蔣建春

克乳痛膠囊揮發(fā)性成分包結(jié)工藝研究

蔣建春

目的考察克乳痛膠囊中丹皮酚及蛇床子揮發(fā)油的最佳提取工藝和環(huán)糊精最佳包合工藝。方法比較飽和溶液合并超聲法和研磨法兩種不同揮發(fā)油包結(jié)方法及其他包結(jié)條件，以揮發(fā)性成分與β-環(huán)糊精之比、包合時間、包合溫度作為考察因素，用正交試驗(yàn)考察最佳包合工藝，以包合物收得率和揮發(fā)油包合率作為評價包合工藝的指標(biāo)。結(jié)果通過比較采用研磨法制備包合物，最佳包合工藝為：揮發(fā)油加及丹皮酚加4倍量β-環(huán)糊精及適量水，40℃研磨包合6h。結(jié)論該方法包合物的平均得率為90.8%，平均包結(jié)率為75.5%，表明該工藝基本可行。

丹皮酚；蛇床子；揮發(fā)油；包合技術(shù)；正交試驗(yàn)

克乳痛膠囊由江蘇省中醫(yī)院許芝銀教授根據(jù)多年的臨床實(shí)踐，按照中醫(yī)理論中關(guān)于乳癖的發(fā)病機(jī)制和西醫(yī)體系中乳腺增生病的學(xué)說，從補(bǔ)益肝腎、調(diào)攝沖任為主，行淤化痰、散結(jié)止痛為輔的治療方法入手，自擬處方而成。原方曾為醫(yī)院制劑，經(jīng)藥效學(xué)篩選，最終確定處方組成為鹿角片、蛇床子、何首烏、丹皮、赤芍、郁金、昆布、牡蠣。其藥材來源均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。本試驗(yàn)進(jìn)行丹皮酚及揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物的制備研究，應(yīng)用包結(jié)技術(shù)可穩(wěn)定丹皮酚及蛇床子揮發(fā)油，提高克乳痛膠囊的穩(wěn)定性，實(shí)驗(yàn)探討了飽和溶液合并超聲法及研磨法這兩種不同方法及其包結(jié)條件對包結(jié)物得率及包結(jié)率的影響，從而得出最佳工藝，并進(jìn)行3批驗(yàn)證試驗(yàn)，確定該工藝的可行性。

1 丹皮酚、蛇床子揮發(fā)油的提取[1]

1.1 丹皮酚的提取

取牡丹皮藥材200g，水蒸氣蒸餾，收集藥材量10倍的蒸餾液，冷藏48h，濾過，得丹皮酚結(jié)晶。

1.2 蛇床子揮發(fā)油的提取

分別稱取蛇床子200g，郁金200g，加6倍量的水，浸泡2.0h，水蒸氣蒸餾6h，冷卻，收集揮發(fā)油。

2 丹皮酚及蛇床子揮發(fā)油的包結(jié)工藝研究[2-5]

2.1 試驗(yàn)儀器及試劑

β- CD（安徽山河藥用輔料有限公司，純度99.2%）；揮發(fā)油提取器 （南京鑾玉化玻儀器有限公司）；磁力加熱攪拌器（江蘇金壇市大地自動儀器廠）；HT系列臺式數(shù)控超聲波清洗機(jī)（山東濟(jì)寧恒通超聲電子設(shè)備公司）；JM系列膠體磨（廊坊通用機(jī)械制造有限公司）；無水硫酸鈉、無水乙醇均為分析純。

2.2 方法與結(jié)果

2.2.1 飽和溶液合并超聲法

2.2.1.1 實(shí)驗(yàn)方法

采用正交試驗(yàn)法，按表1、表2對應(yīng)的因素水平進(jìn)行試驗(yàn)。每份樣品精密取蛇床子揮發(fā)油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環(huán)糊精飽和水溶液中，邊加邊超聲相應(yīng)的時間，取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃真空干燥[1]，即得。

2.2.1.2 評價指標(biāo)[6]

包合物得率：按下式計(jì)算

包結(jié)率的測定：參照《中國藥典》2000年一部牡丹皮項(xiàng)下丹皮酚含量測定方法測定包合前與包合后丹皮酚的含量，按下式計(jì)算

2.2.1.3 因素水平的選擇

根據(jù)文獻(xiàn)[7]，認(rèn)為揮發(fā)油和β-環(huán)糊精的比例、包合時間、包合溫度為主要因素，根據(jù)實(shí)際條件分別對每個因素設(shè)計(jì)出5個水平，進(jìn)行單因素試驗(yàn)，以優(yōu)選3個水平。篩選出的試驗(yàn)因素水平結(jié)果見表1。

表1 因素水平表

2.2.1.4 正交試驗(yàn)安排及結(jié)果[8,9]

