周 燦 ,楊梓懿 ,許 李 ,石繼連
(1.湖南中醫(yī)藥大學藥學院,湖南 長沙 410208;2.湖南中醫(yī)藥大學中藥現(xiàn)代化實驗室,湖南 長沙 410208)
不同炮制去心法對巴戟天多糖含量的影響
周 燦1,楊梓懿2*,許 李1,石繼連1
(1.湖南中醫(yī)藥大學藥學院,湖南 長沙 410208;2.湖南中醫(yī)藥大學中藥現(xiàn)代化實驗室,湖南 長沙 410208)
目的 比較不同炮制去心方法的巴戟天及其木心中多糖的含量。方法 采用80%乙醇回流提取,用改進的苯酚-硫酸法測定多糖的含量。結(jié)果 巴戟天不同炮制品及其木心中多糖含量高低依次為:制巴戟天>巴戟肉>鹽巴戟天>巴戟天木心。結(jié)論 巴戟天經(jīng)甘草制有利于多糖的溶出,鹽炙品的多糖含量低于巴戟肉,巴戟天木心多糖含量最低。
巴戟天;不同炮制去心法;多糖含量;苯酚-硫酸法
巴戟天為茜草科植物Morinda officinalis How.的干燥根,味甘、辛,微溫。歸腎、肝經(jīng)。具有補腎助陽,祛風濕,強筋骨的功效。常用于陽痿遺精、宮冷不孕、月經(jīng)不調(diào)、少腹冷痛、風濕痹痛、筋骨痿軟等癥。炮制方法主要有巴戟肉、鹽巴戟天和制巴戟天等[1]。巴戟天含有糖類、蒽醌類和環(huán)烯醚萜苷類等多種化學成分[2]。現(xiàn)代藥理實驗表明,巴戟天具有抗腫瘤、抗氧化、降血糖、促進免疫等藥理作用,其中多糖被認為是促進免疫功能的活性成分。本實驗分別測定了不同炮制方法去心后巴戟天及其木心中多糖的含量,現(xiàn)將方法與結(jié)果報道如下。
ISO9001型分析天平(南京庚辰科學儀器有限公司);TU-1900雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)。
巴戟天(購于湖南長沙市高橋藥材市場,經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學藥植教研室周日寶教授鑒定為茜草科植物Morinda officinalis How.的干燥根);D-無水葡萄糖(批號:110833-200904,中國藥品生物制品檢定所,供含量測定用);加碘精制鹽(湖南省輕工鹽業(yè)集團有限責任公司);其他試劑均為分析純。
2.1.1 巴戟肉 取凈巴戟天藥材,置適宜蒸器內(nèi)蒸透,趁熱除去木心,切段,干燥。
2.1.2 鹽巴戟天 取凈巴戟天藥材,加鹽水拌勻,置適宜蒸器內(nèi)蒸透,趁熱除去木心,切段,干燥。
2.1.3 制巴戟天 取甘草,搗碎,加水煎湯,去渣,加入凈巴戟天藥材拌勻,置適宜容器內(nèi)煮透,趁熱除去木心,切段,干燥。每100 kg巴戟天用甘草6 kg。
2.1.4 巴戟天木心 取凈巴戟天藥材木心,切段,干燥。
精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒質(zhì)量的D-無水葡萄糖約50 mg,置250 mL量瓶中,加水溶解并定容至刻度,搖勻,配成0.2 mg/mL的溶液,即可。
分別取 “2.1”項下各樣品粉末(過20目篩)0.2 g,各3份,精密稱定,置具塞圓底燒瓶中,加80%乙醇 150 mL,于90℃水浴回流 1 h,濾過,殘渣用80%熱乙醇洗滌3次,每次10 mL,濾渣連同濾紙再加150 mL水,90℃水浴回流1 h,濾過,殘渣用熱水洗滌4次,每次10 mL,合并濾液,轉(zhuǎn)入500 mL量瓶中,加水稀釋定容至刻度,搖勻,即得。
分別取對照品溶液和巴戟肉樣品溶液1.0 mL置具塞試管中,加入6%苯酚溶液1.0 mL,再垂直快速加入濃硫酸5.0 mL,搖勻,放置5 min,沸水浴15 min,流水速冷至室溫;另以1 mL蒸餾水同上平行操作,作為空白,于400~700 nm波長處進行光譜掃描,結(jié)果選擇495 nm為檢測波長。結(jié)果見圖1。
精密吸取葡萄糖對照品溶液 1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 mL,分別置于100 mL量瓶中,加水定容至刻度,搖勻。分別吸取上述溶液1.0 mL置具塞試管中,照“2.4”項下同法操作,于495 nm波長處測定其吸光度。以吸光度對葡萄糖溶液的濃度進行線性回歸,得回歸方程為:
結(jié)果顯示,葡萄糖濃度在0.002~0.018 mg/mL呈良好的線性關(guān)系。
取同一批巴戟肉粉末5份各0.2 g,精密稱定,按“2.3”項下制備供試品溶液,照“2.5”項下同法操作測定吸光度。結(jié)果其平均含量為2.01%,RSD為1.6%,表明本法重復性良好。
取同一批已知含量的巴戟肉粉末(過20目篩)6份各約0.2 g,精密稱定,按“2.3”項下制備供試品溶液,分別精密加入相當于樣品中葡萄糖含量80%、100%和120%的葡萄糖對照品溶液,照“2.5”項下方法操作測定吸光度,計算回收率,結(jié)果見表1。
