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        胰腺癌中RECK和MMP-9蛋白的表達及臨床病理意義

        2010-11-23 12:16:27葉素素田字彬魏良洲趙清喜孔心涓李玉軍
        中華胰腺病雜志 2010年3期
        關鍵詞:胰腺癌胰腺分化

        葉素素 田字彬 魏良洲 趙清喜 孔心涓 李玉軍

        ·論著·

        胰腺癌中RECK和MMP-9蛋白的表達及臨床病理意義

        葉素素 田字彬 魏良洲 趙清喜 孔心涓 李玉軍

        目的觀察RECK和MMP-9在胰腺癌組織中的表達,探討其與胰腺癌臨床病理特征的關系。方法采用免疫組化PV6000法檢測28例胰腺癌及10例正常胰腺組織中RECK、MMP-9的表達,應用SPSS13.0軟件對RECK、MMP-9的表達與腫瘤臨床病理特征的關系進行統(tǒng)計學分析。結果RECK在胰腺癌組織中的陽性表達率為46.4%(13/28),顯著低于它在正常胰腺組織中90.0%(9/10)的陽性表達率。胰腺癌臨床分期為Ⅰ+Ⅱ期組的RECK陽性表達率(75.0%,9/12)明顯高于Ⅲ+Ⅳ期組(25.0%,4/16,P<0.05),無遠處轉移組的RECK陽性表達率(60.0%,12/20)明顯高于有遠處轉移組(12.5%,1/8,P<0.05)。MMP-9在胰腺癌組織中的陽性表達率為75.0%(21/28),顯著高于正常胰腺組織中的20.0%(2/10)陽性表達率(P<0.01)。胰腺癌臨床分期為Ⅰ+Ⅱ期組的MMP-9陽性表達率(50.0%,6/12)明顯低于Ⅲ+Ⅳ期組(93.8%,15/16,P<0.05),腫瘤高分化組的MMP-9陽性表達率(33.3%,1/3)明顯低于低分化組(100%,12/12,P<0.01)。胰腺癌組織中RECK與MMP-9的表達呈負相關(r=-0.536,P<0.01)。結論胰腺癌組織中RECK呈低表達,MMP-9呈高表達,RECK、MMP-9聯(lián)合檢測可以作為胰腺癌臨床分期評估的指標。

        胰腺腫瘤; 基質金屬蛋白酶9; RECK; 免疫組織化學

        RECK(reversion inducing cysteine rich protein with kazal motifs, RECK)是1998年發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤抑制基因,它在轉錄后水平抑制基質金屬蛋白酶的表達與活性,從而抑制腫瘤的侵襲與轉移[1]?;|金屬蛋白酶(matrix metalproteinases,MMPs)是一類能降解細胞外基質及血管基膜的重要蛋白酶類,具有促進腫瘤侵襲及血管形成的作用,其中MMP-9與腫瘤浸潤轉移的關系密切。本實驗采用免疫組化方法檢測RECK和MMP-9在胰腺癌中的表達,探討它們與胰腺癌臨床病理特征的關系。

        材料和方法

        一、一般材料

        選擇青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院病理科臨床病理資料齊全的胰腺導管腺癌組織蠟塊標本28例,正常胰腺組織標本10例。所有患者術前均未行放、化療。

        二、方法

        采用免疫組化染色PV6000方法。兔抗人RECK多克隆抗體(Santa Cruz公司)和兔抗人MMP-9多克隆抗體(北京中杉金橋生物技術有限公司)1∶100稀釋,PBS代替一抗作為陰性對照。

        RECK及MMP-9陽性表達為胞質內出現(xiàn)棕黃色顆粒。在高倍鏡下隨機觀察5個視野,按著色深淺評分:無著色,0分;淡黃色,1分;棕黃色,2分;棕褐色,3分。按陽性細胞數(shù)評分:0~5%,0分;>5%~25%,1分;>25%~50%,2分;>50%,3分。兩項評分相乘,0~1分為-,2~3分為+,4~7分為++,8~12分為+++。

        三、統(tǒng)計學處理

        應用SPSS13.0進行統(tǒng)計學處理,各指標之間差異采用χ2檢驗或Fisher確切概率法,RECK和MMP-9之間相關性采用spearman相關分析,以P<0.05為有統(tǒng)計學差異。

        結 果

        一、RECK的表達及其與臨床病理特征的關系

        RECK的表達主要位于細胞質(圖1a)。胰腺癌RECK陽性表達率為46.4%,正常胰腺為90.0%,差異顯著(P<0.05)。RECK表達與胰腺癌患者的性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤部位、分化程度間無關(P>0.05),但TNM Ⅰ、Ⅱ期患者的陽性率明顯高于Ⅲ、Ⅳ期患者(P<0.05),無轉移患者的陽性率明顯高于有轉移患者(P<0.05,表1)。

