于華強(qiáng)，籍保平*，柳 嘉，周 峰，高豐衣，蘇春元

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京 100083)

芹菜素對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖及分化作用研究

于華強(qiáng)，籍保平*，柳 嘉，周 峰，高豐衣，蘇春元

(中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京 100083)

目的：研究芹菜素(apigenin，AP)對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖及分化的影響。方法：采用3T3-L1前脂肪細(xì)胞，利用MTT比色分析法檢測(cè)不同質(zhì)量濃度芹菜素對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的影響；采用傳統(tǒng)的雞尾酒誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)分化3T3-L1前脂肪細(xì)胞，利用油紅O染色檢測(cè)，通過(guò)比色分析法檢測(cè)不同質(zhì)量濃度芹菜素對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響。結(jié)果：30、50μg/mL芹菜素相對(duì)于空白組和陽(yáng)性對(duì)照組能夠顯著抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和分化，提示其可能具有預(yù)防肥胖的作用。

芹菜素；3T3-L1；增殖；分化；肥胖

Abstract：Objective: To investigate the effect of apigenin on proliferation and differentiation of 3T3-L1 preadipocytes.Methods: 3T3-L1 preadipocytes were used as target cells to explore the effect of apigenin on their proliferation measured by MTT assay. Besides, cell differentiation using differentiation cocktail, oil red O staining and spectrometric determination were carried out for investigating the effect of apigenin on the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes. Results: Apigenin at 30μg/mL and 50μg/mL concentrations could inhibit the proliferation and differentiation of 3T3-L1 preadipocytes in comparison with the blank group and the positive control group (established using Dulbecco s modified Eagle s medium containing 0.5 mmol/L IBXM,1μmol/L dexamethasone and 10μmol/L insulin). Conclusion: Apigenin appear to have potential for the prevention of obesity.

Key words：apigenin；3T3-L1 preadipocytes；proliferation；differentiation；obesity

肥胖主要是由于能量攝入和消耗失衡引起的代謝紊亂綜合癥，可引起體內(nèi)脂肪過(guò)多的堆積或異常，從而影響整個(gè)機(jī)體的正常生理功能，增加動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、高血壓、糖尿病、腫瘤、高血脂等疾病的發(fā)病危險(xiǎn)[1-4]。2005年公布的“中國(guó)居民營(yíng)養(yǎng)與健康狀況調(diào)查”顯示，我國(guó)兒童肥胖者為8.1%，成人超重和肥胖者分別為20%和10%。與1992年資料相比，成人超重率上升39%，肥胖率上升97%[5]。同時(shí)，在西方發(fā)達(dá)國(guó)家，各國(guó)在肥胖及并發(fā)癥的治療方面投入的經(jīng)費(fèi)占衛(wèi)生總經(jīng)費(fèi)的5%～10%，每年高達(dá)數(shù)千億美元。因此，開(kāi)發(fā)和利用具有減肥作用的功能食品，對(duì)提高肥胖人群的生活質(zhì)量，保護(hù)人體健康具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

芹菜素(apigenin，AP) 是天然存在的一種黃酮類化合物，化學(xué)結(jié)構(gòu)為4′,5,7 - 三羥黃酮，廣泛存在于水果、蔬菜、豆類、茶葉中[6]，而芹菜含量最高。體外研究或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示芹菜素具有多方面的藥理作用，例如其具有明顯的抗腫瘤作用[7-13]、抗氧化作用[14]、降血壓和舒張血管預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化作用[15]以及保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)等作用[16]。因此，芹菜素對(duì)健康的影響已引起廣泛關(guān)注，成為營(yíng)養(yǎng)學(xué)及藥理學(xué)研究的熱點(diǎn)。

本實(shí)驗(yàn)采用3T3-L1前脂肪細(xì)胞，利用MTT比色分析法研究不同質(zhì)量濃度芹菜素對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的影響；并進(jìn)一步采用傳統(tǒng)的雞尾酒誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)分化3T3-L1前脂肪細(xì)胞，利用油紅O染色，通過(guò)比色分析法研究不同質(zhì)量濃度芹菜素對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的影響；從抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和分化兩個(gè)方面研究芹菜素預(yù)防肥胖的作用效果。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

