炊慧霞,張秀麗,廖興廣,銀恭舉

沙門(mén)菌是腸桿菌科一大類(lèi)重要致病菌,是引起食物中毒的重要病原菌。在我國(guó),引起沙門(mén)菌食物中毒的食品類(lèi)別中肉類(lèi)食品占重要地位〔1〕。由耐藥性沙門(mén)菌引起的暴發(fā)流行,在發(fā)達(dá)國(guó)家和發(fā)展中國(guó)家都有發(fā)生〔2-3〕。為了解鄭州市生肉類(lèi)食品中沙門(mén)菌的污染狀況及其耐藥性,2008年1月至5月我們對(duì)鄭州市市售生肉類(lèi)食品進(jìn)行了調(diào)查研究,分析如下。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源與種類(lèi) 樣品分別采自鄭州市超市、便利店、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng),共計(jì)186份生肉樣品,其中生禽肉127份、生畜肉59份。

1.2 檢驗(yàn)方法 參照GB/T4789.4-2008方法進(jìn)行檢測(cè);藥敏試驗(yàn)采用紙片法,操作及結(jié)果判讀參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI/NCCLS)抗微生物藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)(2006年)。

1.3 試劑 試劑和干粉培養(yǎng)基購(gòu)自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司,柯瑪嘉顯色平板購(gòu)自鄭州博賽生物技術(shù)研究所,沙門(mén)菌抗血清購(gòu)自泰國(guó)S ＆ A公司,藥物敏感紙片購(gòu)自英國(guó)Oxoid公司,以上均在有效期內(nèi)使用。

1.4 質(zhì)控菌株 大腸埃希菌ATCC25922,沙門(mén)菌CMCC50774,均購(gòu)自中國(guó)生物制品檢定所。

1.5 質(zhì)量控制 樣品檢測(cè)均在本實(shí)驗(yàn)室完成,本實(shí)驗(yàn)室是國(guó)家認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室,每年接受?chē)?guó)家疾病預(yù)防控制中心質(zhì)控考核,且考核合格。

2 結(jié) 果

2.1 沙門(mén)菌在生肉中的檢出情況 在186份生肉樣品中檢出沙門(mén)菌68株,檢出率為36.6%;其中在127份生禽肉中檢出沙門(mén)菌 58株,檢出率為45.7%,在59份生畜肉中檢出沙門(mén)菌9株,檢出率為15.3%。生禽肉與生畜肉中沙門(mén)菌的檢出率差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.88,P＜0.01),生禽肉中沙門(mén)菌的檢出率高于生畜肉的檢出率。

2.2 沙門(mén)菌的血清分型 從生肉中檢出的68株沙門(mén)菌血清分型結(jié)果看,共檢出9種血清型的沙門(mén)菌,分布于B,C2-C3,D1,F等血清群內(nèi)。排前五位的血清型是腸炎沙門(mén)菌、印地安納沙門(mén)菌、鼠傷寒沙門(mén)菌、阿貢納沙門(mén)菌、德?tīng)柋壬抽T(mén)菌。其中,生禽肉中檢出的沙門(mén)菌血清型占首位的是腸炎沙門(mén)菌,其次是印地安納沙門(mén)菌,生畜肉中檢出的沙門(mén)菌血清型占首位的是德?tīng)柋壬抽T(mén)菌,其次是腸炎沙門(mén)菌,見(jiàn)表1。

