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        環(huán)糊精包埋增強白藜蘆醇水溶性的研究

        2010-08-28 06:38:32趙彥麗劉常金楊婷高佳偉
        天津化工 2010年4期
        關(guān)鍵詞:包合物丙基環(huán)糊精

        趙彥麗,劉常金,楊婷,高佳偉

        (1天津科技大學(xué)理學(xué)院,天津 300452;2食品工程與生物技術(shù)學(xué)院,天津 300457)

        環(huán)糊精包埋增強白藜蘆醇水溶性的研究

        趙彥麗1,劉常金2,楊婷2,高佳偉2

        (1天津科技大學(xué)理學(xué)院,天津 300452;2食品工程與生物技術(shù)學(xué)院,天津 300457)

        白藜蘆醇具有抗氧化,抗心血管疾病等多種藥理作用,但因其難溶于水,限制了它在食品及醫(yī)藥領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。本文利用羥丙基-β-環(huán)糊精對白藜蘆醇進行分子包埋,使其在水中的溶解度達到33.07g/L,方便了白藜蘆醇在實際領(lǐng)域中的應(yīng)用。

        白藜蘆醇;羥丙基-β-環(huán)糊精;包埋;水溶性

        白藜蘆醇(resvemtrol)是一類主要存在于葡萄、藜蘆、虎杖等植物中的多酚類化合物。是一種重要的植物抗毒素。白藜蘆醇易溶于乙醇、乙酸乙酯、丙酮等極性溶劑,但是難溶于水。

        環(huán)糊精(CD)能有效地增加一些水溶性不良的藥物在水中的溶解度。環(huán)糊精衍生物具有比母體環(huán)糊精更優(yōu)良的特性,從而增大了其應(yīng)用范圍和應(yīng)用效果。本文利用羥丙基-β-環(huán)糊精對白藜蘆醇分子進行包埋,以期改善其水溶性。羥丙基-β-環(huán)糊精是具有廣闊發(fā)展前景的優(yōu)良藥用輔料[1]。研究表明難溶性藥物被羥丙基-β-環(huán)糊精包合后,不僅能增加藥物的溶解度,還可以提高藥物生物利用度和穩(wěn)定性[2]。

        1 材料與方法

        1.1 材料與設(shè)備

        試劑:白藜蘆醇標準品(Res,純度為98%)天津市經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)尖峰公司;羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)廣州泰龍生化公司;無水乙醇,色譜純甲醇,色譜純乙腈,磷酸等。

        設(shè)備:紫外分光光度計(北京銳利分析儀器有限公司);雙光束紅外分光光度計(WGH-30A型,天津港東股份有限公司),KBr壓片;TU-1800PC紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司);DF-101S集熱式恒溫磁力攪拌器(鞏義市予華儀器責(zé)任有限公司);冷凍干燥機(北京博醫(yī)康實驗儀器有限公司);超聲波震蕩儀、電子天平、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等。高效液相色譜儀(天津市蘭博實驗儀器設(shè)備有限公司),分析柱:天津蘭博C18柱(5μ,250mm× 4.6mm,P/N:KC182545,S/N:07252137.)。

        1.2 方法

        HP-β-CD-Res包合物的制備:

        準確稱取HP-β-CD適量,加適量水,水浴中磁力攪拌使完全溶解。稱取0.1g Res,用適量無水乙醇溶解,磁力攪拌下緩慢滴加到環(huán)糊精的水溶液中,攪拌一定時間,過濾除去雜質(zhì),完畢后置冰箱冷藏過夜。第2d從冰箱中取出,冷凍干燥12h,得干燥的包合物粉末。

        HP-β-CD-Res包合物的測定:

        Res標準品在304nm有最大吸收峰,而環(huán)糊精無紫外吸收,所以可以通過紫外光譜法定性測定,用紫外分光光度計進行定量分析;用高效液相色譜法可以進行精確的定性定量檢測,與測吸光度值的方法相互印證;另外可通過紅外光譜法對比包合物中的吸收峰變化。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 包埋率的計算方法

        依次配制濃度為1、2、3、4、5μg/mL的Res標準溶液,根據(jù)吸光度值制作標準曲線,得線性回歸方程:y=0.1501x R2=0.9985??梢钥闯鲈?~5μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。包埋率=測定的包合物中Res的量/Res投料量×100%。

        實驗表明,HP-β-CD的初始濃度、HP-β-CD與Res的加料比、攪拌時間以及包埋溫度都對包埋率產(chǎn)生影響。本文在多次試驗的基礎(chǔ)上,通過正交試驗確定了最理想的包埋條件,即:HP-β-CD初始濃度為0.12 g/mL,Res與HP-β-CD按照質(zhì)量比1∶12投料,包埋溫度控制在30℃,磁力攪拌1.5h。最后所得包合物產(chǎn)品為疏松的白色結(jié)晶,研碎后得到白色粉末狀包合物。

