滕靜如,王 昕,晉志高△,李 艷,劉 紅,王少君
(1.中國中醫(yī)科學院 中醫(yī)基礎理論研究所,北京 100700;2.中國中醫(yī)科學院 針灸研究所,北京 100700)
西洋參湯對脾虛證大鼠機體的調(diào)節(jié)作用初探*
滕靜如1,王 昕2,晉志高2△,李 艷1,劉 紅1,王少君1
(1.中國中醫(yī)科學院 中醫(yī)基礎理論研究所,北京 100700;2.中國中醫(yī)科學院 針灸研究所,北京 100700)
目的:觀察西洋參湯對脾虛證大鼠血睪酮含量的影響,探討其治療脾虛證的作用機理。方法:選用成年Wistar大鼠26只,隨機分為4組。其中脾虛造模組8只,西洋參治療組6只,自然恢復組6只,正常對照組6只。除正常對照組外,其余3組均按“彭式”方法建立脾虛證模型,觀察動物的一般狀況。西洋參湯治療11d后,采用放射免疫分析法測定血清中睪酮(T)的含量,以此來說明對脾虛證的影響。結果:西洋參湯可使脾虛大鼠血清中睪酮的水平升高,明顯高于模型對照組(P<0.05)。結論:脾虛證可導致睪酮水平下降,經(jīng)用西洋參湯治療后,激素水平可以得到恢復。
脾虛證;西洋參;睪酮4
自20世紀80年代研制脾虛動物模型以來,脾虛動物模型的實驗研究工作取得了較豐富的經(jīng)驗。從最早利用苦寒瀉下中藥大承氣湯(大黃、芒硝、枳實、厚樸)灌服動物,復制脾虛證動物模型[1,2],用四君子湯(人參、白術、茯苓、甘草)復?。?]以做反正。到最近常用的多因素模型即“彭氏”[4]偏食法(先食酒、后食醋)建立大鼠脾虛動物模型,用西洋參湯治療。雖然思路不同、方法各異,但其研究在脾虛動物模型的不同研究階段都起到一定的推動作用,為脾虛證的研究積累了寶貴資料。
本研究按“彭式”方法建立大鼠脾虛動物模型,動物不但具有中醫(yī)脾虛證的特征,而且可用西洋參湯復健以作反證用以治療。用放射免疫法測定脾虛證大鼠血清中睪酮(T)的含量,以此說明對脾虛證的影響。睪酮是雄性激素的代表,它與人體的運動能力、肌肉力量的增長、疲勞消除密切相關。
我國《藥性考》述記“洋參……味類人參,惟性寒、甘苦,補陰退熱。”西洋參味苦性涼入心肺腎經(jīng),功能滋陰降火益氣生津,為滋補強體、生津止渴、補血用藥,可以補益脾胃陽氣,調(diào)和陰陽,扶正祛邪,同時還能抗缺氧、抗疲勞、增強機體耐力。
選用成年Wistar雄性大鼠26只,由中國中醫(yī)科學院醫(yī)學動物中心提供,體重200g,適應性喂養(yǎng)1周后隨機分為4組,其中脾虛造模組8只,中藥治療組6只,自然恢復組6只,正常對照組6只。除正常對照組外,其余3組均按“彭式”方法造模。模型組于實驗第1天用50%醫(yī)用乙醇1ml/100g體重灌胃。第2天以后,每天用山西白醋(pH=3)1ml/100g體重灌胃,第11天處死動物,斷頭取血。正常組于實驗的第1天1ml/100g體重生理鹽水灌胃,1次/d,第11天處死動物。中藥治療組前10d造模,同模型組,從第11天起停止造模,給予西洋參湯治療,西洋參湯1ml/100g體重灌胃,1次/d,第21天處死動物。自然恢復組前10d造模,同模型組,第11天停止造模,改用生理鹽水1ml/100g體重灌胃,1次/d,第21天處死動物。
中藥西洋參計量 2g/d,喂 10d。稱取西洋參200g,冷水浸泡 1h,煎煮 20min,過濾、濃縮提取液200ml,生藥含量為1g/ml。冰箱內(nèi)保存。