表1 不同種類(lèi)生肉中各個(gè)血清型沙門(mén)菌的檢出情況

2.3 分離菌株的藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果 本次試驗(yàn)采用12種抗生素藥物敏感紙片對(duì)所檢出的68株沙門(mén)菌菌株進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)。29株沙門(mén)菌多重耐藥,占42.7%,其中耐5種以上抗生素多重耐藥菌株15株,占22.1%。檢出6株超廣譜β內(nèi)酰胺酶ESBLs(+)沙門(mén)菌,占8.8%。在12種抗生素中,對(duì)萘啶酸、氨芐西林、四環(huán)素、復(fù)方新諾明、鏈霉素的耐藥率分別達(dá)88.2%、33.8%、26.5%、25.0%和20.6%;對(duì)氨芐西林、頭孢他啶、萘啶酸、環(huán)丙沙星、卡那霉素、鏈霉素、氯霉素均呈現(xiàn)中度敏感;對(duì)阿米卡星、頭孢他啶、頭孢噻肟、環(huán)丙沙星、慶大霉素的敏感率分別達(dá) 95.6%、91.2%、88.2%、85.3%、82.4%,見(jiàn)表2。

3 討 論

從對(duì)鄭州市生肉類(lèi)食品樣品的檢測(cè)結(jié)果看,127份生肉樣品檢出沙門(mén)菌68株,陽(yáng)性率36.6%,提示鄭州市生肉類(lèi)食品(尤其是生禽肉類(lèi)食品)中沙門(mén)菌污染嚴(yán)重,生肉類(lèi)食品為引起沙門(mén)菌食源性疾病的高危食品。從超市及冷鮮肉店中采集的106份生肉類(lèi)食品中,沙門(mén)菌檢出率為38%,其中生豬肉 36份,檢出率14%,生禽肉70份,檢出率 50%;從集貿(mào)市場(chǎng)中采集的80份樣品中,沙門(mén)菌檢出率為35%,其中生豬肉23份,檢出率17%,生禽肉57份,檢出率42%。從超市及冷鮮肉店中采集生肉類(lèi)食品與從集貿(mào)市場(chǎng)中采集生肉類(lèi)食品中沙門(mén)菌的檢出率差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.15,P＞0.05),二者沙門(mén)菌污染程度相當(dāng)。生肉類(lèi)食品中沙門(mén)菌的污染來(lái)源尚不明確,初步懷疑生肉類(lèi)食品中沙門(mén)氏菌的污染是由于屠宰方式及加工處理方法不當(dāng)造成的。

表2 68株沙門(mén)菌藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果

本次研究,在68株沙門(mén)菌血清學(xué)分型中,腸炎沙門(mén)菌占首位,其次分別是德?tīng)柋壬抽T(mén)菌、印地安納沙門(mén)菌、鼠傷寒沙門(mén)菌、阿貢納沙門(mén)菌、奧爾巴尼沙門(mén)菌、阿伯丁沙門(mén)菌、布利丹沙門(mén)菌、胥伐成格隆沙門(mén)菌。其中,生禽肉中檢出的沙門(mén)菌血清型占首位的是腸炎沙門(mén)菌,其次是印地安納沙門(mén)菌,生畜肉中檢出的沙門(mén)菌血清型占首位的是德?tīng)柋壬抽T(mén)菌,其次是腸炎沙門(mén)菌。與2007年河南省食品中沙門(mén)菌污染情況〔4〕相比,血清型種類(lèi)及其順位有所變化,并且有新的血清型出現(xiàn)。

