李 清,劉 姣,曹秀蓮,由會(huì)玲

(河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院,河北石家莊 050091)

垂盆草不同提取物對(duì)小鼠移植性腫瘤抑制作用的初步研究

李 清,劉 姣＊,曹秀蓮,由會(huì)玲

(河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院,河北石家莊 050091)

初步觀察垂盆草不同提取物的抗腫瘤藥效。采用小鼠S180肉瘤模型及小鼠S180腹水癌模型,分別用垂盆草水提物、垂盆草醇提物灌胃給藥,連續(xù)8天,測定腹水瘤小鼠的生命延長率及實(shí)體瘤小鼠的瘤重。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,垂盆草水提物、垂盆草醇提物對(duì)小鼠S180肉瘤的生長有明顯抑制作用,腫瘤重量明顯減輕。對(duì)小鼠S180腹水瘤小鼠生存天數(shù)亦有明顯延長作用。說明垂盆草對(duì)小鼠移植性腫瘤具有抑制作用,為進(jìn)行臨床應(yīng)用和深入的基礎(chǔ)研究提供了依據(jù)。

垂盆草,S180,荷瘤小鼠

垂盆草(Sedum sarmentosum Bunge),系景天科多年生草本植物,分布于全國大部分地區(qū),新鮮或干燥全草入藥,是一味民間流傳極廣的常用草藥。此藥性涼,味甘、淡,具有清利濕熱、解毒功效,主要用于治療濕熱黃疽、小便不利、癰腫瘡瘍,現(xiàn)代藥理研究表明其具有抑制炎性滲出,減少肝細(xì)胞損傷,降低血清丙基酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平的作用,臨床廣泛用于治療急、慢性肝炎。同時(shí),垂盆草也是一常用抗癌中藥,中醫(yī)認(rèn)為其具有敗毒抗癌、消炎退腫之功,在肝癌、肺癌、鼻咽癌等腫瘤疾病的治療中均作為主藥應(yīng)用于臨床,但目前對(duì)其抗癌作用的基礎(chǔ)研究鮮見報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)對(duì)其抗癌作用進(jìn)行初步研究,為臨床使用提供理論依據(jù)。

1 藥品與試劑

垂盆草干品,由石家莊樂仁堂提供。垂盆草提取物(Extract of Sedum sarmentosum Bunge ESB)的制備:醇提物(ESB-Ⅰ):將400g藥材常規(guī)加工粉碎后,用70%EtOH回流提取2次,每次1h,合并提取液。提取液一部分用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至無醇味,置冰箱備用。水提物(ESB-Ⅱ):垂盆草250g,加水至沒過藥面加熱,水沸后煎煮20min,趁熱過濾,蒸發(fā)濃縮,置冰箱備用。注射用環(huán)磷酰胺(0.2g/支),江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司,批號(hào)10051521。

2 動(dòng)物

KM小鼠,清潔級(jí),18～22g,♂,由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)SCXK (冀)2008-1-003。合格證編號(hào)903169。小鼠S180腹水瘤株由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供。

3 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

3.1 劑量設(shè)計(jì)

根據(jù)藥材的臨床用藥劑量(人臨床用量15～30g/d,取20g),由劑量換算公式折算成小鼠劑量,作為小鼠的給藥低劑量,即低劑量為3.33g生藥/kg。高劑量為6.67g生藥/kg。

3.2 對(duì)小鼠S180實(shí)體瘤的影響

取荷瘤鼠(為昆明種小鼠,腹腔接種S180腹水瘤7d,購自河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心),頸椎脫臼處死,無菌條件下抽提腹水,接種于6只小鼠腹腔內(nèi),1m L/只,使其傳代,然后取腹腔內(nèi)接種9d,生長良好的腹水型S180荷瘤小鼠,頸椎脫臼處死,無菌條件下抽取S180瘤液,以生理鹽水作1:2稀釋,于小鼠右腋皮下接種0.2m l/只,8h后,隨機(jī)分為6組,每組10只,分別為模型對(duì)照組、垂盆草水提物低劑量組(3.33g生藥/kg)、垂盆草水提物高劑量組(6.67g生藥/kg)、垂盆草醇提物低劑量組(3.33g生藥/kg)、垂盆草醇提物高劑量組(6.67g生藥/kg)及陽性藥環(huán)磷酰胺組(40mg/ kg)。除陽性藥腹腔注射外,其余各給藥組每天灌胃給藥,容量為0.2m l/10g體重,模型對(duì)照組給予等容量蒸餾水,連續(xù)給藥8天,停藥次日處死小鼠,稱體重后處死小鼠,剝離皮下瘤塊,稱瘤重,按下式計(jì)算抑瘤率。抑瘤率=(對(duì)照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)/對(duì)照組平均瘤重＊100,采用spss統(tǒng)計(jì)軟件處理,比較各組間差異情況。

結(jié)果見表1,結(jié)果表明,與模型對(duì)照組相比,垂盆草水提物低劑量組(3.33g生藥/kg)、高劑量組(6.67g生藥/kg)、垂盆草醇提物低劑量組(3.33g生藥/kg)、高劑量組(6.67g生藥/kg)及環(huán)磷酰胺組皆有顯著抑制S180腫瘤生長的作用,以上各組小鼠瘤重均較模型對(duì)照組輕(p<0.01),說明垂盆草對(duì)小鼠S180肉瘤有明顯抑瘤作用。

表1 垂盆草不同提取物對(duì)小鼠S180肉瘤的抑瘤作用(x±S,n=10)

