柳成剛，王曉麗

(黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040)

肝達康顆粒由柴胡、白芍、枳實、黃芪、生牡蠣、雄膽粉、甘草7位中藥組成，具有疏肝益氣，解毒散結之功效。原方為湯劑，為方便臨床應用，保證制劑的質量和療效的穩(wěn)定性，擬將其制成顆粒劑。本研究以芍藥苷、浸膏得率為考察指標，采用正交設計實驗，對白芍、黃芪、生牡蠣、甘草四味藥材及柴胡、枳實提油后殘渣的提取工藝條件進行優(yōu)化。

1 儀器與試藥

Agilent1100高效液相色譜儀;十萬分之一分析天平;芍藥苷對照品(中國藥品生物制品檢定所);甲醇為色譜純，其他試劑為分析純，水為重蒸餾水;所用藥材均購于世一堂中藥飲片有限公司(經檢驗，均符合2010版《中華人民共和國藥典》標準［1］)。

2 實驗方法

2．1 芍藥苷含量測定［2－3］

2．1．1 色譜條件 色譜柱:Kromasil C18柱(4.6mm×250mm，5μm);流動相:水 －甲醇 －冰醋酸(65∶35∶0.5);流速:1.0 mL/min;柱溫:30℃;檢測波長:230nm。

在上述色譜條件下，芍藥苷和樣品中其他組分可

基金項目:黑龍江省中醫(yī)藥管理局項目(ZHY10－Z47);黑龍江中醫(yī)藥大學科研基金資助(200909)

作者簡介:柳成剛(1977－)，男，博士，講師，主要研究方向:六經辨證在肝膽疾病中的臨床應用。

收稿日期:2010－12－08

修回日期:2011－01－20

達到基線分離，芍藥苷與其相鄰色譜峰的分離度大于1.5，且陰性對照液無干擾，按芍藥苷峰計算，理論塔板數不少于2 000。

2．1．2 對照品溶液的制備 精密稱取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥至恒重的芍藥苷對照品5.10mg，以甲醇定容至50mL量瓶中，制成0.102mg/mL的溶液作為對照品溶液，過0.45um微孔濾膜，取續(xù)濾液，即得。

2．1．3 樣品含量測定 精密稱取浸膏干粉約1g，精密稱定，置50mL容量瓶中，加甲醇適量，超聲處理30min，取出，放冷，加甲醇定容至刻度，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得。

2．2 浸膏收得率測定 精密吸取9份樣品的供試液20mL，蒸干至恒重，精密稱重，分別計算其浸膏收得率。

2．3 正交試驗設計

采用正交試驗法，以浸膏得率、芍藥苷含量為評價指標;選擇加水倍量、煎煮時間、煎煮次數為考察因素，采用L9(34)正交試驗設計進行試驗。因素水平安排見表1。

表1 正交試驗因素水平表

表2 正交試驗結果表

按肝達康中各藥材的比例，稱取總量為50g處方共9份，其中柴胡、枳實先用揮發(fā)油提取器提取4h，得揮發(fā)油，另器保存。殘渣再加入其它(除雄膽粉外)藥材，合并浸泡1h，按正交試驗表方案進行煎煮，濾過，再濃縮，減壓干燥，干膏稱重，得干浸膏重量，研細過60目篩，得浸膏粉共9份。分別測定浸膏中的含水量和芍藥苷的含量，并計算浸膏得率和芍藥苷提取量。權重系數分別為0.4、0.6，進行綜合評價。結果見表2，方差分析見表3。

表3 提取工藝方差分析表

2．4 工藝條件的確定 從方差分析結果可知，加水量、提取時間對提取效果具有顯著性影響，而提取次數對結果的影響并不顯著。因此，從節(jié)約能源的角度考慮，提取次數定為2次，則A2B2C1為最佳組合，即10倍量水提取2次，每次1小時最好。

2．5 驗證試驗

按最佳工藝A2B2C1進行重復試驗3次，驗證結果見表4。結果表明，RSD小于2%，重復性好。

表4 驗證試驗結果

3 討論

3．1 根據上述試驗，肝達康顆粒劑的最佳提取方案可確定為加藥材量的10倍量水，煎煮2次，每次煎煮1h。此外，還考慮了生產條件，盡可能做到省時節(jié)能，且通過驗證試驗證明，文中選定的最佳工藝條件具有較高的提取效率。

3．2 顆粒以其生產自動化、生產條件恒定、人為因素影響小等優(yōu)勢，廣泛應用于臨床［4］。肝達康顆粒是白芍等藥材經水提、濃縮、干燥、制粒等工序制成的顆粒。筆者優(yōu)化其提取工藝，并以高效液相色譜(HPLC)法對配方中芍藥苷的含量進行測定，方法簡便可行，重現性好，可以作為控制產品質量的方法。

［1］國家藥典委員會編．中華人民共和國藥典［S］．北京:化學工業(yè)出版社，2010:96．

［2］王晟，張麗艷，吳濤．HPLC法測定胃寶顆粒中芍藥苷的含量［J］．中醫(yī)藥學報，2010，38(2):113 －114．

［3］周洪偉，許文博，王玉蓉，等．赤芍總苷提取與大孔樹脂純化工藝研究［J］．中醫(yī)藥學報，2011，39(1):48 －51．

［4］姚煥英，趙寧俠，史恒軍，等．配方顆粒劑臨床利弊點滴談［J］．現代中醫(yī)藥，2006，26(1):61．