        2.2 HP-β-CD-Res包合物的測定

        2.2.1 紫外光譜掃描

        掃描結(jié)果如圖1所示,其中a代表Res標準品的掃描結(jié)果,b代表包合物的掃描結(jié)果。標準品由甲醇配制,濃度為10μg/mL,包合物由雙蒸水配制,濃度為1.3mg/mL。因為標準品在水中溶解度極其低,而環(huán)糊精無紫外吸收,所以由圖1可知,包合物中含有白藜蘆醇,且已達到增溶目的。

        2.2.2 紅外光譜掃描

        同時對Res標準品、HP-β-CD、包合物及Res與HP-β-CD的混合物進行紅外掃描,結(jié)果如圖2。

        其中,a為Res標品,b為包合物,c為HP-β-CD,d為混合物。從圖中可以看出,包合物與混合物的圖譜明顯不同,包合物有兩個峰發(fā)生紫移:1398、552;有3個峰發(fā)生紅移:3448、1629、1038;9個峰消失:3023、1588、1327、1249、1035、1039、1011、966、676;新出現(xiàn)一個峰:747。這均表明HP-β-CD與白藜蘆醇產(chǎn)生了包合作用[3]。

        2.2.3 包合物的HPLC檢測

        檢測條件:檢測波長304nm,柱溫30℃,流動相:乙腈:雙蒸水:磷酸(V/V)=40:60:0.2,流速0.8mL/min,進樣量10μL。

        線性關(guān)系實驗:依次配制濃度為1、2、3、4、5μg/mL的Res標準溶液,以色譜峰面積A為縱坐標,Res濃度C為橫坐標繪制標準曲線,得線性回歸方程:y= 1E-0.5x+0.5292(R=0.9970)??梢钥闯鲈?~5μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

        精密度試驗:分別精密稱取同一組包合物6份,用雙蒸水溶解。按上述檢測條件進行掃描,記錄峰面積。計算相對標準偏差RSD為2.73%,該法用于Res的含量測定精密度較好。

        包埋率的測定:分別精密稱取3份不同的包合物適量,用雙蒸水溶解。在上述液相條件下進樣,記錄色譜峰面積,代入回歸方程,得到包合物中Res的含量。包埋率=測定的包合物中Res的量/實際投入的Res的量×100%。計算得到Res的平均包埋率為93.11%。包合物中Res在水中的溶解度為33.07g/L。

        液相檢測結(jié)果如圖3所示,其中a為Res標準品,b為包合物。

        3 結(jié)論

        白藜蘆醇是心、腦血管疾病及癌癥的天然化學(xué)預(yù)防劑[4],但其水溶性很差。羥丙基-β-環(huán)糊精不僅水溶性很高,對熱穩(wěn)定,且對腎無毒,對肌肉和粘膜幾乎無刺激,通過羥丙基-β-環(huán)糊精對白藜蘆醇的包埋,使白藜蘆醇的水溶性顯著提高。本文提供的包埋方法簡便,制備時間短,條件易控制。用無水乙醇作為溶劑,毒性較小,而且環(huán)糊精本身無毒副作用,羥丙基-β-環(huán)糊精在人體內(nèi)基本上不被分解代謝,也不累積,口服絕大部分隨大便排出體外,非腸道給藥時基本上全部隨尿液排出體外,所以包埋產(chǎn)物有極為廣闊的實際應(yīng)用領(lǐng)域。

        [1] 陶濤.羥丙基-β-環(huán)糊精的特性及其藥劑學(xué)應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,2002,33(6):304.

        [2] 張雪梅,劉中華.維生素D-β-環(huán)糊精包合物的測定及熱穩(wěn)定性試驗研究[J].營養(yǎng)學(xué)報,2006,28(4):352—353.

        [3] 邵偉,等.蘆丁-β-環(huán)糊精包合物的研究[J].中藥材,1998,21(1):31.

        [4] MeishiangJ,LiningC.Cancerehemopreventiveactivityofresveratrol,a natural product derived from grapes[J].Science,1997,275:218-2201

        Enhancement of the water-solubility of resveratrol by complexation with β-cyclodextrin

        ZHAO Yan-li1,LIU Chang-jin2,YANG Ting2,GAO Jia-wei2
        (1 School of Science,2 College of Food Engineering and Biotechnology Tianjin 300452;Tianjin University of Science and Technology,Tianjin 300457)

        Resveratrol has shown a strong antioxidation and anti-cardiovascular disease activity,but its poor water solubility limited its direct usage in food and medicine.In this paper,the inclusion of resveratrol by βcyclodextrin was carried out and by the way of controlled release from the complexation,the resveratrol watersolubility have improved up to ten thousand times,and the product is easy to be used in practice.

        resveratrol;cyclodextrin;inclusion;water-solubility

        book=3,ebook=177

        10.3969/j.issn.1008-1267.2010.04.007

        TQ243.1

        A

        1008-1267(2010)04-019-03

        2010-03-26

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