各組大鼠處死前放入長1m寬0.8m深0.8m水溫18℃的水池中,以大鼠入水到頭部沉入水中10s不能浮出水面的時間為力竭時間。
斷頭取血,在3500r/min溫度4℃的條件下離心15min后取上清液,保存在-20℃冰箱中,待用于各種激素的濃度測定。
儀器用GC-911r放射免疫計數(shù)器,由中國科學技術大學科技實業(yè)總公司生產(chǎn)。睪酮放射免疫分析藥盒由北京北方免疫試劑研究所提供,按照試劑盒說明操作。
各項實驗數(shù)據(jù)應用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理,運用配對樣本 t檢驗、卡方檢驗的方法,均采用雙側檢驗,P<0.05被認為所檢驗的差別有統(tǒng)計學意義。
表1顯示,在造模后期,大鼠出現(xiàn)攝食量減少、大便稀溏、神疲乏力、懶動、畏寒、被毛枯槁、毛發(fā)疏散不潔、失去光澤、嗜臥、扎堆、喜聚堆、瞇眼等表現(xiàn)。有些大鼠還有易激惹、咬斗等現(xiàn)象。這與臨床上脾虛證的癥狀較相似。中藥組灌服西洋參湯治療后,上述癥狀有所改善。在冷水游泳力竭實驗中,模型對照組和自然恢復組大鼠的游泳時間顯著低于中藥治療組及正常組(P<0.05)。自然恢復組與模型組游泳時間比較升高不明顯(P>0.05)。自然恢復組游泳時間明顯低于正常組和中藥治療組(P<0.05)。
表1 各組大鼠冷水游泳力竭實驗(±s)
表1 各組大鼠冷水游泳力竭實驗(±s)
注:與模型對照組比較:*P<0.05;與正常對照組比較:△P<0.05;與自然恢復組比較:#P<0.05
組 別 n min正常對照組 6 15.50±1.73*#模型對照組 8 10.13±1.64△自然恢復組 6 11.80±2.86△中藥治療組 6 15.00±2.33*#
表2顯示,模型組大鼠血清中睪酮含量明顯低于正常組(P<0.05),灌服西洋參湯治療后與模型組比較睪酮含量升高(P<0.05)。自然恢復組與模型組比較沒有明顯變化(P>0.05)。自然恢復組睪酮含量明顯低于正常組和中藥治療組(P<0.05)。
表2 各組大鼠血清中睪酮含量比較(±s)
表2 各組大鼠血清中睪酮含量比較(±s)
注:與模型對照組比較:*P<0.05;與正常對照組比較:△P<0.05;與自然恢復組比較:#P<0.05
組 別 n T(ng/ml)正常對照組 6 0.902±0.177*#模型對照組 8 0.274±0.085△自然恢復組 6 0.315±0.109△中藥治療組 6 0.703±0.097*#
本實驗采用偏食法(先食酒再食醋)導致大鼠食欲下降、大便稀溏、體瘦毛松、神疲乏力等,涉及之臟腑當首推脾。脾為后天之本,氣血升化之源;脾主運化,主肌肉四肢,與運動的關系十分密切。正如《素問集注·五臟生成》所說:“脾主運化水谷之精,以生養(yǎng)肌肉,故主肉?!奔∪獾膲褜嵟c否,與脾胃的運化功能相關,脾胃的運化功能障礙,必致肌肉瘦消,軟弱無力,甚至萎弱不用。在力竭實驗中,脾虛大鼠神疲乏力明顯,體力下降很快,故游泳時間就短。我國《藥性考》述記“洋參……味類人參,惟性寒、甘苦,補陰退熱?!闭J為西洋參湯能起到補益脾胃元氣之功,可滋補強體、生津止渴、調(diào)和陰陽、扶正祛邪,增強免疫功能,同時還能抗缺氧、抗疲勞、增強機體耐力、消除疲勞[5]。正如余天莽在《西洋參》一文中指出,西洋參可抗疲勞增強耐缺氧能力,能明顯延長小鼠游泳時間和抓棒時間,延長缺氧時的生存時間和耐受性[6]。用西洋參湯治療10d后,脾虛癥狀便得以糾正,所以中藥治療組大鼠游泳時間比模型對照組長(P<0.05)。