3T3-L1前脂肪細(xì)胞 中科院上海細(xì)胞所；胎牛血清(FBS)、高糖DMEM培養(yǎng)液 美國(guó)Gibco公司；MTT、3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)、胰島素(Insulin)、地塞米松(DEX)、胰蛋白酶 美國(guó)Sigma公司；油紅O染料 上海化學(xué)試劑廠；青霉素-鏈霉素溶液(100×) 碧云天生物技術(shù)研究所。

1.2 儀器與設(shè)備

XDOS-1B倒置生物顯微鏡 重慶光電有限公司；SW-CJ-2FD雙人單面凈化工作臺(tái) 蘇州凈化設(shè)備有限公司；MCO-15ACCO2培養(yǎng)箱(37℃) 日本Sanyo公司；TDL-40B臺(tái)式離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠；Multiscan MK3自動(dòng)酶標(biāo)分析儀 美國(guó)Thermo公司；DHG-9075A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科技有限公司。

1.3 試劑的配制

MTT溶液：稱取50mg MTT溶于PBS溶液中配制成5mg/mL MTT溶液，過(guò)濾后4℃避光保存兩周內(nèi)有效，避免反復(fù)凍融，最好小劑量分裝，避光保存。

胰島素溶液：最終培養(yǎng)基中胰島素的質(zhì)量濃度為10μg/mL。酸化水的配制：4.9mL的注射用水加0.lmL的濃鹽酸混合備用。工作液的配制：稱取胰島素2.5mg溶于1mL酸化水中，得到胰島素2.5mg/mL的工作液，分裝－20℃保存?zhèn)溆谩１苊夥磸?fù)凍融。

地塞米松溶液：最終培養(yǎng)基中地塞米松的濃度為1μmol/L。工作液的配制：稱取地塞米松溶于無(wú)水乙醇溶液，終質(zhì)量濃度為5mg/mL (12700μmol/L)，取上述溶液10μL加入990μL注射用水得到地塞米松0.05mg/mL(127μmol/L)的工作液，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

IBMX：最終培養(yǎng)基中IBMX的濃度為0.5mmol/L。工作液的配制：稱取IBMX 5mg，溶于100μL DMSO得到IBMX 0.225mol/L的工作液，－20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

誘導(dǎo)劑Ι：用DMEM完全培養(yǎng)基配制終濃度為0.5mmol/L IBMX、1μmol/L地塞米松和10μg/mL胰島素的誘導(dǎo)劑。

誘導(dǎo)劑Ⅱ：用DMEM完全培養(yǎng)基配制終質(zhì)量濃度為10μg/mL胰島素的誘導(dǎo)劑。

油紅O染料：稱取0.25g油紅O加入100mL異丙醇，50℃加熱助溶lh，冷卻后，過(guò)濾作為儲(chǔ)存液，使用時(shí)，取6份上述儲(chǔ)存液加4份雙蒸水混勻，靜置10min，即為使用液。

由表11中的各分析參數(shù)可知，F(xiàn)=840.7143遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于Fcrit=5.192168，故由此證明不同調(diào)和比例油樣之間在該方法下凝點(diǎn)檢測(cè)結(jié)果差異顯著。P-value=2.97E-07，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于α=0.05，表明在置信度為95%時(shí)該結(jié)果可信。該方法能夠區(qū)分凝點(diǎn)不同的柴油。

1.4 3T3-L1前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)

將3T3-L1前脂肪細(xì)胞置于含10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基(25mmol/L)中，37℃、5%CO2飽和濕度，1%雙抗條件培養(yǎng)，長(zhǎng)滿80%時(shí)傳代。

1.5 3T3-L1前脂肪細(xì)胞的密度與MTT光密度值的對(duì)應(yīng)關(guān)系

將3T3-L1前脂肪細(xì)胞置于含10%胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基中，37℃、5%CO2飽和濕度，1%雙抗條件下培養(yǎng)。顯微鏡下觀察細(xì)胞已貼壁，呈梭形、透亮，換培養(yǎng)液，生長(zhǎng)至接觸抑制時(shí)細(xì)胞用胰酶消化，吹打成單個(gè)細(xì)胞，計(jì)數(shù)，然后將細(xì)胞密度分別調(diào)整至1×l06、5×l05、1×l05、5×l04、1×l04、5×l03個(gè)/mL接種至96孔板，每個(gè)密度6個(gè)復(fù)孔，12h細(xì)胞貼壁后采用MTT法測(cè)定其光密度值，以得到3T3-L1前脂肪細(xì)胞細(xì)胞密度與MTT光密度值的對(duì)應(yīng)關(guān)系。

