摘要:獸用生物制品的研究、開發(fā)、生產(chǎn)和檢驗(yàn)離不開各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。簡單介紹了幾種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用，對(duì)于在獸用生物制品試驗(yàn)研究中加深對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作用的進(jìn)一步認(rèn)識(shí)具有一定的意義。

關(guān)鍵詞:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物;獸用生物制品;試驗(yàn);研究;應(yīng)用

中圖分類號(hào):S865.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):1007-273X(2010)08-0010-03

獸用生物制品是用于動(dòng)物傳染病和其他有關(guān)疾病的預(yù)防、診斷和治療的生物制劑。包括疫(菌)苗、毒素、類毒素、免疫血清、血液制品、抗原、抗體、微生態(tài)制劑等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作為“活的試劑與度量器”在許多領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用[1]。在生物制品領(lǐng)域，沒有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，人類就不能研制出具有劃時(shí)代意義的天花、狂犬病、牛瘟、禽流感、口蹄疫等疫苗[2]。在獸用生物制品的研究、開發(fā)、生產(chǎn)和檢驗(yàn)中，都離不開各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。本文就幾種常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用進(jìn)行介紹，僅供參考。

1小鼠

1.1常用品系

1.1.1近交系小鼠國內(nèi)培育的近交系小鼠主要有TA1(津白1號(hào))、TA2(津白2號(hào))、615等;國外引進(jìn)的近交系小鼠主要有BALB/c、C3H/He、AKR、C57BL等。目前全球已培育成500多個(gè)獨(dú)立的近交系。

1.1.2封閉群小鼠主要有KM、ICR、CFW、LACA、NIH等。其中KM(即昆明鼠)是我國生產(chǎn)量、使用量最大的遠(yuǎn)交群小鼠。

1.1.3突變系小鼠主要有裸小鼠、Beige小鼠、Scid小鼠、白內(nèi)障小鼠、糖尿病小鼠等400多個(gè)突變系。主要用于醫(yī)學(xué)研究。

1.1.4雜交F1小鼠主要有B6D2F1、C3D2F1、BC3F1、CD2F1等。

1.2小鼠在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用

1.2.1獸用生物制品菌(毒、蟲)種子的篩選和鑒定小鼠對(duì)許多動(dòng)物病原微生物敏感，除用于復(fù)制動(dòng)物傳染病模型外，還常用于毒力測定、最小致死量測定(MLD)、半數(shù)致死劑量(LD50)測定、中和試驗(yàn)等;也用于疫苗弱毒(菌)種子的安全檢查和毒力返強(qiáng)試驗(yàn);對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、破傷風(fēng)梭菌等毒素敏感，用于毒素測定和獸用疫苗脫毒鑒定等。

1.2.2病毒增殖和抗原制備乙型腦炎病毒和狂犬病病毒于乳鼠腦內(nèi)可以獲得高滴度的病毒，因此常用于毒株的傳代和抗原生產(chǎn)。如豬乙型腦炎滅活疫苗就是將乙腦病毒種毒接種小鼠腦內(nèi)，收獲鼠腦制成。乙型腦炎鼠腦毒還可制備診斷用抗原。

1.2.3抗體制品的制備使用BALB/c、AKR、C57BL/6J等小鼠免疫后的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，進(jìn)行單克隆抗體的制備和研究。如抗豬瘟病毒單克隆抗體的制備等。單克隆抗體已廣泛用于疾病診斷、治療和分子生物學(xué)研究。

1.2.4新型獸用疫苗免疫效果評(píng)價(jià)獸用新型疫苗在試驗(yàn)研究階段，小鼠常作為動(dòng)物模型進(jìn)行疫苗免疫效果評(píng)價(jià)。如用于針對(duì)口蹄疫的基因工程亞單位疫苗、偽狂犬病的基因工程活載體疫苗、禽流感和豬瘟的DNA疫苗、新城疫和弓形蟲病的抗獨(dú)特型抗體疫苗、禽流感和PRRS的抗獨(dú)特型疫苗等的免疫效果評(píng)價(jià)[3-5]。

