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        異丙酚對大鼠急性壞死性胰腺炎的干預(yù)作用

        2010-11-23 12:40:48吳敬醫(yī)張義勝金孝岠趙國海
        中華胰腺病雜志 2010年1期
        關(guān)鍵詞:制模異丙酚脂肪酶

        吳敬醫(yī) 張義勝 金孝岠 趙國海

        ·論著·

        異丙酚對大鼠急性壞死性胰腺炎的干預(yù)作用

        吳敬醫(yī) 張義勝 金孝岠 趙國海

        目的探討異丙酚對大鼠急性壞死性胰腺炎(ANP)的干預(yù)作用及其機制。方法54只雄性SD大鼠按隨機表法分為假手術(shù)組、ANP組、異丙酚組。異丙酚組在ANP制模后經(jīng)陰莖背靜脈持續(xù)泵輸注異丙酚10 mg·kg-1·h-1。制模后3、6、12 h分批處死大鼠,取血檢測血清淀粉酶、脂肪酶、一氧化氮(NO)、TNF-α、IL-6水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,取胰腺組織常規(guī)病理檢查并評分。結(jié)果制模后6 h,假手術(shù)組、ANP組和異丙酚組的血淀粉酶水平分別為(1743±370)U/L、(7745±1030)U/L和(5529±874)U/L;脂肪酶為(274.9±36.1)U/L、(1672±262)U/L和(1219±207)U/L;TNF-α為(1.110±0.276)mg/L、(3.191±0.279)mg/L和(2.361±0.281)mg/L;IL-6為(102.6±28.5)ng/L、(334.1±34.0)ng/L和(268.6±29.8)ng/L;NO為(42.2±18.1)μmol/L、(120.7±22.3)μmol/L和(73.6±19.3)μmol/L;SOD為(120.6±20.1)U/ml、(54.1±15.3)U/ml和(85.7±17.1)U/ml;胰腺病理評分為0.333±0.408、4.417±0.665和3.500±0.707。ANP組血清淀粉酶、脂肪酶、IL-6、TNF-α、NO水平及胰腺病理評分均較假手術(shù)組明顯升高(P<0.05),而SOD活性明顯降低(P<0.05)。異丙酚組血清淀粉酶、脂肪酶、IL-6、TNF-α、NO水平及胰腺病理評分均較ANP組明顯降低(P<0.05),而SOD活性明顯升高(P<0.05)。結(jié)論異丙酚可降低ANP大鼠血清淀粉酶和脂肪酶水平,減輕胰腺組織的損害,對ANP具有一定的治療作用。

        胰腺炎,急性壞死性; 異丙酚; 模型,動物

        大多學(xué)者認(rèn)為,在重癥急性胰腺炎(SAP)的發(fā)病過程中,炎癥介質(zhì)、氧自由基的大量釋放起著重要的作用。因此,如何阻止炎癥介質(zhì)、氧自由基的大量釋放成為阻止胰腺炎癥及壞死發(fā)展的重要手段。異丙酚(propofol)是一種常用的靜脈麻醉藥,具有作用迅速、消除半衰期短等優(yōu)點,已廣泛應(yīng)用于麻醉誘導(dǎo)、維持及重癥監(jiān)護(hù)患者的鎮(zhèn)靜。近來研究發(fā)現(xiàn),異丙酚還具有較強的抗炎、抗氧化作用[1-2]。本研究旨在探討異丙酚對急性壞死性胰腺炎(ANP)大鼠的干預(yù)作用。

        材料和方法

        一、實驗動物及分組

        健康成年雄性SD大鼠54只,體重為(300±30)g,清潔級,由南京安立默公司提供。按隨機表法分為假手術(shù)組、ANP組和異丙酚組。每組再分為術(shù)后3、6、12 h 3個時間點,每個時間點6只大鼠。

        參照Aho等[3]和王勇等[4]方法,以微量輸液泵持續(xù)向膽胰管逆行輸注4%牛磺脫氧膽酸鈉溶液1 ml/kg體重(0.1 ml/min)制備ANP模型。制模前,以4.5號頭皮針經(jīng)大鼠陰莖背靜脈建立靜脈通道。ANP組在制模后立即以微量注射泵持續(xù)靜脈輸注生理鹽水12 ml·kg-1·h-1。異丙酚組在制模后立即持續(xù)輸注異丙酚10 mg·kg-1·h-1(用生理鹽水稀釋為總?cè)萘?2 ml·kg-1·h-1)。假手術(shù)組進(jìn)腹后僅翻動胰腺數(shù)次,隨即關(guān)腹,靜脈輸注等容量生理鹽水。

