李二敏

（黑龍江省中醫(yī)研究院腎內(nèi)科,黑龍江哈爾濱 150036）

腎炎Ⅱ號水丸對IgAN大鼠腎小管間質(zhì)損傷的實驗研究

李二敏

（黑龍江省中醫(yī)研究院腎內(nèi)科,黑龍江哈爾濱 150036）

目的觀察腎炎Ⅱ號水丸對IgAN大鼠腎小管間質(zhì)損傷的作用機制。方法 口服牛血清白蛋白酸化水和尾靜脈注射牛血清白蛋白及葡萄球菌腸毒素B復(fù)合方法建立IgAN大鼠模型,觀測腎炎Ⅱ號水丸對IgAN大鼠尿紅細胞、尿蛋白、核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）和巨噬細胞移動抑制因子（MIF）在腎小管-間質(zhì)的表達情況及定量分析。結(jié)果腎炎Ⅱ號水丸低、高劑量組上述檢測指標(biāo)分別與雷公藤對照組比較均有顯著性差異（P＜0.05）。結(jié)論腎炎Ⅱ號水丸對IgAN大鼠腎小管間質(zhì)損傷有顯著的防治作用。

IgA腎病;腎小管間質(zhì);腎炎Ⅱ號水丸;核轉(zhuǎn)錄因子-κB;大鼠

本文通過建立IgAN大鼠模型觀測腎炎Ⅱ號水丸對IgAN大鼠腎小管間質(zhì)損傷的防治作用,報告如下。

1 實驗材料

動物:健康雄性Wistar大鼠 60只,體重（200±20）g。藥物:腎炎Ⅱ號水丸,雷公藤多甙片,牛血清白蛋白（BSA）,葡萄球菌腸毒素 B（SEB）,NF-κBp65鼠多克隆抗體,MIF多克隆抗體。

2 實驗方法

2.1 動物分組與給藥 60只大鼠隨機分為空白對照組（A）,模型對照組（B）,腎炎Ⅱ號水丸高劑量組（C）,腎炎Ⅱ號水丸低劑量組（D）,陽性藥物對照組（E）,每組12只。A組:隔日灌服0.1%稀鹽酸配制酸化水,每次2 mL,共16周。B組:隔日灌服牛血清白蛋白（BSA）直至 16周（100 mg/kg,用0.1%稀鹽酸配制）,第6周尾靜脈注射BSA（10 mg/kg,以生理鹽水稀釋）,每日1次,連續(xù) 3次,第8周尾靜脈注射葡萄球菌腸毒素B（SEB）（0.4 mg/kg,生理鹽水稀釋）,每周1次,連續(xù)3次。C、D、E組造模方法與B組同,于第6周始C組應(yīng)用腎炎Ⅱ號水丸3.6 g/（kg?d）,灌胃給藥至第16周末;D組應(yīng)用腎炎Ⅱ號水丸0.9 g/（kg?d）,灌胃給藥至第16周末;E組開始應(yīng)用雷公藤多甙片8.1 mg/（kg?d）,灌胃給藥至第 16周末。

2.2 實驗取材 從第6周起,每周查尿紅細胞及尿蛋白,在16周末,實驗動物禁食12 h,摘除眼球取血4～5 mL,然后斷頸處死大鼠,腹部開口剖取雙腎,處理后分成4份,以備免疫組化檢測及光鏡檢測。將大鼠血于3 000 r/min離心,取血清分裝,-20℃保存。

2.3 統(tǒng)計學(xué)處理 實驗結(jié)果采用SPSS 11.5 for Windows統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料多組間比較用方差分析,結(jié)果以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示;計數(shù)資料用χ2檢驗;等級資料用Ridit分析,組間比較用秩和檢驗。

3 實驗結(jié)果

3.1 實驗動物的一般情況 實驗過程中大鼠死亡A組2只,E組1只,C組1只（具體原因不明）。靜脈注射BSA及SEB后,B組大鼠精神欠佳,披毛蓬亂,部分出現(xiàn)腹瀉,1周左右有所緩解;C、D、E組大鼠上述表現(xiàn)較輕,3～5 d基本恢復(fù)正常;A組大鼠精神狀態(tài)始終較佳。

3.2 造模后血尿檢測情況比較 見表1。

表1 造模第6,8周末各組血尿檢測情況比較

3.3 腎炎Ⅱ號水丸對IgAN大鼠腎小管間質(zhì)NF-κB 的影響 見表2。

表2 各組大鼠腎小管間質(zhì)NF-κB的表達情況比較（±s）

表2 各組大鼠腎小管間質(zhì)NF-κB的表達情況比較（±s）

注:與A組比較,###P＜0.001;與B組比較,▲▲▲P＜0.001;與E、D組比較,△P＜0.05。

組別 n NF-κB/面密度A組 10 0.201 7±0.148 9 B組 11 0.335 4±0.202 6###C 組 11 0.243 1±0.129 0▲▲▲△D組 12 0.261 8±0.128 2▲▲▲E 組 10 0.262 8±0.127 2▲▲▲

3.4 腎炎Ⅱ號水丸對IgAN大鼠腎小管間質(zhì)MIF的影響 見表3。

表3 各組大鼠腎小管間質(zhì)MIF的表達情況比較（±s）

表3 各組大鼠腎小管間質(zhì)MIF的表達情況比較（±s）

注:與A組比較,###P＜0.001;與B組比較,▲▲▲P＜0.001;與E組比較,△△P＜0.01。

組別 n MIF/面密度A組 10 0.163 9±0.014 7 B組 11 0.341 4±0.022 5###C 組 11 0.222 1±0.016 8▲▲▲△△D組 12 0.244 5±0.013 1▲▲▲E 組 10 0.249 1±0.011 3▲▲▲

4 討論

本實驗證明,腎炎Ⅱ號水丸高、低劑量組大鼠臨床癥狀及各項實驗室檢測指標(biāo)均好于雷公藤治療組,尤以高劑量組與雷公藤治療組比較差異顯著（P＜0.05）[1-3]。治療前后觀察,腎炎Ⅱ號水丸能明顯降低IgAN大鼠尿中紅細胞,自身前后對比及與雷公藤對照組比較均有顯著差異（P＜0.01）,說明腎炎Ⅱ號水丸的止血效果突出[4-5]。本實驗研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠NF-κB和MIF的表達強度和部位顯著多于腎炎Ⅱ號水丸高、低劑量組,說明腎炎Ⅱ號水丸可能通過降低NF-κB的活性進而減少腎組織MIF等炎癥介質(zhì)水平,調(diào)節(jié)炎癥細胞因子,減輕炎癥反應(yīng)對腎小球、腎小管間質(zhì)的損傷,進而改善腎小管間質(zhì)的功能而發(fā)揮其治療作用[6-7]。

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R285.5

A

1007-4813（2010）01-0010-02

李二敏（1982-）,女,碩士研究生。研究方向:中西醫(yī)結(jié)合腎病研究。

（

2009-12-09）