1.2.5獸用生物制品的檢驗(yàn)在多種獸用生物制品的實(shí)驗(yàn)室安全檢驗(yàn)、效力檢驗(yàn)或效價(jià)測定中，除使用靶動(dòng)物外，常使用小鼠等小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物替代靶動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。

2大鼠

2.1常用品系

常用品系主要有SD大鼠、Wistar大鼠、F344大鼠、SHR大鼠、ACL大鼠等，其中常用的Wistar大鼠，既有近交系，也有遠(yuǎn)交群。

2.2大鼠在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用

大鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用占20%以上，主要用于人類醫(yī)藥學(xué)方面的研究。在我國獸用生物制品試驗(yàn)研究中，除豬旋毛蟲傳代保種等少數(shù)試驗(yàn)研究應(yīng)用大鼠外，其他報(bào)道的不多。國外目前正利用大鼠進(jìn)行雙特異性單克隆抗體的研究，其廣闊的前景有望在獸用生物制品的相關(guān)研究中得到應(yīng)用。

3豚鼠

3.1常用品系

目前世界上有12個(gè)近交品系，其中近交系2和近交系13等主要用于生物醫(yī)學(xué)研究。國內(nèi)使用的豚鼠多為短毛英國種豚鼠，也稱荷蘭豬，屬封閉群。

3.2豚鼠在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用

3.2.1血清學(xué)診斷制劑制備豚鼠是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清中補(bǔ)體含量最高的動(dòng)物，補(bǔ)體與免疫反應(yīng)有關(guān)，因此廣泛用于血清學(xué)診斷。獸用生物制品中的凍干補(bǔ)體就是來自豚鼠血清，補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)常用于診斷多種動(dòng)物傳染病。

3.2.2傳染病模型研究豚鼠對(duì)很多致病菌和病毒十分敏感，是進(jìn)行各種傳染性疾病研究的重要實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[6]。如對(duì)結(jié)核桿菌、鼠疫桿菌、布氏桿菌、炭疽桿菌等人獸共患病原微生物敏感。豚鼠尤其對(duì)人和牛型結(jié)核桿菌敏感，是結(jié)核桿菌分離、鑒定、診斷的最佳模型，也應(yīng)用于牛型、禽型結(jié)核菌素的效價(jià)標(biāo)定。

3.2.3獸用生物制品檢驗(yàn)常用于獸用疫苗和治療制劑的安全檢驗(yàn)和效力檢驗(yàn)，如口蹄疫疫苗、破傷風(fēng)類毒素、抗炭疽血清、抗氣腫疽血清等。

3.2.4過敏反應(yīng)試驗(yàn)豚鼠是致敏試驗(yàn)反應(yīng)程度最高的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，常用于變態(tài)反應(yīng)的研究。由于疫苗在臨床應(yīng)用有可能引起過敏反應(yīng)，因此在臨床使用前應(yīng)進(jìn)行豚鼠主動(dòng)過敏試驗(yàn)。

3.2.4獸用弱毒活疫苗菌種的培育如豬丹毒制苗用弱毒株(GC42)是將豬丹毒強(qiáng)毒株通過豚鼠連續(xù)傳370代培育而成，禽霍亂制苗用弱毒株(G190E40)是禽霍亂強(qiáng)毒株通過豚鼠連續(xù)傳190代培育而成等。

4兔

4.1常用品種

實(shí)驗(yàn)研究用兔有38種不同的類型。我國醫(yī)學(xué)科研和教學(xué)中最常用的是中國白兔、青紫蘭兔和日本大耳白兔等3個(gè)品種，其次是新西蘭白兔、比利時(shí)兔等。

4.2實(shí)驗(yàn)兔在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用

4.2.1發(fā)熱研究及熱源試驗(yàn)兔體溫變化十分敏感，最易產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng)，發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定，廣泛應(yīng)用于獸用生物制劑的熱源質(zhì)檢查。如感染性發(fā)熱:給兔皮下注射殺死的大腸桿菌培養(yǎng)液，幾小時(shí)內(nèi)即可引起發(fā)熱，并持續(xù)12h。熱源檢查:熱源是微生物及其崩解代謝物，如大腸桿菌的熱源僅0.002μg/kg即能使兔發(fā)熱。豬瘟弱毒效力檢驗(yàn):豬瘟病毒弱毒株能使兔產(chǎn)生典型的熱反應(yīng)，其效力檢驗(yàn)的結(jié)果主要依據(jù)兔的熱型反應(yīng)進(jìn)行判定，是目前豬瘟活疫苗效力檢驗(yàn)的“金標(biāo)”方法。