        術(shù)后3、6、12 h處死大鼠,經(jīng)下腔靜脈取血,分離血清,-20℃ 保存。取部分胰腺組織置10%中性福爾馬林溶液固定,常規(guī)病理檢查。

        二、觀察指標(biāo)和檢測方法

        1.血清淀粉酶、脂肪酶檢測:采用全自動生化分析儀檢測(日立7170 全自動生化分析儀,日本),按試劑盒說明書操作。

        2.血清TNF-α、IL-6含量檢測:應(yīng)用中國人民解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所提供的TNF-α、IL-6試劑盒,按說明書操作,應(yīng)用中科大公司生產(chǎn)的GC-911γ免疫計數(shù)儀檢測。

        3.血清NO、SOD水平檢測:應(yīng)用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒檢測,嚴(yán)格按照說明書操作。NO含量測定采用硝酸還原酶法,以NO2-/NO3-的比值反映NO水平;SOD活性采用比色法測定。

        4.病理學(xué)檢查:胰腺組織切片由我院病理科醫(yī)師在光鏡下觀察,并按Schmidt標(biāo)準(zhǔn)[5]進(jìn)行雙盲評分。

        三、統(tǒng)計學(xué)處理

        結(jié) 果

        一、各組血清淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6、NO水平及SOD活性的變化

        與假手術(shù)同時間點組相比,ANP組血清淀粉酶、脂肪酶、IL-6、TNF-α、NO水平均明顯升高(P<0.05),而SOD活性明顯降低(P<0.05)。異丙酚組血清淀粉酶、脂肪酶、IL-6、TNF-α、NO水平較ANP同時間點組明顯降低(P<0.05),SOD活性明顯升高(P<0.05);與假手術(shù)組比較,除3 h組的NO含量及SOD活性外,其他各組仍有明顯差異(P<0.05,表1)。

        表1 各組血清淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6、NO水平及SOD活性的比較

        注:與假手術(shù)組同時間點比較,aP<0.05;與ANP組同時間點比較,bP<0.05

        二、大鼠胰腺組織病理改變

        假手術(shù)組胰腺無明顯改變。ANP組大鼠胰腺肉眼可見明顯充血水腫、出血,胰腺周圍散在淡黃色皂化斑;光鏡下見間質(zhì)充血水腫,胰腺組織出血、壞死,大量炎性細(xì)胞浸潤,胰腺腺泡結(jié)構(gòu)消失,腺泡出現(xiàn)空泡化。異丙酚組胰腺的病理改變較ANP組減輕。假手術(shù)組、ANP組和異丙酚組3 h點的病理評分分別為0.417±0.376、3.417±0.585和2.417±0.736;6 h點分別為0.333±0.408、4.417±0.665和3.500±0.707;12 h點為0.250±0.418、6.333±0.606和5.750±0.758。ANP組和異丙酚組的胰腺病理評分均明顯高于假手術(shù)組(P<0.05);異丙酚組3、6 h點的胰腺病理評分又明顯低于ANP組(P<0.05),但12 h點的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

        討 論

        本實驗采用經(jīng)胰膽管內(nèi)逆行注射4%?;敲撗跄懰徕c建立ANP模型。制模后3 h血淀粉酶、脂肪酶明顯升高,胰腺出血、壞死、炎性細(xì)胞浸潤、腺泡空泡化,表明模型制備成功。

        在胰腺炎的發(fā)生、發(fā)展中,大量炎性介質(zhì)及氧自由基的生成,促炎與抗炎因子的失衡已被認(rèn)為是其主要機制之一。在SAP時,胞內(nèi)誘生型一氧化氮合成酶(iNOS)的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平增加,iNOS大量產(chǎn)生并激活,致使NO生成增多,誘導(dǎo)胰腺損傷[6]。超氧化物岐化酶(SOD)可以特異性地催化氧自由基發(fā)生岐化反應(yīng),對機體起保護(hù)作用,其活性的高低間接反映機體清除氧自由基的能力。本實驗結(jié)果顯示,ANP組血清NO水平在制模后持續(xù)升高,SOD活性持續(xù)下降,表明機體清除氧自由基的能力下降。與ANP組相比,異丙酚干預(yù)后,血清NO、淀粉酶、脂肪酶水平均明顯降低(P<0.05),SOD活性明顯增加(P<0.05),胰腺組織病理評分也降低,但仍高于假手術(shù)組,表明異丙酚干預(yù)ANP有一定的治療作用,與楊引等[7]的報道一致。這可能與異丙酚具有自由基清除劑類似的酚羥基結(jié)構(gòu)有關(guān)。