        表1RECK、MMP-9在胰腺癌的表達率及與臨床病理特征的關系

        病理特征例數(shù)RECK陽性例數(shù)(%)P值MMP-9陽性例數(shù)(%)P值性別 男229(40.9)0.37218(81.8)0.144 女64(66.7)3(50.0)年齡 ≥60155(33.3)0.2559(60.0)0.084 <60138(61.5)12(92.3)腫瘤大小 ≥5cm85(62.5)0.4104(50.0)0.142 <5cm208(40.0)17(85.0)分化程度 高分化32(66.7)0.1331(33.3)0.006 中分化138(61.5)8(61.5) 低分化123(25.0)12(100)淋巴結轉移 有123(25.0)0.06711(91.7)0.184 無1610(62.5)10(62.5)遠處轉移 有81(12.5)0.0388(100)0.075 無2012(60.0)13(65.0)腫瘤分期 Ⅰ+Ⅱ129(75.0)0.0206(50.0)0.023 Ⅲ+Ⅳ164(25.0)15(93.8)腫瘤部位 胰頭189(50.0)0.37015(83.3)0.171 胰體51(20.0)4(80.0) 胰尾53(60.0)2(40.0)

        二、MMP-9的表達及其與臨床病理特征的關系

        MMP-9也主要表達于腫瘤細胞胞質(圖1b)。胰腺癌MMP-9的陽性表達率為75.0%,正常胰腺為20.0%,差異顯著(P<0.01)。MMP-9的表達與患者的性別、年齡、腫瘤大小、腫瘤部位、淋巴結轉移及遠處轉移之間無關(P>0.05),但TNM Ⅰ、Ⅱ期患者的MMP-9陽性率明顯低于Ⅲ、Ⅳ期患者(P<0.05),高分化腫瘤的陽性率明顯低于低分化者(P<0.01,表1)。胰腺癌組織中RECK和MMP-9的表達呈負相關(r=-0.536,P<0.01)。

        圖1RECK(a)和MMP-9(b)在胰腺癌組織中的表達(免疫組化 ×400)

        討 論

        許多研究表明,RECK在大部分正常組織或正常細胞株中高表達,但在許多腫瘤組織或腫瘤細胞株中低表達甚至不表達,RECK的表達量與腫瘤侵襲力呈負相關。Song等[2]報道,52%的胃癌組織RECK表達缺失,且與腫瘤分期、淋巴結轉移呈負相關。宋國慶等[3]報道,胃癌RECK的表達率為51.9%,并隨腫瘤浸潤深度的加深、淋巴結轉移和遠處轉移的發(fā)生、臨床分期的提高以及腫瘤分化程度的降低而降低。Furumoto等[4]報道,肝癌組織RECK高表達者與較好的預后顯著相關。李晟磊等[5]報道,食管癌RECK的表達明顯低于正常食管組織,且與腫瘤的分化程度、浸潤深度及淋巴結轉移密切相關。Masui等[6]報道,胰腺癌組織RECK表達率為52%,明顯低于癌旁組織,且與腫瘤的侵襲能力、預后成反比。本結果顯示,胰腺癌組織RECK表達明顯低于正常胰腺組織。RECK表達與患者TNM分期、遠處轉移呈負相關。提示RECK基因表達的缺失可能與胰腺癌的侵襲轉移有關。

        MMPs是降解基膜和細胞外基質的主要酶類,其中MMP-9還可以通過促進新生血管的生成而促進腫瘤的生長和轉移。Nagakawa等[7]報道,32例胰腺癌組織MMP-9的陽性率為50%,有遠處轉移者的陽性率明顯高于無遠處轉移者。Pryczynicz等[8]報道,胰腺癌MMP-9陽性率為36%,且與淋巴結轉移及遠處轉移相關。本結果表明,胰腺癌MMP-9表達顯著高于正常胰腺組織,且與腫瘤分化程度、臨床分期呈正相關。提示MMP-9的表達也與胰腺癌的侵襲過程有關。本組胰腺癌中MMP-9表達與遠處轉移無關,與文獻報道不一致,不排除是由于樣本量較少所致。

        研究發(fā)現(xiàn)[1],在惡性細胞株中恢復RECK的表達,除能抑制細胞浸潤外,還伴有MMP-9的分泌減少,提示RECK可能對MMP-9產(chǎn)生負調節(jié)作用。本研究結果顯示,RECK和MMP-9在胰腺癌腫瘤組織中的表達呈負相關,提示RECK蛋白可能通過抑制MMP-9表達來發(fā)揮抑制胰腺癌的侵襲作用。

        [1] Takahashi C,Sheng Z,Horan TP,et al.Regulation of matrix metalloproteinase-9 and inhibition of tumor invasion bv the membrane anchored glycoprotein RECK.Proc Natl Acad Sci USA,1998,95:13221-13226.

