李勝水 盧智 張紅艷 劉巖 李雙標(biāo) 張鳳梅 高秀敏 許華

(河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院病理科 河北滄州 061001)

近來(lái)研究表明,間隙連接蛋白(connexin,Cx)43、整合素連接激酶(Integrin-linked,ILK)與腫瘤的形成和發(fā)展關(guān)系密切。我們采用免疫組織化學(xué)S-P法檢測(cè)正常卵巢組織、卵巢良性腫瘤、交界性腫瘤和卵巢癌組織中Cx43,ILK的表達(dá)。

表1 Cx43、ILK表達(dá)情況[例（%）]

表2 卵巢癌Cx43、ILK表達(dá)與組織學(xué)類(lèi)型、病理分級(jí)的關(guān)系[例（%）]

1 臨床資料

1.1 標(biāo)本

收集6家醫(yī)院病理科存儲(chǔ)蠟塊標(biāo)本,卵巢腫瘤標(biāo)本139例,其中良性腫瘤37例,交界性腫瘤33例,卵巢癌69例(漿液性癌29例,粘液性癌22例,子宮內(nèi)膜樣癌18例)制成5μm厚切片待檢。正常卵巢標(biāo)本取自22例子宮平滑肌瘤手術(shù)切除標(biāo)本。

1.2 免疫組織化學(xué)染色

采用鏈菌素生物素-過(guò)氧化物酶法(S-P法),S-P試劑盒。結(jié)果判定:表達(dá)部位均在細(xì)胞漿,以細(xì)胞漿呈清晰棕色為表達(dá)陽(yáng)性。高倍鏡下(放在200倍)隨機(jī)選取4個(gè)不同視野,計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)及陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),按陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比計(jì)分:陽(yáng)性細(xì)胞率≤25%為1分;陽(yáng)性細(xì)胞率＞25%且≤50%為2分;陽(yáng)性細(xì)胞率>50%且≤75%為4分。染色強(qiáng)弱程度計(jì)分:陰性1分;弱染色2分;中等強(qiáng)度染色3分;強(qiáng)染色4分。根據(jù)二者的乘積判斷結(jié)果:≤4分為(-);>4分且≤8分為(+);>8分且≤12分為(++);>12分且≤16分為(+++)。統(tǒng)計(jì)分析時(shí)(-)為陰性表達(dá),(+)、(++)和(+++)均為陽(yáng)性表達(dá)。

1.3 結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析

采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 Cx43、ILK蛋白在卵巢上皮性腫瘤的表達(dá)

卵巢癌與正常卵巢組織、良性和交界性卵巢腫瘤比較,Cx43蛋白表達(dá)下降,ILK表達(dá)增強(qiáng),均有顯著差異(P<0.01),后三者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見(jiàn)表1。

2.2 Cx43、ILK蛋白表達(dá)與卵巢癌組織學(xué)類(lèi)型和病理分級(jí)的關(guān)系

Cx43蛋白表達(dá)在不同組織學(xué)類(lèi)型和分化程度的卵巢癌中無(wú)顯著差異(P>0.05);ILK的表達(dá)中,粘液性癌與漿液性癌和子宮內(nèi)膜樣癌比較有顯著差異(X=6.298,P<0.05),后兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在不同分化程度的卵巢癌中,ILK表達(dá)顯著差異,見(jiàn)表2。

2.3 Cx43、ILK表達(dá)與卵巢癌分期的關(guān)系

69例卵巢癌中,按FIGO標(biāo)準(zhǔn)分期且臨床和病理資料完整者56例。Cx43在不同分期的卵巢癌均有表達(dá),而Ⅲ～Ⅳ期癌的表達(dá)陽(yáng)性率(38.7%,12/31)低于Ⅰ～Ⅱ期癌(68.0%,17/25),兩者差異有顯著意義(X=4.757,P<0.05)。ILK在Ⅰ～Ⅱ期癌的表達(dá)陽(yáng)性率(64.5%,20/31)低于Ⅲ～Ⅳ期癌(88.0%,22/25),差異顯著(X=4.073,P<0.05)。

3 討論

Cx43是分子量為43KD的含有378個(gè)氨基酸的單肽[1],Cx43表達(dá)減少或缺失可造成卵巢癌等多種細(xì)胞間隙連接及其連接通迅結(jié)構(gòu)和功能異常,影響細(xì)胞間傳遞信號(hào)和能量、調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖分化和形態(tài)發(fā)生等內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,為腫瘤細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化、增殖提供必要條件,并與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移相關(guān)[2～4]。本研究結(jié)果表明,卵巢癌Cx43蛋白表達(dá)陽(yáng)性率顯著低于正常卵巢、良性和交界性腫瘤(P<0.01)。而不同類(lèi)型卵巢癌組織中Cx43蛋白陽(yáng)性率無(wú)明顯差異(P>0.05)。提示不同類(lèi)型的卵巢上皮癌可能都存在Cx43蛋白下降。另外不同分期的卵巢癌中Cx43在Ⅲ～Ⅳ期癌的表達(dá)陽(yáng)性率低于Ⅰ～Ⅱ期癌(P<0.05),即晚期卵巢癌Cx43蛋白表達(dá)陽(yáng)性率下降更顯著,由此可以推論Cx43失活不但在卵巢癌的發(fā)生中起一定作用,而且對(duì)其發(fā)展也有一定作用。

研究發(fā)現(xiàn),ILK能通過(guò)介導(dǎo)細(xì)胞與ECM的跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),調(diào)控整合蛋白、生長(zhǎng)因子介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及Wnt信號(hào)通路[5～8],調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖、分化、調(diào)亡、粘著和侵襲[9～11]。ILK的表達(dá)和活性增加時(shí),細(xì)胞顯示高度的侵襲表型,表明ILK是一個(gè)癌基因。本研究結(jié)果顯示,ILK在卵巢癌表達(dá)陽(yáng)性率高于正常卵巢、良性和交界性腫瘤(P<0.01),在粘液性癌的表達(dá)與漿液性癌和子宮內(nèi)膜樣癌比較,差異顯著(P<0.05)。由此說(shuō)明ILK在不同類(lèi)型卵巢癌的發(fā)生過(guò)程中所起的作用可能不同。在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,細(xì)胞的癌變是多基因、多步驟在時(shí)間和空間上協(xié)同作用的結(jié)果。ILK的表達(dá)陽(yáng)性率Ⅲ～Ⅳ期癌的表達(dá)陽(yáng)性率高于Ⅰ～Ⅱ期癌(P<0.05)。

通過(guò)對(duì)卵巢癌組織中Cx43、ILK蛋白表達(dá)比較,可能在卵巢癌進(jìn)展中ILK的表達(dá)的增加伴隨E-cadherin表達(dá)的下降,導(dǎo)致細(xì)胞-細(xì)胞間粘著的喪失和ECM相互作用的減弱,使上皮細(xì)胞間粘附、連接抑制,細(xì)胞易于脫落,連接通迅不利于建立,抑制了Cx43的表達(dá),使周?chē)恍┱{(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化的信號(hào)不易于通過(guò);而Cx43表達(dá)缺失,細(xì)胞GJIC功能下降,不利于Ca2+等第二信使物質(zhì)通過(guò),使E-cadherin表達(dá)下降或缺失,從而促使腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,二者協(xié)同促進(jìn)了卵巢癌的進(jìn)展,這可能也是導(dǎo)致上述負(fù)相關(guān)的原因。在卵巢癌的發(fā)生進(jìn)展過(guò)程中,Cx43和ILK是否存在類(lèi)似的關(guān)系或作用,有待進(jìn)一步研究。

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