        文獻(xiàn)報道[8-9],急性胰腺炎癥狀出現(xiàn)后IL-6水平>140 U/L時提示為SAP。TNF-α也是SAP時最早升高的炎癥介質(zhì)之一,是刺激其他細(xì)胞因子釋放的重要啟動因子。本實驗結(jié)果顯示,ANP制模后,血TNF-α、IL-6水平較假手術(shù)組明顯升高。應(yīng)用異丙酚干預(yù)后血TNF-α、IL-6水平較ANP組均明顯下降(P<0.05)。表明異丙酚具有抑制炎性介質(zhì)的生成或釋放、減輕炎癥反應(yīng)的功效,與國內(nèi)外相關(guān)報道一致[1,10-11]。

        總之,異丙酚具有抗氧化、抗炎、抑制炎性介質(zhì)生成的作用,對SAP有著積極的干預(yù)作用,但單一應(yīng)用異丙酚尚不能有效地控制胰腺炎的病變。因此,臨床上還需要探索更多或更有效的治療方法。

        [1] Taniguchi T,Kanakura H,Takemoto Y,et al.Effects of ketamine and propofol on the ratio of interleukin-6 to interleukin-10 during endotoxemia in rats.Tohoku J Exp Med,2003,200:85-92.

        [2] 金玄玉,趙蕓慧,劉海梅,等.異丙酚對內(nèi)毒素血癥NO、SOD及MDA水平的影響.中國麻醉學(xué)雜志,2004,24:33-35.

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        [10] 金玄玉,戚其學(xué),王昆鵬.異丙酚對內(nèi)毒素血癥大鼠肺中TNF-α作用影響的研究.中國血液流變學(xué)雜志,2004,14:169-172.

        [11] 張倩,金玄玉,何曉帆.異丙酚對內(nèi)毒素血癥大鼠血清TNF-α、IL-1β及IL-10的影響.實驗動物與比較醫(yī)學(xué),2006,26:98-100.

        2009-05-25)

        (本文編輯:屠振興)

        Effectsofpropofolonsevereacutepancreatitisinrats

        WUJing-yi,ZHANGYi-sheng,JINXiao-ju,ZHAOGuo-hai.

        DepartmentofICU,YijishanHospital,WannanMedicalCollege,Wuhu241001,China

        ZHAOGuo-hai,Email:yjsyy228@126.com

        ObjectiveTo investigate the therapeutic effects and mechanisms of propofol on acute necrotizing pancreatitis(SAP) in rats.Methods54 male Sprague-Dawley rats were randomized into three groups with 18 rats in each group: sham-operation group, ANP group, propofol-treated group. After ANP models were induced, propofol(10 mg·kg-1·h-1) were injected by dorsal vein of penis in the propofol-treated group. The rats in all groups were sacrificed at 3, 6, 12 hours after induction of the model. The serum amylase, lipase, nitric oxide (NO), TNF-α, superoxide dismutase (SOD), IL-6 were detected; the histopathological score of pancreatic tissue were evaluated.ResultsAt 6 h, the levels of serum amylase in sham-operation group, ANP group, propofol-treated group were (1743±370)U/L, (7745±1030)U/L and (5529±874)U/L; the levels of serum lipase were (274.9±36.1)U/L, (1672±262)U/L and (1219±207)U/L; the levels of serum TNF-α were (1.110±0.276)mg/L, (3.191±0.279)mg/L and (2.361±0.281)mg/L; the levels of serum IL-6 were (102.6±28.5)ng/L, (334.1±34.0)ng/L and (268.6±29.8)ng/L; the levels of serum NO were (42.2±18.1)μmol/L, (120.7±22.3)μmol/L and (73.6±19.3)μmol/L; the levels of serum SOD were (120.6±20.1)U/ml, (54.1±15.3)U/ml and (85.7±17.1)U/ml; the histopathological scores were 0.333±0.408, 4.417±0.665 and 3.500±0.707. The serum levels of amylase, lipase, NO, TNF-α, IL-6 and the histopathological score of pancreas in ANP group were significantly higher than those in sham-operation group group (P<0.05), while the serum levels of SOD were significantly lower (P<0.05). The serum levels of amylase, lipase, NO, TNF-α, IL-6 and the histopathological score of pancreas in propofol-treated group were significantly lower than those in the ANP group (P<0.05), while the serum levels of SOD were significantly higher (P<0.05).ConclusionsPropofol could decrease the levels of serum amylase and lipase, reduce pancreatic tissue damage, and had therapeutic effects on ANP in rats.

        Pancreatitis,acute necrotizing; Propofol; Models,animal

        10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2010.01.014

        241000 蕪湖,安徽省皖南醫(yī)學(xué)院附屬弋磯山醫(yī)院ICU

        趙國海,Email:yjsyy228@126.com

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