鄭慶紅 李娜 尹艷英

不同類(lèi)型子宮內(nèi)膜中PTEN和CD44V6的表達(dá)及其意義

鄭慶紅 李娜 尹艷英

目的 檢測(cè)PTEN與CD44V6在不同類(lèi)型子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)情況，探討其與內(nèi)膜癌生物學(xué)行為之間的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)法(SP法)檢測(cè)PTEN與CD44V6在82例子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)。結(jié)果 ①PTEN在子宮內(nèi)膜增生期、單純型增生過(guò)長(zhǎng)、復(fù)雜型增生過(guò)長(zhǎng)、不典型增生及內(nèi)膜樣腺癌組織中的表達(dá)率呈顯著遞減趨勢(shì)，而CD44V6的表達(dá)率呈遞增趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);②PTEN、CD44V6的表達(dá)均與子宮內(nèi)膜樣腺癌的組織病理分級(jí)、手術(shù)病理分期、肌層浸潤(rùn)有關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 PTEN與CD44V6的表達(dá)在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展中起一定的作用，可作為反映子宮內(nèi)膜癌惡性潛能的分子標(biāo)志物。

子宮內(nèi)膜;PTEN;細(xì)胞黏附分子;免疫組織化學(xué)

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖道常見(jiàn)的三大惡性腫瘤之一。子宮內(nèi)膜增生(單純性，復(fù)雜性)、不典型增生和子宮內(nèi)膜癌無(wú)論在形態(tài)上還是在生物學(xué)上為一個(gè)連續(xù)的演變過(guò)程，但其病因?qū)W分子機(jī)制尚不清楚。PTEN是于1997年發(fā)現(xiàn)并命名的一種新的抑癌基因，因其獨(dú)特的作用途徑在腫瘤研究中倍受重視，并且PTEN基因是在子宮內(nèi)膜癌中的突變率最高的抑癌基因。黏附分子CD44是一種分布極為廣泛的細(xì)胞表面跨膜糖蛋白，CD44V6作為CD44的變構(gòu)體，只表達(dá)于發(fā)生轉(zhuǎn)移或有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細(xì)胞［1］。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè) PTEN、CD44V6在不同類(lèi)型子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)，探討二者在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用及與內(nèi)膜癌臨床病理學(xué)特征之間的關(guān)系，來(lái)分析其與內(nèi)膜癌生物學(xué)行為之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2004年1月至2009年12月大慶油田總醫(yī)院婦產(chǎn)科手術(shù)切除的子宮組織標(biāo)本共82例。按病理診斷結(jié)果、經(jīng)病理證實(shí)的子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本40例，子宮內(nèi)膜增生22例(單純性增生7例、復(fù)雜性增生7例、不典型增生8例)，增生期或分泌期子宮內(nèi)膜20例。子宮內(nèi)膜癌按2000年FIGO分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行手術(shù)病理分期:Ⅰ期29例，Ⅱ期4例，Ⅲ期6例，Ⅳ期1例;組織學(xué)分級(jí):G115例、G212例、G313例;組織學(xué)類(lèi)型:子宮內(nèi)膜樣腺癌39例，透明細(xì)胞癌1例;子宮肌層侵潤(rùn)深度:限于內(nèi)膜層10例，侵潤(rùn)＜1/2肌層24例，≥1/2肌層6例?；颊吣挲g33～76歲，平均(48.6±8.3)歲。所有患者有完整的臨床病理資料，取材前均未經(jīng)化療、放療及激素治療。所有標(biāo)本以10%福爾馬林固定，石蠟包埋。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 采用常規(guī)SP法，按說(shuō)明書(shū)操作進(jìn)行。PTEN鼠單抗和鼠抗人CD44V6單抗以及SP試劑盒均購(gòu)自福建邁新生物技術(shù)有限公司，以PBS液代替一抗作陰性對(duì)照，用已知PTEN陽(yáng)性的結(jié)腸癌及CD44V6陽(yáng)性的肺癌切片作陽(yáng)性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定 PTEN及CD44V6陽(yáng)性判定:PTEN以細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性。CD44V6以細(xì)胞膜和/(或)細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)明顯的棕黃色顆粒者為陽(yáng)性(+)，無(wú)著色者為陰性(-)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，根據(jù)數(shù)據(jù)資料類(lèi)型，各組間率的比較采用χ2檢驗(yàn)，等級(jí)相關(guān)采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同子宮內(nèi)膜組織中PTEN和CD44V6的表達(dá) PTEN在正常內(nèi)膜、單純性增生、復(fù)雜性增生、不典型性增生及子宮內(nèi)膜癌中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為:100%、81.25%、76.57%、52.18%和45.34%。進(jìn)行Spearman分析后，提示不同子宮內(nèi)膜組織與PTEN蛋白的表達(dá)強(qiáng)度呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，(r=-0.146，P＜0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而CD44V6在復(fù)雜性增生、不典型性增生及子宮內(nèi)膜癌中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為:10.81%、34.28%、64.63%，正常子宮內(nèi)膜組織及單純性增生子宮內(nèi)膜中無(wú)一例陽(yáng)性表達(dá)(P＜0.05)。