取“2.1”項下各炮制品粗粉3份各約0.2g,精密稱定,照“2.3”項下方法制備供試品溶液,按“2.5”項下同法操作測定吸光度,同時做空白實驗。結(jié)果見表2。
表1 加樣回收率實驗結(jié)果(n=6)
表2 樣品中多糖含量的測定結(jié)果(n=3)
本實驗所制備樣品的水分含量均符合國家標準(<15.0%),不影響多糖含量的測定。
實驗結(jié)果表明,巴戟天不同炮制去心方法的巴戟天及木心中多糖含量高低依次為制巴戟天>巴戟天肉>鹽巴戟天>巴戟天木心。
多糖廣泛存在于自然界,含多糖藥物的研究已成為當今創(chuàng)制新藥的發(fā)展方向之一[6]。本實驗為巴戟天不同炮制去心方法對多糖含量的影響以及炮制時是否去心提供了實驗依據(jù)。
實驗結(jié)果表明,2005版《中國藥典》收載的巴戟天不同炮制去心方法對多糖含量是有影響的,甘草制巴戟天有利于多糖的溶出,鹽制巴戟天多糖含量則低于清蒸去心的巴戟天肉,巴戟天木心多糖含量低,且木心比重較大,約占巴戟天藥材的20%~30%,炮制時除去木心具有實驗依據(jù)。但多糖含量與巴戟天不同炮制方法去心的炮制作用的關(guān)系有待進一步研究。
[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(2005版)[S].北京:化學工業(yè)出版社,2005:55-56.
[2]黃瑞珍.中藥巴戟天化學成分預試驗[J].海峽藥學,2006,18(1):103-104.
[3]郭素華,王和鳴,黃 濤,等.南靖巴戟天多糖的含量測定[J].福建中醫(yī)學院學報,2006,16(1):32-33.
[4]吳擁軍,劉 潔,吳予明,等.中藥巴戟天多糖的測定及其微量元素分析[J].光譜學與光譜分析,2005,25(12):2 076-2 078.
[5]劉勁松,劉金旗.不同質(zhì)地木瓜中多糖含量測定 [J].安徽醫(yī)藥,2008,12(7):607-608.
[6]鄧小云,丁登峰,戴美紅,等.植物多糖藥理作用研究進展[J].中醫(yī)藥導報,2006,12(9):86-88.
(本文編輯 徐愛良)
Influence of different process to remove woody core on polysaccharide content of Morinda officinalis
ZHOU Can, YANG Zi-yi, XU Li, SHI Ji-lian
(Pharmacy College,TCM University of Human,Changsha,Hunan 410208,China)
Objective To study the influence of different process to remove woody core on polysaccharide contents of Morinda officinal is and its woody core.Methods Backwash extract was with 80% ethanol,the improved phenol-sulferic acid method was used to detect the polysaccharide contents.Results The polysaccharide contents of Morinda officinalis in different processed materials and the woody core of root from high to low were licorice processing officinalis>officinalis flesh>salt officinalis>officinalis woody core.Conclusion Morinda officinalis processed by licorice is beneficial to the dissolution of polysaccharides;the salt officinalis is lower than the officinalis flesh in polysaccharide content;and the woody core of root has the lowest polysaccharide content.
Radix Morindae officinalis; processing; polysaccharide content; phenolsulferic acid method
R284.1
B
10.3969/j.issn.1674-070X.2011.01.014.049.03
2010-11-04
周 燦(1985-),男,湖南長沙人,在讀碩士研究生,主要從事中藥炮制理論與飲片質(zhì)量控制研究。
* 楊梓懿,男,教授,碩士研究生導師,E-mail:csyzy2006@126.com。