1.6 細(xì)胞增殖活力檢測(cè)

活細(xì)胞線粒體中有與NADP相關(guān)的脫氫酶，可將黃色的四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)還原為不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶，用DMSO將藍(lán)紫色結(jié)晶溶解后，在550nm波長(zhǎng)處用酶標(biāo)儀檢測(cè)光密度值。

3T3-L1前脂肪細(xì)胞接種于96孔板，調(diào)整每孔細(xì)胞密度為5×103個(gè)/mL。常規(guī)培養(yǎng)12h，換以用DMEM培養(yǎng)液配制的芹菜素溶液200μL，芹菜素質(zhì)量濃度分別為5、10、30、50、100μg/mL，陽(yáng)性對(duì)照為3.4μg/mL羅格列酮，同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)12個(gè)平行孔，連續(xù)培養(yǎng)2d。在此期間，分別在24h和48h時(shí)，于芹菜素各劑量組中分別選取6個(gè)平行孔加入20μL新鮮配制的5mg/mL的MTT培養(yǎng)液培養(yǎng)4h。將培養(yǎng)液吸干后，每孔加入200μL DMSO，輕輕振蕩10min溶解紫色結(jié)晶。酶標(biāo)儀550nm波長(zhǎng)處測(cè)定光密度值，觀察芹菜素對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的影響。

1.7 3T3-Ll前脂肪細(xì)胞株的誘導(dǎo)分化

將3T3-Ll前脂肪細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板，使每孔細(xì)胞密度為5×104個(gè)/mL。用含10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基在37℃、5%CO2培養(yǎng)，待細(xì)胞融合2d后，設(shè)一組空白對(duì)照組，正常加入誘導(dǎo)劑Ι；一組陽(yáng)性對(duì)照組加入由誘導(dǎo)劑Ι配制的3.4μg/mL羅格列酮；各實(shí)驗(yàn)濃度組加入由誘導(dǎo)劑Ι配制的質(zhì)量濃度分別為5、10、30、50、100μg/mL的芹菜素，培養(yǎng)48h；換以用誘導(dǎo)劑Ⅱ配制的各組溶液，再培養(yǎng)48h，隨后以含10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，每2d換培養(yǎng)液一次[17]。

1.8 3T3-L1前脂肪細(xì)胞油紅O染色

油紅O是目前被認(rèn)為最優(yōu)良的脂肪染色染料，為脂溶性，在脂肪內(nèi)能高度溶解，從而染色，并能保存組織細(xì)胞中的脂肪滴。

不同組的3T3-L1前脂肪細(xì)胞，用PBS洗3次，10%多聚甲醛固定細(xì)胞30min，PBS洗凈后將細(xì)胞晾干30 min，加入油紅O染液于細(xì)胞表面，靜置60min后用60%異丙醇洗細(xì)胞2次去除多余的染料。再以雙蒸水洗3～4次后。倒置顯微鏡下觀察結(jié)果，拍攝照片[18]。

1.9 3T3-Ll前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程中脂肪積聚的定量檢測(cè)

成熟的脂肪細(xì)胞含有脂肪滴，這些脂肪滴可被脂溶性的油紅O染料染成橘黃色或紅色。用異丙醇溶解脂肪細(xì)胞中的油紅O染料后，在550nm波長(zhǎng)處用酶標(biāo)儀檢測(cè)光密度值，可以定量檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)脂肪的含量，判斷脂肪細(xì)胞的分化程度。

已經(jīng)完成油紅O染色的細(xì)胞，加異丙醇溶解油紅O，振蕩搖勻5min，用酶標(biāo)儀在550nm的波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的光密度值[19]。