        [2] Song SY,Son HJ,Nam E,et al.Expression of reversion-inducing-cysteine-rich protein with Kazal motifs (RECK)as a prognostic indicator in gastric cancer.Eur J Cancer,2006,42:101-108.

        [3] 宋國慶,王強. RECK,MMP-9及TGF-β1在胃癌組織中的表達及其相互關系.世界華人消化雜志,2007,15:1731-1737.

        [4] Furumoto K,Arii S,Mori A,et al.RECK gene expression in hepatocellular carcinoma:correlation with invasion-related clinicopathological factors and its clinical significance.Reverse-inducing-cysteine-rich protein with Kazal motifs.Hepatology,2001,33:189-195.

        [5] 李晟磊,趙秋民,劉宗文,等.食管鱗癌中RECK和MMP-9蛋白表達相關性及臨床病理意義.世界華人消化雜志,2007,15:1082-1086.

        [6] Masui T,Doi R,Koshiba T,et al.RECK expression in pancreatic cancer:its correlation with lower invasiveness and better prognosis.Clin Cancer Res,2003,9:1779-1784.

        [7] Nagakawa Y, Aoki T,Kasuya K,et al.Histologic features of venous invasion,expression of Vascular endothelial growth factor and matrix metalloproteinase-2 and matrix metalloproteinase-9,and the relation with liver metastasis in pancreatic cancer.Pancreas,2002,24:169-178.

        [8] Pryczynicz A,Guzinska-Ustymowicz K,Dymicka-Piekarska V,et al.Expression of matrix metalloproteinase 9 in pancreatic ductal carcinoma is associated with tumor metastasis formation.Folia Histochem Cytobiol,2007,45:37-40.

        2009-11-06)

        (本文編輯:屠振興)

        ExpressionofRECKandMMP-9inpancreaticcanceranditsclinicopathologicalsignificance

        YESu-su,TIANZi-bin,WEILiang-zhou,ZHAOQing-xi,KONGXin-juan,LIYu-jun.

        DepartmentofGastroenterology,AffiliatedHospital,MedicalCollege,QingdaoUniversity,Qingdao266003,China

        Correspondingauthor:TIANZi-bin,Email:tianzb@qyfy.cn

        ObjectiveTo investigate the expression of RECK and MMP-9 in pancreatic cancer and to explore the relationship between RECK, MMP-9 expression and the clinicopathological characteristics.MethodsPV6000 immunohistochemical method was used to detect the expression of RECK and MMP-9 in 28 cases of pancreatic cancer and 10 cases of normal pancreatic tissue. All the statistical analyses were performed by using SPSS 13.0 statistical software to determine the relationship between RECK, MMP-9 expression and the clinicopathological characteristics.ResultsThe overall positive rate of RECK espression was 46.43% (13/28) in pancreatic cancer, which was significantly lower than that in normal pancreatic tissue (90%, 9/10). The positive rate of RECK espression in Ⅰ+Ⅱ clinical stage (75.0%,9/12) was significantly higher than that in Ⅲ+Ⅳ stage (25.0%,4/16P<0.05). The positive rate of RECK expression in cases without distant metastases (60.0%,12/60) was significantly higher than that in cases with distant metastasis (12.5%, 1/8,P<0.05). The overall positive rate of MMP-9 was 75% (21/28) in pancreatic cancer, and 20% (2/10) in normal pancreatic tissue. The comparison between these two groups indicated a significant difference (P<0.01). The positive rate of MMP-9 in Ⅰ+Ⅱclinical stage(50.0%,6/12) was significantly lower than that in Ⅲ+Ⅳ stage (93.8,15/16,P<0.05). The positive rate of MMP-9 in well differentiation group(33.3%,1/3) was significantly lower than that in poor differentiation group (100%,12/12,P<0.01). The expression of RECK was negatively correlated with the expression of MMP-9(r=-0.536,P<0.01).ConclusionsRECK is lowly expressed in pancreatic cancer, but MMP-9 is highly expressed. RECK and MMP-9 may serve as important markers in the evaluation of tumor stage.

        Pancreatic neoplasms; Matrix metalloproteinase-9; RECK; Immunohistochemistry

        10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2010.03.015

        266003 青島,青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院消化內科

        田字彬,Email:tianzb@qyfy.cn

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