2.2 PTEN和CD44V6陽(yáng)性表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系 子宮內(nèi)膜癌組織中PTEN和CD44V6蛋白的陽(yáng)性表達(dá)與內(nèi)膜癌的發(fā)病年齡無(wú)明顯相關(guān)(P＞0.05)，而與內(nèi)膜癌組織學(xué)類(lèi)型、淋巴轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)(P＜0.05或P＜0.01)。見(jiàn)表1。

表1 子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征與PTEN及CD44V6表達(dá)關(guān)系

3 討論

3.1 PTEN在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)及其臨床意義PTEN基因是1997年在原發(fā)性乳腺癌患者組織中分離獲得的一種新的抑癌基因，該基因具有蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶和雙重特異性磷酸酶的活性［2］。PTEN基因通過(guò)抑制細(xì)胞有絲分裂，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞的黏附、轉(zhuǎn)移和分化等各個(gè)方面發(fā)揮抑癌基因的作用［3］。

本研究發(fā)現(xiàn)PTEN在正常內(nèi)膜、單純性增生、復(fù)雜性增生、不典型性增生及子宮內(nèi)膜癌中的陽(yáng)性表達(dá)率逐級(jí)減少，提示隨著PTEN的表達(dá)強(qiáng)度增高，內(nèi)膜傾向正常，這符合PTEN作為抑癌基因功能的表現(xiàn)，與國(guó)內(nèi)外研究結(jié)果一致，推測(cè)PTEN在子宮內(nèi)膜癌的早期形成階段起作用。伊鐵忠等［4］報(bào)道:PTEN表達(dá)缺失與臨床分期和病理分級(jí)有關(guān)，與肌層浸潤(rùn)、淋巴轉(zhuǎn)移無(wú)明顯相關(guān)性。而本研究則認(rèn)為PTEN的陽(yáng)性表達(dá)與內(nèi)膜癌的發(fā)病年齡無(wú)明顯相關(guān)(P＞0.05)，而與內(nèi)膜癌組織學(xué)類(lèi)型、淋巴轉(zhuǎn)移及臨床分期密切相關(guān)(P＜0.05或P＜0.01)，提示PTEN的缺失使得PTEN對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)控及對(duì)細(xì)胞凋亡、粘附和遷移的控制減弱，有助于癌變的發(fā)生和發(fā)展。

3.2 CD44V6在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其臨床意義 CD44基因定位于11號(hào)染色體短臂上［5］。CD44V6是CD44的變異型，與人體多種腫瘤關(guān)系較為密切，其表達(dá)與腫瘤進(jìn)展程度、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)，認(rèn)為CD44V6可作為獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)。

本研究表明，正常子宮內(nèi)膜組織及單純性增生的子宮內(nèi)膜組織中CD44V6均陰性表達(dá)，而在內(nèi)膜癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為64.63%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示CD44V6表達(dá)可能是內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的促進(jìn)因素。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著子宮內(nèi)膜癌組織學(xué)分級(jí)、臨床分期的級(jí)別增高、肌層浸潤(rùn)的加深和轉(zhuǎn)移，CD44V6的陽(yáng)性表達(dá)呈增高趨勢(shì)，提示CD44V6的陽(yáng)性表達(dá)對(duì)內(nèi)膜癌的侵襲轉(zhuǎn)移和臨床進(jìn)展過(guò)程中起重要作用，表明CD44V6可能是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的晚期事件。

總之，PTEN低水平表達(dá)或CD44V6的高水平表達(dá)，子宮內(nèi)膜腫瘤的惡性程度越高，患者的預(yù)后越差，這兩種蛋白可作為反映子宮內(nèi)膜腫瘤惡性潛能的分子標(biāo)志物，對(duì)其發(fā)生發(fā)展和預(yù)后有重要意義。

［1］ Gunthert U，Hoffmann M，Rudy W，et al.A new variant of glycoprotein CD44 confers metastatic potential to rat carcinoma cells. Cell，1991，65(1):13-24．

［2］ Steck PA，Pershouse MA，Jasser SA，et al.Identification of a candidate tumor suppressor gene，MMAC1，at chromosome 10q23.3 that is mutated in multiple advanced cancers.Nature Genetics，1997，15(4):356-363．

［3］ 杜雪.PTEN與子宮內(nèi)膜癌.國(guó)外醫(yī)學(xué)婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè)，2003，30 (6):385-386．

［4］ 伊鐵忠，糜若然，朱莉.子宮內(nèi)膜癌PTEN PCNA和C2B22的表達(dá)及其意義.中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2006，22(4): 127-128.

163001黑龍江省大慶油田總醫(yī)院醫(yī)院婦產(chǎn)科