劉雅莉 張 鵬 賀萬斌 張昊昱 楊克虎

動物實驗(animal experiment)是生物醫(yī)學研究的基本手段之一，是連接基礎(chǔ)研究和臨床試驗的重要橋梁[1]，也是科學界最具爭議的領(lǐng)域之一[2]。動物實驗的基本目的是初步驗證干預(yù)措施的安全性和有效性，其結(jié)果是決定新干預(yù)措施能否進入臨床研究階段和為進一步制定臨床試驗提供直接證據(jù)，以保護Ⅰ期臨床試驗的志愿者[1]。

臨床前評價(主要是動物實驗)所獲結(jié)論是循證決策的依據(jù)之一。動物實驗的系統(tǒng)評價已成為臨床前研究的新趨勢。分析恰當?shù)南到y(tǒng)評價可為是否進一步開展臨床試驗做出很好的評估[3]。但是報告質(zhì)量低下的動物實驗，將嚴重影響系統(tǒng)評價員對納入研究質(zhì)量的準確判斷。報告質(zhì)量高不代表方法學質(zhì)量一定高，但反之會對讀者了解研究的真實性和實用性帶來很大障礙[1]，造成基礎(chǔ)實驗研究資源的巨大浪費。動物實驗系統(tǒng)評價的發(fā)展，不僅取決于其本身方法學的發(fā)展，也受限于動物實驗報告質(zhì)量的提高和改進。

近20年，生物醫(yī)學期刊及其發(fā)表的動物實驗數(shù)量急劇增加，然而，生物醫(yī)學研究的報告質(zhì)量存在一定的不充分和不完整現(xiàn)象，報告質(zhì)量低下嚴重阻礙了動物實驗科學、實用價值的利用[2]。有研究顯示在隨機抽樣調(diào)查的271項動物研究中僅59%的研究報告了研究目的和假設(shè)，動物的使用數(shù)量，研究動物特征(如種類、性別、年齡和體重)3項重要信息[4]；有33項(12.2%)研究提及隨機分配，僅9.1%(3/33)報告了具體的隨機分配方法。中國期刊發(fā)表的動物實驗信息報告不充分的現(xiàn)象更為嚴峻，有研究對81篇動物實驗文獻進行評價，69篇(85.2%)文獻提及隨機分配，但僅有6篇(9.5%)文獻對隨機分配方法進行了描述；32.5%的文獻未描述各組基線資料的可比性，無一篇文獻對基線資料進行統(tǒng)計學檢驗[5]。動物實驗缺乏設(shè)計、實施和分析的關(guān)鍵性信息，使得讀者獲取科學信息變得異常困難，極大限制了這些基礎(chǔ)研究應(yīng)用于未來的科學研究和政策制定。

自1996年CONSORT聲明發(fā)表后[6]，2010年迎來了動物實驗領(lǐng)域發(fā)展的新契機。動物實驗研究報告指南(Animal Research: Reporting: In Vivo Experiments Guidelines，ARRIVE指南)和動物實驗金標準報告清單(gold standard publication checklist , GSPC)先后發(fā)表，這無疑是動物實驗方法學進程中一項重大的進展。

1 ARRIVE指南

ARRIVE指南由國際實驗動物3R中心(The National Centre for the Replacement, Refinement and Reduction of Animals in Research ,NC3Rs)資助開發(fā)，并于2010年在PLoSBiology[7]，JournalofGeneMedicine,ExperimentalPhysiology,JournalofPhysiology,BritishJournalofPharmacology和LaboratoryAnimals先后發(fā)表。ARRIVE指南包括題目、摘要、引言、方法、結(jié)果和討論6部分，共20個條目及其近30項細則，評估內(nèi)容涉及動物的數(shù)量和特點(包括種類、品系、雌雄和遺傳背景)，飼養(yǎng)場所和飼養(yǎng)，所采用的實驗方法，統(tǒng)計方法和分析方法(包括使用隨機和盲法來減少偏倚)等，并對每個條目內(nèi)容進行了簡要解釋(表1)。ARRIVE指南充分借鑒了CONSORT聲明[8，9]，評價內(nèi)容均是動物實驗所應(yīng)該報告的信息。ARRIVE指南不僅可應(yīng)用于動物實驗的報告，還可用于動物實驗的設(shè)計。

2 GSPC

GSPC[10]由來自荷蘭Radboud大學Nijmegen醫(yī)學中心15名不同專業(yè)的專家組完成起草，清單包括引言、方法、結(jié)果和討論，涉及了10個方面的54個條目，很多條目還有1～10項的細則補充說明(表2)。GSPC的制定也是基于文獻分析和已有科學證據(jù)結(jié)果，包括動物實驗應(yīng)客觀、完整的報告研究設(shè)計方法，飼養(yǎng)動物環(huán)境(包括溫度、濕度、通風、采光和噪音)，營養(yǎng)(營養(yǎng)類型、營養(yǎng)成分、飼養(yǎng)方式)和水等對研究結(jié)果產(chǎn)生重要影響的信息。清單中給出的動物實驗相關(guān)細節(jié)的描述，可幫助研究者納入所有在動物實驗計劃、設(shè)計和實施過程中必要且具體的條目，以提高實驗的可重復(fù)性及對變異的控制[11]。此外，GSPC重點突出了報告飼養(yǎng)條件和設(shè)計動物實驗的基本原理。