從河南省腹瀉門(mén)診監(jiān)測(cè)點(diǎn)收集的資料來(lái)看,沙門(mén)菌引起人類(lèi)腹瀉的血清型是鼠傷寒沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌、德?tīng)柋壬抽T(mén)菌、印第安納沙門(mén)菌、阿貢納沙門(mén)菌、利齊菲爾德沙門(mén)菌、阿姆斯特丹沙門(mén)菌。前五位的血清型與生肉類(lèi)食品檢出的沙門(mén)菌血清型相比,血清型種類(lèi)相同,順位不同(可能是由于不同血清型沙門(mén)菌致病力不同和人類(lèi)自身的個(gè)體差異及生病就診情況不同等原因造成)。抗生素敏感性試驗(yàn)顯示,腹瀉病人糞便中檢出的沙門(mén)菌除對(duì)鏈霉素敏感外,對(duì)氨芐西林(40.2%)、頭孢噻肟(4.6%)、頭孢他啶(1.2%)、萘啶酸(58.6%)、環(huán)丙沙星(16.1%)、四環(huán)素(46%)、氯霉素(35.6%)、復(fù)方新諾明(36.8%)均有不同程度的耐藥。與生肉中的沙門(mén)菌相比,前者對(duì)氨芐西林、四環(huán)素、氯霉素、復(fù)方新諾明的耐藥率高于后者,而對(duì)頭孢他啶、頭孢噻肟、萘啶酸、鏈霉素的耐藥率低于后者,差異原因初步懷疑是由于臨床與禽畜飼養(yǎng)用藥不同造成的,有待進(jìn)一步調(diào)查研究。生肉中檢出的沙門(mén)菌對(duì)鏈霉素表現(xiàn)為耐藥,耐藥率為20.6%,并且表現(xiàn)中度敏感菌株,表明有向耐藥進(jìn)一步發(fā)展的趨勢(shì),若被人類(lèi)再次感染,不利于臨床治療,對(duì)公共健康造成威脅。

另外,本次研究發(fā)現(xiàn)6株ESBLs(+)沙門(mén)菌,占所有檢出菌株的8.8%,因ESBLs(+)菌株也就意味著對(duì)所有青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)和氨曲南耐藥,若被人類(lèi)感染,不利于臨床治療,病人的生命健康受很大威脅。

抗生素在臨床和畜禽飼料中普遍使用,對(duì)于減少許多感染性疾病的發(fā)病率和死亡率,以及許多傳染病的控制發(fā)揮了十分重要的作用,但細(xì)菌耐藥及毒副作用問(wèn)題日益突出,使許多抗生素失效,治療失敗〔5〕。世界衛(wèi)生組織(WHO)在2000年 11月提出了遏制細(xì)菌耐藥性蔓延的全球戰(zhàn)略。其中明確指出抗生素作為飼料添加劑的使用與耐萬(wàn)古霉素腸球菌的出現(xiàn)有關(guān);抗生素在食用動(dòng)物中的使用與食源性致病菌(沙門(mén)菌、彎曲菌)的耐藥有關(guān)〔6〕。本次研究,發(fā)現(xiàn)生肉類(lèi)食品中沙門(mén)菌對(duì)12種抗生素均產(chǎn)生不同程度的耐藥,有的菌株出現(xiàn)多重耐藥,甚至出現(xiàn)對(duì)11種抗生素耐藥,鄭州市生肉類(lèi)食品中沙門(mén)菌的耐藥情況嚴(yán)重。提醒相關(guān)監(jiān)管部門(mén)對(duì)此寓于重視,加大對(duì)抗生素使用的管理力度,遏制沙門(mén)菌耐藥性的蔓延。

〔1〕張秀麗,廖興廣,沈剛建.微生物性食物中毒的檢驗(yàn)及防治〔M〕.鄭州:中原農(nóng)民出版社,2001:127-139.

〔2〕王茂起,冉陸,王竹天,等.2001年中國(guó)食源性致病菌及其耐藥性主動(dòng)監(jiān)測(cè)研究〔J〕.衛(wèi)生研究,2004,33(1):49-54.

〔3〕冉陸,張靜.全球食源性疾病監(jiān)測(cè)及監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)〔J〕.中國(guó)食品衛(wèi)生雜志,2005,17(4):385-386.

〔4〕炊慧霞,張秀麗,廖興廣,等.2007年河南省食源性致病菌的監(jiān)測(cè)結(jié)果分析〔J〕.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2009,19(1)173-175.

〔5〕李曉,羅山,楊慶文,等.云南省食品中食源性致病菌污染調(diào)查〔J〕.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2005,15(7):846.

〔6〕吳愛(ài)武,鄭貴星,江鋒利,等.綠膿桿菌和酶表型檢出與耐藥性分析〔J〕.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2006,16(2):188-189.