4.2.2獸用疫苗菌(毒)種的培育和疫苗生產(chǎn)兔常用于豬瘟活疫苗、兔瘟滅活疫苗毒種的鑒定、傳代和保種，也是生產(chǎn)豬瘟活疫苗(兔源)和兔瘟滅活疫苗的主要原材料。同時(shí)我國廣泛應(yīng)用的豬瘟兔化弱毒株(C株)就是石門強(qiáng)毒通過兔體連續(xù)傳幾百代而培育成的;另外豬肺炎支原體弱毒疫苗株、口蹄疫病毒弱毒疫苗株、牛瘟病毒弱毒疫苗株、狂犬病病毒的“固定毒”等都是經(jīng)過兔體傳代培育而成的。

4.2.3抗體制品的制備兔免疫反應(yīng)靈敏，血清量產(chǎn)生較多，被廣泛用于各種高效價(jià)和特異性強(qiáng)的免疫血清的制備。如病原體免疫血清、間接免疫血清(如兔抗羊IgG抗血清)、抗補(bǔ)體抗體血清以及抗組織免疫血清等的制備。

4.2.4免疫學(xué)研究和生物制品檢驗(yàn)兔對(duì)多種微生物都非常敏感，可建立乙型腦炎、狂犬病、偽狂犬病、血吸蟲、弓形體等傳染病的動(dòng)物模型。進(jìn)行各種獸用生物制品中的毒素和類毒素反應(yīng)試驗(yàn)、過敏性試驗(yàn)、免疫試驗(yàn)。同時(shí)兔廣泛應(yīng)用于獸用生物制品的安全檢驗(yàn)、效力檢驗(yàn)或效價(jià)測定等。

5雞

5.1常用品種

雞作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是從1789年Rastaur用雞研究禽霍亂開始，它的品種很多，目前世界標(biāo)準(zhǔn)品種就有80余個(gè)，如來航雞、洛克雞、澳洲黑等，有的品種建立了自己的SPF種雞群。我國于1979年開始進(jìn)行SPF雞的研究，已成功選育多個(gè)家系的SPF種雞群[7]。

5.2雞在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用

5.2.1疫苗弱毒株的培育許多動(dòng)物病毒疫苗弱毒株就是通過雞胚連續(xù)接種傳代培育而成。如雞胚化羊痘病毒株、雞胚化乙型腦炎毒株、雞胚化狂犬病毒株等都曾成功地用作疫苗毒株。另外還有鴨肝炎病毒可通過雞胚傳代致弱、傳染性法氏囊病毒野毒株可通過雞胚成纖維細(xì)胞傳代致弱，而番鴨呼腸孤病毒弱毒疫苗株則是通過番鴨胚成纖維細(xì)胞和雞胚成纖維細(xì)胞交替?zhèn)鞔x育而成。

5.2.2疫苗弱毒株毒力返強(qiáng)試驗(yàn)雞胚來源的弱毒疫苗株在雞體連續(xù)傳代后有可能導(dǎo)致其毒力增強(qiáng)，因此雞常用于雞胚來源的弱毒疫苗株的毒力返強(qiáng)試驗(yàn)。

5.2.3禽類病毒疫苗毒種的鑒定雞(包括SPF雞胚、雞胚成纖維細(xì)胞、雞紅細(xì)胞等)常用于禽類病毒疫苗毒種的鑒定。如新城疫活疫苗種毒株的腦內(nèi)致病指數(shù)(ICPI)的測定、靜脈致病指數(shù)(IVPI)的測定、半數(shù)致死量(ELD50)、半數(shù)感染量(EID50)、雞胚最小致死量的平均致死時(shí)間(MDT/MLD)測定以及中和試驗(yàn)等;雞紅細(xì)胞還可用于病毒的血凝及血凝抑制試驗(yàn)。