1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)結(jié)果采用SPSS12.0軟件進(jìn)行One-Way ANOVA分析，鄧肯氏多重檢驗(yàn)用來(lái)確定數(shù)據(jù)間的顯著性差異，顯著水平設(shè)定為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 3T3-L1前脂肪細(xì)胞的密度與MTT光密度值的對(duì)應(yīng)關(guān)系

MTT光密度值可以間接反映活細(xì)胞密度，由于3T3-L1前脂肪細(xì)胞生長(zhǎng)曲線根據(jù)MTT光密度值制得，因此實(shí)驗(yàn)分別采用不同密度細(xì)胞測(cè)定其MTT光密度值得到對(duì)應(yīng)關(guān)系如表1所示。

2.2 3T3-L1前脂肪細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

圖1 3T3-L1前脂肪細(xì)胞生長(zhǎng)曲線Fig.1 Cell growth curve of 3T3-L1 preadipocytes

由圖1可知，3T3-Ll前脂肪細(xì)胞以1×103個(gè)/mL開(kāi)始培養(yǎng)，從第2天開(kāi)始細(xì)胞開(kāi)始快速增殖，至第4天增殖速度顯著降低，其中第2天開(kāi)始快速增殖時(shí)細(xì)胞密度約為5×103個(gè)/mL，第2天到第4天為細(xì)胞對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期，因此評(píng)價(jià)不同質(zhì)量濃度芹菜素對(duì)3T3-Ll前脂肪細(xì)胞增殖活力的影響時(shí)，細(xì)胞接板密度確定為5×103個(gè)/mL，培養(yǎng)時(shí)間確定為48h。

2.3 芹菜素對(duì)3T3-Ll前脂肪細(xì)胞增殖活力的影響

圖2 不同質(zhì)量濃度芹菜素對(duì)前脂肪細(xì)胞增殖的影響Fig.2 Effect of different concentrations of apigenin on the proliferation of 3T3-L1 preadipocytes

MTT是一種能夠接收氫原子的化學(xué)染料，活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶解的藍(lán)紫色結(jié)晶并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。在一定細(xì)胞數(shù)量范圍內(nèi)，藍(lán)紫色結(jié)晶的形成量與細(xì)胞數(shù)量成正比，因而光密度值可以間接反映活細(xì)胞數(shù)量。由圖2可知，芹菜素對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞有明顯生長(zhǎng)抑制作用，隨著其質(zhì)量濃度的增加，其抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用逐漸加強(qiáng)。24h后，陽(yáng)性對(duì)照組及各質(zhì)量濃度實(shí)驗(yàn)組OD值相對(duì)于空白組明顯降低，其中30、50μg/mL質(zhì)量濃度實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖分別比空白組低16.18%、17.64%，與陽(yáng)性對(duì)照組相比具有顯著差異。48h后，陽(yáng)性對(duì)照組及5、10μg/mL實(shí)驗(yàn)組相對(duì)于空白組抑制增殖效果不明顯。30μg/mL質(zhì)量濃度以上實(shí)驗(yàn)組抑制作用明顯提高，相對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照組差異顯著。

2.4 芹菜素對(duì)3T3-Ll前脂肪細(xì)胞分化的影響

圖3 分化前脂肪細(xì)胞與分化后脂肪細(xì)胞Fig.3 Morphological mirographs of 3T3-L1 preadipocytes and adipocytes

表1 3T3-L1前脂肪細(xì)胞密度與MTT光密度值對(duì)應(yīng)關(guān)系Table 1 Density of 3T3-L1 preadipocytes versus optical density in MTT assay

由圖3可知，誘導(dǎo)分化前的3T3-L1脂肪細(xì)胞呈典型的梭形，胞漿中無(wú)脂滴，形態(tài)與成纖維細(xì)胞相似。當(dāng)細(xì)胞完全融合后，處于生長(zhǎng)停滯，未見(jiàn)處于明顯分裂相的細(xì)胞，誘導(dǎo)分化第4天時(shí)，細(xì)胞變大、變圓，細(xì)胞中有脂滴出現(xiàn)。誘導(dǎo)分化第12天時(shí)，前脂肪細(xì)胞分化為成熟的脂肪細(xì)胞，表現(xiàn)為細(xì)胞胞漿豐富，含有大量的脂滴，脂滴分布于核周圍，形成“戒指環(huán)”結(jié)構(gòu)，為典型的成熟脂肪細(xì)胞形態(tài)。