見表2～表4。

表2 L9（34）正交試驗(yàn)表

表3 包合物得率方差分析表

表4 丹皮酚包結(jié)率方差分析表

2.2.1.5 結(jié)論

方差分析表明，3個因素不同水平之間未見顯著性差異，比較不同因素的極差R，其影響程度大小為B＞C＞A，再結(jié)合各因素不同水平之間Ki值，確定最佳的包合工藝為A1B3C2。即揮發(fā)油加8倍量β-環(huán)糊精所制成的飽和溶液，40℃超聲包合1.5h的包結(jié)工藝最佳。

2.2.2 研磨法

2.2.2.1 實(shí)驗(yàn)方法

采用正交試驗(yàn)法，優(yōu)選研磨法最佳工藝條件，按表5、表6對應(yīng)的因素水平進(jìn)行試驗(yàn)。每份樣品精密取蛇床子揮發(fā)油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環(huán)糊精飽和水溶液中，邊加邊研磨相應(yīng)的時間，取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃真空干燥，即得。

2.2.2.2 評價指標(biāo)

同2.2.1.2項(xiàng)下評價指標(biāo)。

2.2.2.3 因素水平的選擇

根據(jù)文獻(xiàn)[10]，認(rèn)為揮發(fā)油和β-環(huán)糊精的比例、包合時間、包合溫度為主要因素，根據(jù)實(shí)際條件分別對每個因素設(shè)計(jì)出5個水平，進(jìn)行單因素試驗(yàn)，以優(yōu)選3個水平。篩選出的試驗(yàn)因素水平結(jié)果見表5。

表5 因素水平表

2.2.2.4 正交試驗(yàn)安排及結(jié)果[8,9]

見表6～表7。

2.2.2.5 結(jié)論

包結(jié)率方差分析結(jié)果表明，3個因素不同水平之間未見顯著性差異，比較不同因素的極差R，其影響程度大小為B＞C＞A，再結(jié)合各因素不同水平之間Ki值，同時考慮包合物的得率，確定最佳的包合工藝為A2B3C2。即揮發(fā)油及丹皮酚加4倍量β-環(huán)糊精及適量水，40℃研磨包合6h的包結(jié)工藝最佳[6]。

表6 L9（34）正交試驗(yàn)表

表7 包合物得率方差分析表

表8 丹皮酚包結(jié)率方差分析表

2.3 超聲法與研磨法對包結(jié)物得率及包結(jié)率影響的比較

2.3.1 超聲法最佳包合工藝

精密取蛇床子揮發(fā)油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環(huán)糊精（12.8g）飽和水溶液之中，邊加邊超聲，超聲時間1.5h，包合溫度40℃取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃，真空干燥，即得。

2.3.2 研磨法最佳包合工藝

精密取蛇床子揮發(fā)油1mL、丹皮酚0.6g，加2倍量無水乙醇溶解，分次加入β-環(huán)糊精（6.4g）飽和水溶液之中，邊加邊研磨，研磨時間6h，包合溫度40℃，取出，冷藏48h，濾過，濾渣用少量無水乙醇洗滌后于40℃真空干燥，即得。

2.3.3 結(jié)果

見表9。

表9 超聲法及研磨法最佳包合工藝

結(jié)論：根據(jù)以上結(jié)果可見研磨法制備包合物優(yōu)于飽和溶液合并超聲法，再考慮到飽和溶液合并超聲法制備丹皮酚與蛇床子揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物所用β-環(huán)糊精量較大，且目前尚缺乏適應(yīng)生產(chǎn)的超聲設(shè)備，故選擇研磨法制備包合物，以降低β-環(huán)糊精的用量。

2.4 驗(yàn)證試驗(yàn)

取丹皮酚結(jié)晶1.0g，加2倍量無水乙醇溶解后與揮發(fā)油1.5mL混勻，分次加入丹皮酚與揮發(fā)油總量4倍量的β-環(huán)糊精混懸液研勻，40℃研磨6h，所得糊狀物與40℃真空干燥24h，無水乙醇洗滌，干燥的包合物，分別按上法測定包合物得率及丹皮酚的包結(jié)率。平行試驗(yàn)3份，結(jié)果見表10。

表10 丹皮酚等β-環(huán)糊精包合物制備工藝

該包合物的平均得率為90.8%，平均包結(jié)率為75.5%，表明該工藝基本可行。

3 討 論[10,11]

由于實(shí)驗(yàn)所得研磨法制備包合物優(yōu)于飽和溶液合并超聲法，且飽和溶液合并超聲法制備丹皮酚與蛇床子揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物所用β-環(huán)糊精量較大，且目前超聲設(shè)備限制，故選擇研磨法制備包合物，以降低β-環(huán)糊精的用量根據(jù)。 通過正交試驗(yàn)篩選出最佳包合工藝，揮發(fā)油加及丹皮酚加4倍量β-環(huán)糊精及適量水，40℃研磨包合6h。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明本工藝質(zhì)量穩(wěn)定，基本可行。

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R282.710.5

B

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