5.2.4生物制品的生產(chǎn)和質(zhì)量鑒定SPF雞胚常用作禽類病毒活疫苗毒種的繁殖、培養(yǎng)和保種，是進(jìn)行病毒學(xué)研究和禽用疫苗、高免蛋黃抗體生產(chǎn)的高標(biāo)準(zhǔn)原材料，同時(shí)SPF雞胚成纖維細(xì)胞還可以生產(chǎn)偽狂犬活疫苗、狂犬病疫苗、動(dòng)物衣原體疫苗等。SPF雞(包括雞胚及成纖維細(xì)胞)廣泛用于禽用疫苗及診斷制劑的安全檢驗(yàn)、效力檢驗(yàn)或效價(jià)測定。

5.2.5疫苗免疫效果評(píng)價(jià)SPF雞和雞胚排除了非研究病原及其抗體的干擾作用，有利于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，常用于基因工程疫苗以及多聯(lián)多價(jià)禽用新型疫苗的免疫試驗(yàn)研究。另外普通雞群常應(yīng)用于禽用疫苗的田間試驗(yàn)和區(qū)域試驗(yàn)，以確保疫苗存在母源抗體和循環(huán)抗體時(shí)依然有效。

6豬和小型豬

6.1常用品種

當(dāng)今世界上有四大著名豬種，即大白豬、長白豬、杜洛克豬、漢普夏豬。我國地方品種有48個(gè)，培育品種有20多個(gè)。目前用作生物醫(yī)學(xué)研究用的小型豬主要有戈廷根小型豬、明尼蘇達(dá)小型豬、育克坦小型豬等。我國小型豬主要有西雙版納近交系小型豬、貴州小型香豬、廣西巴馬小型豬、五指山小型豬等。

6.2豬和小型豬在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用

目前小型豬主要用于生物醫(yī)學(xué)研究，如開展人類疾病模型培育、進(jìn)行人類異種器官移植研究、生產(chǎn)豬源性人用生物制品和功能食品等[8]。我國少數(shù)幾個(gè)農(nóng)業(yè)系統(tǒng)的科研單位已開展小型豬的選育和相關(guān)研究工作，但在獸用生物制品的試驗(yàn)研究中應(yīng)用較少，國內(nèi)主要應(yīng)用普通級(jí)或清潔級(jí)的非免疫豬，有的應(yīng)用普通豬群，尤其在豬用生物制品的實(shí)驗(yàn)室安全試驗(yàn)、效力試驗(yàn)、攻毒試驗(yàn)、臨床試驗(yàn)、區(qū)域試驗(yàn)、疫苗評(píng)價(jià)以及建立動(dòng)物傳染病模型等方面作為供試動(dòng)物大量應(yīng)用。隨著我國動(dòng)物醫(yī)學(xué)科學(xué)事業(yè)發(fā)展以及小型豬標(biāo)準(zhǔn)化和SPF化程度的提高，小型豬及SPF豬在獸用生物制品試驗(yàn)研究中必將得到廣泛應(yīng)用。

7其他實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用

其他實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物在獸用生物制品試驗(yàn)研究中的應(yīng)用詳見表1。

參考文獻(xiàn):

[1]湯宏佳，孔利佳.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)[M].武漢:湖北人民出版社，2006.

[2]寧宜寶.獸用疫苗學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2008.

[3]劉業(yè)兵，楊培豫，鄭明.DNA疫苗的動(dòng)物試驗(yàn)研究及其應(yīng)用前景[J].中國獸藥雜志，2004，38(5):42-46.

[4]任慧英，楊漢春.繁殖與呼吸綜合征疫苗研究進(jìn)展[J].河北畜牧獸醫(yī)，2005，21(6):13-14.

[5]賈洪林，仇華吉，李娜.新型豬瘟疫苗研究現(xiàn)狀[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2005，27(4):312-315.

[6]常寶，杜建華.淺談幾種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用[J].河北北方學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，22(3):47-48.

[7]文力正，任文陟.我國禽類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2008(13):258-262.

[8]張德福，劉東.國內(nèi)外小型豬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究[J].生物學(xué)通報(bào)，2004，39(10):14-16.