前脂肪細(xì)胞為纖維細(xì)胞，分化成熟的脂肪細(xì)胞形態(tài)為近圓形和圓形。二者最重要的區(qū)別是分化成熟的脂肪細(xì)胞能夠合成甘油三酯，進(jìn)行脂質(zhì)貯存。細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)多個(gè)小脂滴或者單獨(dú)一個(gè)大脂滴，將胞核擠在旁邊。油紅O可以與脂滴結(jié)合呈紅色，因此油紅O染色可以直觀反應(yīng)脂肪細(xì)胞的分化程度。

圖4 不同質(zhì)量濃度芹菜素對(duì)脂肪細(xì)胞分化的影響(油紅O染色)Fig.4 Effect of different concentrations of apigenin on the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes (oil red O staining)

由圖4可知，經(jīng)不同質(zhì)量濃度芹菜素干預(yù)后，各組細(xì)胞分化不同程度被抑制。隨著芹菜素質(zhì)量濃度的升高抑制作用逐漸加強(qiáng)，相對(duì)于空白組，芹菜素組：10μg/mL組細(xì)胞分化降低37.29%，30μg/mL組降低41.52%，50μg/mL組降低46.61%，100μg/mL組降低52.54%。質(zhì)量濃度大于10μg/mL實(shí)驗(yàn)組相對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照組分化程度顯著降低，差異顯著，提示芹菜素具有抑制脂肪細(xì)胞分化的作用。

3 討 論

3T3-L1細(xì)胞屬小鼠源的成纖維細(xì)胞系，是前脂肪細(xì)胞，經(jīng)特殊的誘導(dǎo)分化劑作用后，可以分化為成熟的脂肪細(xì)胞。包括在形態(tài)學(xué)改變、細(xì)胞生長(zhǎng)、多種脂肪代謝酶的表達(dá)、脂質(zhì)積累等方面能充分展示體脂肪細(xì)胞的特點(diǎn)，是目前國(guó)內(nèi)外進(jìn)行脂肪細(xì)胞功能及糖脂代謝研究中使用最廣泛的細(xì)胞株之一[20-21]。抗肥胖主要原理為提高能量消耗，增加脂肪分解和氧化，減少能量攝入，減少前脂肪細(xì)胞分化和增殖，減少脂肪細(xì)胞脂肪合成。前脂肪細(xì)胞可轉(zhuǎn)化成為成熟脂肪細(xì)胞，因此抑制前脂肪細(xì)胞增殖和分化是抗肥胖的一個(gè)重要方法。

芹菜素作為一種天然存在的黃酮類化合物，其對(duì)腫瘤的化學(xué)預(yù)防作用及其機(jī)制已得到較為深入的研究，而近年來(lái)芹菜素的其他藥理藥效也得到日益廣泛的關(guān)注和研究。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)顯示芹菜素具有抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和分化的作用，提示其可能具有預(yù)防肥胖的作用。然而，芹菜素藥理學(xué)作用的研究大多尚處于體外實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物模型階段，許多作用機(jī)制仍不清楚，對(duì)芹菜素的研究還需進(jìn)一步深入。

[1] HUBERT H B. The importance of obesity in the development of coronary risk factors and disease: the epidemiological evidence[J]. Annu Rev Public Health, 1986(7): 493-502.

[2] 陳光亮. 鹽酸西布曲明對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠的減肥作用[J]. 中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué), 2003, 8(1): 56-59.

[3] DANIEL E, ROSENBERG S. Insulin resistance, diabetes and cardiovascular risk: approaches to treatment[J]. Diabetes Obesity and Metabolism, 2005, 7(6): 642-653.

[4] van ITALLIE T B. Health implications of over weight and obesity in the United States[J]. Am Int Med, 1985, 103: 983-984.

[5] 鄭榮梁, 黃中洋. 自由基生物學(xué)[M]. 北京: 高等教育出版社, 2007: 249.

