陳俊鵬 何賈紅 林春平

（廣東省揭陽市人民醫(yī)院化療科，廣東揭陽 522000）

胰腺癌是常見的消化道惡性腫瘤之一，在所有外分泌惡性腫瘤中占80%～90%[1]，近年來發(fā)病率有逐年升高趨勢。胰腺癌常見的形式為導管性胰腺癌（ductal pancreatic carcinoma），占總發(fā)病率的80%左右；另有10%左右的胰腺癌癥起源于內(nèi)分泌型組織細胞，比如腺泡細胞癌、囊腺癌等；剩下10%左右的惡性胰腺癌為神經(jīng)內(nèi)分泌性腫瘤，比如胰島素瘤和胃泌素瘤等[2]。胰腺癌缺乏特異的臨床表現(xiàn)，難以早期診斷，而且其侵襲轉移機制尚不明確。

CD10是一種分子量100KD左右的鋅依賴的基質(zhì)金屬蛋白酶，在細胞膜上發(fā)揮生物學功能。表達的組織主要包括骨髓淋巴干細胞，前體B型淋巴細胞和成熟的中性粒細胞。它可以作為分子標記物來區(qū)分急性白血病分型，并對惡性淋巴瘤進行次級分類[3]。最近有不同文章報道CD10陽性的細胞可能分布于胃癌、乳腺癌和直腸癌等多種癌癥組織中[4-7]，基于這些報道，現(xiàn)在已經(jīng)有觀點認為，可以將CD10作為一種分子標記物，來區(qū)分腫瘤的惡性程度以及其侵襲力[4-6，8]。

本研究采用免疫組織化學技術檢測CD10在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌和正常胰腺組織中的表達，分析其在胰腺癌中表達及與臨床病理特征和預后的關系。分析CD10在胰腺癌侵襲和轉移中的作用，尋找評價胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌生物學行為及評估預后的指標。

1 材料與方法

1.1 材料

收集筆者所在醫(yī)院2005年8月～2009年4月的28例胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌患者手術切除的胰腺癌石蠟標本，男18例，女10例，并記錄患者詳細的臨床病理資料和隨訪結果。所有患者術前未接受任何放射或者化學抗癌治療。按照2002年國際抗癌聯(lián)盟標準確定胰腺癌TNM分期：Ⅰ期2例，Ⅱ期10例，Ⅲ/Ⅳ期16例；組織學分級：1/2級13例，3級15例。切取10例正常胰腺組織標本做對照組。組織經(jīng)10%福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，制成4μm厚片備染。28例胰腺癌組織和10例正常胰腺組織都經(jīng)筆者所在醫(yī)院病理科行HE染色確認。一切材料收集均通過筆者所在醫(yī)院倫理學委員會認定，并符合筆者所在醫(yī)院制定的倫理學指導要求。

1.2 免疫組化染色試驗和結果評估

免疫組化染色使用Histofine SAB-PO試劑盒(Nichirei)。石蠟切片使用鼠抗CD10單克隆抗體（56C6；1∶100;Novocastra），4℃過夜。在癌細胞中，CD10免疫染色強度用評分來表示，分別為0：沒有染色；1：弱染色；2：中等染色；3：強染色。當癌組織切片中超過30%的細胞染色評分為2或3時，即可判斷該組織為CD10陽性組織。所有標本由3位研究者分別獨立判斷，而且并不提前告知提供組織患者的病理情況。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理。使用χ2檢驗來驗證CD10表達率和胰腺癌臨床病理特征之間的相關關系。體外試驗中，所有數(shù)據(jù)用（±s)表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

在全部28例患者標本中，23例出現(xiàn)了內(nèi)分泌細胞的CD10表達陽性，其中16例表現(xiàn)為強陽性，而7例表現(xiàn)為中等陽性或弱陽性。而在10例正常對照標本中，CD10主要表達在導管細胞、一些內(nèi)皮細胞和淋巴細胞中，呈神經(jīng)周圍性分布，見圖1。

