賀才標(biāo)，田傳林，曾月安，顏昌波

（湖北省天門市血站，湖北天門 431700）

選擇合適、經(jīng)濟(jì)、實(shí)用、快速的檢測(cè)方法篩選乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是當(dāng)今無(wú)償獻(xiàn)血檢測(cè)工作中的發(fā)展趨勢(shì)。目前檢測(cè)HBsAg常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、膠體金免疫層析法（GICA，簡(jiǎn)稱金標(biāo)法）、放射免疫法（RIA）等方法。而金標(biāo)法是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新的檢測(cè)技術(shù)，由于其操作簡(jiǎn)便、快捷、便于保存、不需特殊設(shè)備等被廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)工作中，特別是將金標(biāo)法應(yīng)用到無(wú)償獻(xiàn)血HBsAg篩查工作中，取得了較好的效果[1]。本文就金標(biāo)法在無(wú)償獻(xiàn)血初篩工作中的價(jià)值進(jìn)行了探討，并與ELISA法進(jìn)行比較，現(xiàn)將其結(jié)果報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

2008 年1～12月天門市自愿無(wú)償獻(xiàn)血體檢者5975例，其中，男4015例，女1960例。抽取無(wú)償獻(xiàn)血者毛細(xì)血管血液80 μl用金標(biāo)法作快速檢測(cè)，初檢合格者參加無(wú)償獻(xiàn)血。獻(xiàn)血后用無(wú)菌真空試管留取靜脈血3 ml，并將標(biāo)本作條行碼進(jìn)行標(biāo)記，離心取上層血清用于ELISA法檢測(cè)HBsAg。

1.2 試劑

乙型肝炎病毒表面抗原（全血）膠體金檢測(cè)試紙條（試劑批號(hào)2008032610、2008031409）和乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法）（試劑批號(hào)2007075109、2007125117、2008035102、2008055106、2008085110）均由英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司提供。

1.3 方法

檢測(cè)方法及結(jié)果判斷：金標(biāo)法和酶聯(lián)免疫法均按說(shuō)明書進(jìn)行操作并判斷結(jié)果，前者檢測(cè)線和對(duì)照線均出現(xiàn)紫色的線條為陽(yáng)性，而檢測(cè)線未出現(xiàn)紫色，只有對(duì)照線出現(xiàn)紫色為陰性。后者用Anths2010型酶標(biāo)儀讀板，電腦自動(dòng)計(jì)算并打印結(jié)果，樣本A值≥臨界值為陽(yáng)性，A值＜臨界值為陰性。

2 結(jié)果

5975例無(wú)償獻(xiàn)血者血液經(jīng)金標(biāo)法初篩合格，用ELISA法檢測(cè)出82例HBsAg陽(yáng)性情況（表1）。由表1可知，5975例無(wú)償獻(xiàn)血者用ELISA法檢測(cè)HBsAg，其中陽(yáng)性82例，陽(yáng)性率比金標(biāo)法提高了1.37%。金標(biāo)法檢測(cè)HBsAg與ELISA法比較，兩者符合率為98.63%。同時(shí)，對(duì)82例金標(biāo)法檢測(cè)陰性的原因進(jìn)行了分析，其中，57例標(biāo)本血清中HBsAg含量較低是由于金標(biāo)法靈敏度不夠所致；15例是由于工作人員操作不當(dāng)、血容量不足、環(huán)境溫度變化引起；2例標(biāo)本血清中HBsAg濃度極高，金標(biāo)法檢測(cè)出現(xiàn)前帶現(xiàn)象，造成假陰性；8例是金標(biāo)試紙條失效及質(zhì)量問(wèn)題等。

表182例ELISA法陽(yáng)性與金標(biāo)法對(duì)比分析

3 討論

金標(biāo)法檢測(cè)HBsAg具有簡(jiǎn)便、快捷、無(wú)需特殊設(shè)備、結(jié)果易于判斷等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院門診患者快速檢查以及企事業(yè)單位的體檢，近些年來(lái)也用于血站采血車快速檢測(cè)等。目前，國(guó)產(chǎn)的HBsAg膠體金試紙條檢測(cè)靈敏度已達(dá)到1 ng/ml[2]。但由于金標(biāo)法試劑使用說(shuō)明書和無(wú)償獻(xiàn)血工作要求快速檢驗(yàn)，一般報(bào)告檢驗(yàn)結(jié)果僅10 min，所以只能對(duì)HBsAg>2.5 ng/ml的標(biāo)本才能檢測(cè)出來(lái)，對(duì)于HBsAg濃度在1.0～2.5 ng/ml時(shí)，應(yīng)觀察30 min。本文報(bào)道出現(xiàn)假陰性的主要原因除與HBsAg含量有關(guān)外，還與工作人員的操作不當(dāng)、環(huán)境溫度、反應(yīng)時(shí)間及試紙條質(zhì)量有一定關(guān)系。與有關(guān)報(bào)道造成漏檢有相似之處[3-5]。

本文金標(biāo)法與ELISA法進(jìn)行的結(jié)果比較，兩者符合率為98.63%，金標(biāo)法的漏檢率為1.37%。因此，金標(biāo)法具有其靈敏度和特異性高、簡(jiǎn)便、快速、不需特殊設(shè)備等優(yōu)點(diǎn)，適用于血站及基層醫(yī)療單位乙型肝炎病毒表面抗原初篩試驗(yàn)，值得推廣應(yīng)用。

[1]羅秋初,陳瑞玲.金標(biāo)法初篩1530名無(wú)償獻(xiàn)血者HBSAg結(jié)果分析[J].中國(guó)輸血雜志,2000,13(2):107.

[2]周繼文,戎廣亞,楊守純,等.膠體金免疫層析法檢測(cè)乙型肝炎病毒表面抗原[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1998,21(1):30-32.

[3]劉福昌.HBsAg全血金標(biāo)檢測(cè)試紙條漏檢原因分析[J].中國(guó)輸血雜志,2002,15(3):187.

[4]成軍,張國(guó)祥,孫關(guān)忠,等.252例低滴度HBsAg感染者乙肝標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2000,4(6):266-268.

[5]徐進(jìn)春.快速金標(biāo)法檢測(cè)HBsAg漏檢原因的分析[J].中國(guó)輸血雜志,2001,14(3):166.