度,繼而相應(yīng)調(diào)整顯色劑的含量。

        2)在檢測過程中,如果樣品的顏色比標(biāo)準(zhǔn)曲線中1.0ug.ml-1的溶液顏色深,則可用目測法把樣品先作適當(dāng)稀釋,直到稀釋的樣品顏色淺于1.0ug.ml-1的溶液顏色時,用紫外分光光度計測定。但是在稀釋過程中,建議將樣品移至容量瓶內(nèi)稀釋,提高檢測的準(zhǔn)確度。

        3)在此實驗中,進(jìn)行樣品處理時,為了減少誤差,采用了樣品處理與標(biāo)準(zhǔn)曲線配制相同的方法。但在實際檢測中,樣品的處理方法應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

        4 結(jié)論

        1)土壤有效磷的檢測中,在標(biāo)準(zhǔn)曲線磷含量濃度達(dá)1.0ug.ml-1的情況下,每50ml的溶液中加入8~12ml顯色劑,各溶液檢測到的吸光度相同,即在實際檢測中可用的顯色劑的量是 8~12ml。

        2)配制磷濃度最高達(dá)1.0ug.ml-1,顯色劑是每50ml的溶液加入10ml的標(biāo)準(zhǔn)曲線,在此標(biāo)準(zhǔn)曲線中檢測樣品,結(jié)果準(zhǔn)確、可靠,這個標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制方法可在實際檢測中運用。

        [1]竇曉黎,等.云南省測土配方暨地力評價技術(shù)培訓(xùn)教材.

        [2]劉珍,等.化驗員讀本[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,1983.

        [3]北京普析通用儀器有限責(zé)任公司編.Uvwin5使用指南.

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