脾為后天之本,氣血生化之源。脾主四肢肌肉,維持臟腑正常機能。而腎藏精,主骨生髓,為先天之本。先天之精與生俱來,而后天之精來源于攝入的飲食物,通過脾胃運化功能而生成水谷之精氣。脾虛則生化無源,臟腑失養(yǎng);腎也需依賴脾胃水谷精氣的滋養(yǎng),脾虛日久最后必然會引起腎的虛損[7]。脾虛及腎是逐漸加重的病理過程,又可出現(xiàn)四肢肌肉萎縮、肢體無力,骨枯髓虛,形削肉萎,腰脊四肢痿軟無力,最后使體內(nèi)性激素(睪酮)水平發(fā)生紊亂。睪酮是雄性激素的代表,它與動物的運動能力、肌肉力量的增長、疲勞消除密切相關,故此模型組血清睪酮含量明顯降低。
自古以來,東方人把人參視為起死回生的靈丹妙藥,可大補人體元氣。西洋參的功能與人參相似,正如張錫純所著《醫(yī)學衷中參西錄》載:“西洋參性涼而補,凡欲用人參而不受之溫補者,皆可以此代之?!蔽餮髤勺萄a強體,增強免疫功能,同時還能消除疲勞,一直被推為健脾補虛培元之首選中藥。在中藥組灌服西洋參湯后,脾虛癥狀有所改善,模型組血清睪酮含量的降低可以得到糾正(模型對照組與中藥治療組比較P<0.05)。中醫(yī)認為,脾腎在生理上有著密切聯(lián)系,相互資生、相互促進,脾主運化水谷精微,需借助腎中陽氣的溫煦,而腎中精氣亦有賴于水谷精微的不斷充實和營養(yǎng),在維持機體的正常生理活動中發(fā)揮著重要作用,使得氣血旺盛,元氣充沛。通過補脾而滋腎,先后天相互資生和促進,以達到機體的陰陽平衡。
綜上所述,脾虛證的發(fā)生與性激素水平紊亂有關,經(jīng)西洋參湯治療后,脾虛癥狀有所改善,激素水平可以得到恢復。說明西洋參湯對脾虛大鼠有一定的保護作用,對受損的機體修復具有顯著的促進作用,從而發(fā)揮其健脾補虛、強肌健力之功,其作用機理之一可能與調(diào)節(jié)性激素水平有關。
[1]北京師范大學生物系消化科研組.中醫(yī)脾虛動物模型的造型[J].中華醫(yī)學雜志,1980,60(2):83-86.
[2]陳小野.脾虛證動物模型的造模思路[J].中醫(yī)雜志,1993,35(4):239-241.
[3]楊云,陳小野,王昕,等.勞倦和饑飽引起的大鼠脾虛證模型的造型及實驗研究[J].中華中醫(yī)藥雜志,1989(2).
[4]彭成,羅光宇.脾氣虛脾不統(tǒng)血證候動物模型的研究思路[J].中醫(yī)雜志,1996,37(4):241.
[5]劉鐵城.中國西洋參[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1995.
[6]余天莽,余椿生.西洋參[J].食品與藥品,2006,8(2).
[7]陳芝喜,劉小斌,周名璐,等.健脾補腎方對脾虛大鼠性激素及甲狀腺激素水平的影響[J].中國醫(yī)藥學刊,2006,4(3):14.
△通訊作者:晉志高(1953-),男,研究員,從事針灸的神經(jīng)生物學機制研究。
R285.5
B
1006-3250(2010)09-0819-02
國家中醫(yī)藥管理局項目(2002LHR01);國家自然科學基金項目(39870905)
2010-03-19