[6] BLOCK G, PATTERSON B, SUBAR A. Fruit, vegetable and cancer prevention: a review of epidemiological evidence[J]. Nutr Cancer, 1992(18): 10-29.

[7] TAKAGAKI N, SOWA Y, OKI T, et al. Apigenin induces cell cycle arrest and p21/WAF1 expression in a p53-independent pathway[J]. Int J Oncol, 2005, 26 (1): 185-189.

[8] ZHENG P W, CHANG C, LIN C C. Apigenin induced apoptosis through p53-dependent pathway in human cervical carcinoma cells[J].Life Sci, 2005, 76 (12): 1367-1379.

[9] FANG Jing, XIA Chang, CAO Zongxian, et al. Apigenin inhibits VEGF and HIF-1 expression via PI3K/AKT/p70S6K1 and HDM2/p53 pathways[J]. FASEB J, 2005, 19 (3): 342-353.

[10] 屈朝法, 馬禮坤. Bcl-2 家族與心肌細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J]. 國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志, 2005, 25(4): 291-293.

[11] BEKTIC J, GUGGENBERGER R, SPENGLER B, et al. The flavonoid apigenin inhibits the proliferation of prostatic stromal cells via the MAPK-pathway and cell-cycle arrest in G1/S[J]. Maturitas, 2006,55: S37-S46.

[12] 胡太平, 曹建國(guó). 芹菜素誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞凋亡作用及機(jī)制研究[J]. 國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志, 2007, 27(1): 6-10.

[13] 金雪瑛, 任常山. 芹菜素抑制人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)[J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2007, 17(4): 402-409.

[14] KANG S S, LEE J K, CHOI Y K. Neuropmtective effects of flavones on hydrogen peroxide-induced apoptosis in SHSY5Y neuroblastoma cells[J]. Bioorg Med Chem Lett, 2004, 14(9): 2261-2264.

[15] ZHANG Yonghe, PARK Y S, KIM T J, et al. Endothelium-dependent vasorelaxant and antiproliferative effects of apigenin[J]. Gen Pharmacol,2000, 35 (6): 341-347.

[16] 趙宇紅, 陳偉強(qiáng), 羅少洪, 等. 芹黃素對(duì)老年癡呆小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J]. 廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2005, 21(3): 292-294.

[17] KIM M Y, IWAI K, ONODERA A, et al. Identification and antiradical properties of anthocyanins in fruits of Viburnum dilatatum thunb[J]. J Agric Food Chem, 2003, 51(21): 6173-6177.

[18] MADERA H, HOSOKAWA M, SASHIMA T, et al. Fucoxanthin and its metabolite, fucoxanthinol, suppress adipocytes differentiation in 3T3-L1 cells[J]. J Mol Med, 2006, 18(1): 147-152.

[19] DALLAS C, GERBI A, TENCA G, et al. Lipolytic effect of a polyphenolic citrus dry extract of red orange, grapefruit, orange(SINETROL) in human body fat adipocytes: Mechanism of action by inhibition of cAMP-phospho- diesterase(PDE)[J]. Phytomedicine, 2008(15): 783-792.

[20] COOKE D W, PATEL Y M. GLUT4 expression in 3T3-Ll adipocytes is repressed by porteasome inhibition, but not by inhibition of calpains[J]. Mol Cell Endocrinol, 2005, 232: 37-45.

[21] HAUGEN F, ZAHID N, DALEN K T, et al. Resistin expression in 3T3-Ll adipocytes is reduced by arachidonic acid[J]. J Lipid Res, 2005,46: 143-153.

Effect of Apigenin on the Proliferation and Differentiation of 3T3-L1 Preadipocytes

YU Hua-qiang，JI Bao-ping*，LIU Jia，ZHOU Feng，GAO Feng-yi，SU Chun-yuan
(College of Food Science and Nutritional Engineering, China Agricultural University, Beijing 100083, China)

Q946.8

A

1002-6630(2010)15-0260-04

2010-02-01

于華強(qiáng)(1982—)，男，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称房茖W(xué)。E-mail：yhqiang2012@yahoo.com.cn

*通信作者：籍保平(1958—)，男，教授，碩士，研究方向?yàn)楣呒庸づc功能食品。E-mail：jbping@cau.edu.cn