3.3 對(duì)小鼠S180腹水瘤的影響

無菌條件下,抽取已接種9d S180腹水瘤小鼠的腹水與生理鹽水按1:2的比例進(jìn)行稀釋,無菌條件下,按常規(guī)小鼠腹腔接種0.2m l/只細(xì)胞懸液,制成腹水瘤模型。8h后,隨機(jī)分為6組,每組10只,分別為模型對(duì)照組、垂盆草水提物低劑量組(3.33g生藥/kg)、垂盆草水提物高劑量組(6. 67g生藥/kg)、垂盆草醇提物低劑量組(3.33g生藥/kg)垂盆草醇提物高劑量組(6.67g生藥/kg)及陽性藥環(huán)磷酰胺組(40mg/kg)。除陽性藥皮下注射外,其余各給藥組每天灌胃給藥,容量為0. 2m l/10g體重,模型對(duì)照組給予等容量蒸餾水,連續(xù)給藥8d,觀察和紀(jì)錄動(dòng)物死亡時(shí)間,計(jì)算生存天數(shù),按下式計(jì)算生命延長率。生命延長率=(給藥組平均生存天數(shù)-對(duì)照組平均生存天數(shù))/對(duì)照組平均生存天數(shù)＊100。結(jié)果見表2。

模型組小鼠從接種第3 d起腹部便開始增大,至5 d左右腹部增大明顯。垂盆草水提物組從接種第4 d起腹部開始增大,至6 d左右腹部增大明顯,與模型組相比,小鼠在治療過程中活動(dòng)、飲食及精神狀況良好。環(huán)磷酰胺組小鼠厭食、脫毛、活動(dòng)減少、精神狀況不佳,腹水較少或無腹水產(chǎn)生。垂盆草各治療組從接種第3 d起腹部便開始增大,至5 d左右腹部增大明顯,無明顯脫毛現(xiàn)象,但腹水情況減輕不明顯。

從表2可知,垂盆草醇提物低劑量組(3.33g生藥/kg)小鼠生存天數(shù)均較模型對(duì)照給小鼠長(P<0.01)。與模型組相比,環(huán)磷酰胺組和垂盆草各治療組均能延長小鼠的存活期(P<0.05、P <0.01)。除垂盆草低劑量組及環(huán)磷酰胺組外, S180腹水瘤小鼠經(jīng)治療后生命延長率均未超過“抗癌藥體內(nèi)藥效試驗(yàn)規(guī)程”限定的30%的標(biāo)準(zhǔn)(肖洪彬,2007)。本試驗(yàn)結(jié)果表明,垂盆草對(duì)小鼠S180腹水瘤有一定延長生存天數(shù)的作用,但此作用有待進(jìn)一步深入研究。

表2 垂盆草不同提取物對(duì)小鼠S180腹水瘤的生存天數(shù)的影響(x±S,n=10)

5 討論

由于目前臨床常用抗腫瘤藥物大多存在嚴(yán)重的毒副作用以及腫瘤細(xì)胞耐藥性的問題,不斷尋找新的高效低毒的抗腫瘤藥物一直是抗腫瘤研究的重要課題。從植物中尋找天然抗腫瘤活性成分是研究抗腫瘤藥物的一條重要途徑。近年來,從祖國傳統(tǒng)醫(yī)藥寶庫中發(fā)掘新的抗癌藥物已經(jīng)成為腫瘤治療的研究熱點(diǎn)之一,并且這些新的抗癌藥物在臨床中的應(yīng)用也取得了可喜的進(jìn)展。垂盆草作為一種重要的藥用植物資源,在臨床上應(yīng)用廣泛,近年用于癌腫日漸增多,本試驗(yàn)觀察了垂盆草不同提取物對(duì)小鼠 S180肉瘤的抑制作用,結(jié)果表明垂盆草對(duì)小鼠 S180肉瘤的生長有明顯抑制作用,為垂盆草在臨床上腫瘤的治療提供初步的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),今后將進(jìn)一步對(duì)其抗癌活性物質(zhì)進(jìn)行深入研究。

[1] 徐叔云,卞如鐮,陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)(第二版)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社.1991

[2] 扈瑞平,張興夫,杜玲等.沙蔥多糖對(duì)S180腹水瘤小鼠抗腫瘤和免疫作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].飼料工業(yè).2010,31(10):34 -36.

Effects of the different extracts from sedum sarmentosum bunge on tumor-bearing m ice

LIQing,LIU Jiao,CAO Xiu-lian,YIOU Hui-ling

(College of Traditional Chinese M edical,Hebei M edical University,Shijiazhuang Hebei050091,China)

The research was to observe the effects of the different extracts from Sedum sarmentosum Bunge on tumor-bearing mice.The sarcoma 180(S180)was transp lanted into the abdominal cavity and armpit of mouse and then the survival time and the tumor weight of the tumor-bearing mice treated w ith the different extracts from Sedum sarmentosum Bunge were measured and compared w ith the control group.The results showed that the different extracts from Sedum sarmentosum Bunge could obviously inhibit the tumo r grow th and p ro long the survival time of the tumo r-bearing m ice.

Sedum sarmentosum Bunge;S180;Tumor-bearing mice

R285

:A

1001-9383(2010)04-0054-03

2010-06-10

河北省科技廳支撐項(xiàng)目(062761955)

李清(1972-),女,河北石家莊人,碩士,副教授,從事中藥藥理學(xué)教學(xué)及科研工作.

劉姣,Email:fairypc-lj@163.com