ARRIVE指南和GSPC在評價條目數(shù)目上有較大差別，但核心評價內(nèi)容大同小異，都包括了動物實驗的報告要點，當然也有評論指出GSPC細則太多，但尚不影響使用者興趣。ARRIVE指南和GSPC使用對象，既包括設(shè)計、實施動物實驗的研究者，又包括同行評審專家、期刊編輯以及衛(wèi)生決策者。

表1 動物實驗研究報告指南

表2 動物實驗金標準報告清單

現(xiàn)有的生物醫(yī)學期刊稿約中要求動物研究報告的信息非常有限，致使很多研究難以被重復(fù)，制作、發(fā)展相關(guān)系統(tǒng)評價顯得更為困難[10]。以GSPC對發(fā)表動物實驗影響力較高的9種期刊(影響因子最高的達28.8)的稿約進行評估，共涉及74個細則，發(fā)現(xiàn)期刊均未要求動物實驗報告是否采用隨機分配或是否施盲，也沒有要求對剔除動物的原因進行解釋。所評價的期刊中稿約對動物實驗報告信息涵蓋面最廣的是LaboratoryAnimals(54%)，而Nature,Science卻都只占4%。ARRIVE指南和GSPC目的并非是強制性標化研究報告結(jié)構(gòu)，而是為撰寫和發(fā)表動物實驗的研究者提供可參考的規(guī)范，保證動物實驗所提供的信息可以被充分的復(fù)核和利用，而這些評價條目恰恰是同行評審或進行質(zhì)量評估的要點，其目的也是確保評審過程的完整性和透明化[7]。

推動動物實驗報告質(zhì)量的提高需要研究者、編輯、審稿人和研究資助者的共同努力[7]。熱切期望ARRIVE指南和GSPC盡快被推廣使用，在實踐應(yīng)用中不斷發(fā)展和完善，有效地提高動物實驗的設(shè)計、實施、報告質(zhì)量以及對動物實驗的鑒別能力，評估水平，從而促進動物實驗系統(tǒng)評價的發(fā)展。強烈呼吁ARRIVE指南和GSPC盡快被引入生物學期刊稿約制定中，使發(fā)表的研究成果效益最大化。

致謝 在本文寫作過程中，蘭州大學結(jié)核病研究中心祝秉東教授、蘭州大學醫(yī)學實驗中心程杰博士、西北民族大學生命科學學院李瓊毅老師提出了寶貴的建議，在此表示衷心感謝。

[1]楊克虎，主編. 系統(tǒng)評價指導手冊.北京: 人民衛(wèi)生出版社，2010

[2]Guidelines ARRIVE to improve reporting of animal experiments. http://www.nc3rs.org.uk/news.asp?id=1356

[3]Pound P, Ebrahim S, Sandercock P, et al. Where is the evidence that animal research benefits humans? BMJ,2004,328(7438):514-517

[4]Kilkenny C, Parsons N, Kadyszewski E, et al. Survey of the quality of experimental design, statistical analysis and reporting of research using animals. PLoS One,2009,4(11):7824

[5]Jia CY(賈赤宇), Bai F, Wang YC. Analysis and evaluation of the articles concerning animal experiments published in Chinese Journal of Burns during 2000 to 2004. Chinese Journal of Burns (中華燒傷雜志), 2006,22(4):285-287

[6]Begg C, ChoM, Eastwood S, Horton R, et al. Improving the quality of reporting of randomized controlled trials. The CONSORT statement. JAMA, 1996, 276 (8) : 637- 639

[7]Kilkenny C, Browne WJ, Cuthill IC, et al. Improving bioscience research reporting: The ARRIVE guidelines for reporting animal research. PLoS Biol,2010,8(6): 1000412

[8]Schulz KF, Altman DG, Moher D, et al. CONSORT 2010 Statement: updated guidelines for reporting parallel group randomised trials. BMJ, 2010, 340: 332

[9] Moher D, Schulz KF, Altman DG. The CONSORT statement: revised recommendations for improving the quality of reports of parallel-group randomised trials. Lancet,357(9263):1191-1194

[10]Hooijmans CR, Leenaars M, Ritskes-Hoitinga M. A gold standard publication checklist to improve the quality of animal studies, to fully integrate the Three Rs, and to make systematic reviews more feasible. Altern Lab Anim, 2010, 38(2):167-182

[11]Hooijmans C, de Vries R, Leenaars M, et al. The gold standard publication checklist (GSPC) for improved design, reporting and scientific quality of animal studies GSPC versus ARRIVE guidelines. Lab Anim, 2011 ,45(1):61