3 討論

盡管大多數(shù)時候，胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌在熟練的細胞病理學醫(yī)師手中并不算什么難以診斷的疾病，因為胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌具有獨特的細胞形態(tài)學特征[9]。但是在某些時候，當病理標本受到胃腸內(nèi)容物污染時，或者由于一些別的原因造成細胞形態(tài)難以確認時[10-11]，光鏡檢查輔助免疫組化檢查將提供更為精準的診斷結果。

圖1 CD10陽性表達情況

CD10被認為在多種實體腫瘤干細胞中均有表達[4-7]，可能是腫瘤細胞的一種廣譜標志物，目前研究認為CD10可能是胰腺癌的腫瘤標志物[12]。筆者研究發(fā)現(xiàn),82.3%（23/28）的標本具有CD10陽性表達。而在正常組織中，CD10主要表達在細胞的頂端，這和它在正常組織中的生物學功能是一致的。這些結果提示CD10在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌組織中高表達，可能與胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌的發(fā)生發(fā)展有關。

不過，CD10在癌細胞中高表達的原因，以及其生物學作用仍需要繼續(xù)探討?？傊?，本研究發(fā)現(xiàn)胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌組織中存在CD10高表達，提示CD10在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌的發(fā)生過程中有重要作用，可考慮作為胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌癌臨床診斷的指標之一。

[1]楊洋，田一妮，劉情情，等.胰腺癌的診斷和治療[J].醫(yī)學信息，2010，5(6)：1653.

[2] Guenter JK. Pancreatic Cancer： Epidemiology and Risk Factors[J]. Digestive Disease，2010，28(2)：355-358.

[3] Moreau I，Duvert V，Caux C，et al. Myofibroblastic stromal cells isolated from human bone marrow induce the proliferation of both early myeloid and B-lymphoid cells[J]. Blood，1993，82(8)：2396-2405.

[4] Huang WB，Zhou XJ，Chen JY，et al. CD10-positive stromal cells in gastric carcinoma： correlation with invasion and metastasis[J]. Jpn J Clin Oncol，2005，35(5)：245-250.

[5] Iwaya K，Ogawa H，Izumi M，et al. Stromal expression of CD10 in invasive breast carcinoma： a new predictor of clinical outcome[J]. Virchows Arch，2002，440(6)：589-593.

[6]Makretsov NA，Hayes M，Carter BA，et al. Stromal CD10 expression in invasive breast carcinoma correlates with poor prognosis，estrogen receptor negativity，and high grade[J]. Mod Pathol，2007，20(1)：84-89.

[7]Ogawa H，Iwaya K，Izumi M，et al. Expression of CD10 by stromal cells during colorectal tumor development[J]. Hum Pathol，2002，33(8)：806-811.

[8]Fleischmann A，Schlomm T，Huland H，et al. Distinct subcellular expression patterns of neutral endopeptidase (CD10) in prostate cancer predict diverging clinical courses in surgically treated patients[J]. Clin Cancer Res，2008，14(23)：7838-7842.

[9]Chatzipantelis P，Salla C，Konstantinou P，et al. Endoscopic ultrasoundguided fine-needle aspiration cytology of pancreatic neuroendocrine tumors：A study of 48 cases[J]. Cancer，2008，114(4)：255-262.

[10]McLean AM，F(xiàn)airclough PD. Endoscopic ultrasound in the localization of pancreatic islet cell tumors[J]. Best Pract Res Clin Endocrinol Metab，2005，19(2)：177-193.

[11]Ohuchida K，Mizumoto K，Murakami M，et al. Radiation to stromal fibroblasts increases invasiveness of pancreatic cancer cells through tumorstromal interactions[J]. Cancer Res，2004，64(9)：3215-3222.

[12]Olempska M，Eisenach PA，Ammerpohl O，et al. Detection of tumor stem cell markers in pancreatic carcinoma cell lines[J]. Hepatobiliary Pancreat Dis Int，2007，6(1)：92-97.