田陽(yáng)斌，馮選明，唐永仙

(四川省攀枝花市中心醫(yī)院:1.乳腺外科;2.病理科 617067)

髓樣癌在乳腺癌中較為少見(jiàn)，占乳腺癌的7%及35歲以下年輕婦女乳腺癌的11%[1]。本研究通過(guò)應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)乳腺髓樣癌中上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達(dá)，結(jié)合臨床病理特征，探討兩者的表達(dá)與乳腺髓樣癌生物學(xué)行為及其預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標(biāo)本來(lái)源于本院1998～2008年收治的49例行手術(shù)切除并經(jīng)病理組織學(xué)證實(shí)為乳腺髓樣癌患者。病例全部為女性，年齡30～46歲，平均 39.1歲。術(shù)前未接受任何治療。按照2003年版UICC臨床分期:Ⅰ+Ⅱ期26例，Ⅲ+Ⅳ期15例。按照參考文獻(xiàn)[2]提出的髓樣癌分類標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分類:典型髓樣癌21例，非典型髓樣癌28例。

1.2 試劑與方法 鼠抗人上皮鈣依賴黏附素、β-連環(huán)蛋白單克隆抗體及SP試劑盒均購(gòu)于福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司。采用免疫組織化學(xué)SP法染色，操作步驟按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。用PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的著色部位主要均為細(xì)胞膜，少數(shù)有胞質(zhì)著色。以細(xì)胞膜和(或)細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒染色為陽(yáng)性信號(hào)，以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù):≥10%作為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)10%～25%為弱陽(yáng)性(+)，＞25%～50%為中度陽(yáng)性(++)，50%以上為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用S PSS11.5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白在乳腺典型髓樣癌及非典型髓樣癌中的表達(dá) 上皮鈣依賴黏附素在乳腺典型髓樣癌及非典型髓樣癌中表達(dá)陽(yáng)性率分別為95.2%(20/21)和64.3%(18/28);β-連環(huán)蛋白在乳腺典型髓樣癌及非典型髓樣癌中表達(dá)陽(yáng)性率分別為85.7%(18/21)和53.6%(15/28)。兩者在乳腺典型髓樣癌中的表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于非典型髓樣癌，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 49例乳腺髓樣癌中上皮鈣依賴黏附素與β-連環(huán)蛋白表達(dá)的關(guān)系 隨著上皮鈣依賴黏附素表達(dá)強(qiáng)度的增加，β-連環(huán)蛋白表達(dá)陽(yáng)性率也逐漸增高，且表達(dá)強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)(表1)，兩者呈正相關(guān)(P＜0.05)。

表1 49例乳腺髓樣癌患者上皮鈣依賴黏附素與β-連環(huán)蛋白表達(dá)的關(guān)系

2.3 上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達(dá)與乳腺髓樣癌臨床病理特征的關(guān)系 上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達(dá)與乳腺髓樣癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床分期有明顯關(guān)系，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越多、臨床分期越高，上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白表達(dá)陽(yáng)性率越低，呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05);但兩者的表達(dá)與患者年齡、腫瘤大小及有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表2。

表2 49例乳腺髓樣癌患者上皮鈣依賴黏附素與β-連環(huán)蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

3 討 論

乳腺髓樣癌的組織學(xué)類型分為典型髓樣癌與非典型髓樣癌，兩者組織結(jié)構(gòu)及細(xì)胞形態(tài)類似，但預(yù)后差異顯著，文獻(xiàn)報(bào)道乳腺典型髓樣癌10年存活率為92%，而非典型髓樣癌僅為53%[2]。病理發(fā)現(xiàn):在乳腺典型髓樣癌中腫瘤與周圍乳腺組織有明顯的界限，瘤體呈膨脹性生長(zhǎng)，而非典型髓樣癌腫瘤邊緣呈灶性或浸潤(rùn)性生長(zhǎng)[3]。上皮鈣依賴黏附素是一類依賴于鈣離子的細(xì)胞表面糖蛋白，主要參與同種細(xì)胞間的連接，對(duì)維持上皮細(xì)胞間的完整性、極性、形態(tài)和組織結(jié)構(gòu)起重要作用[4]。上皮鈣依賴黏附素主要分布于各種上皮組織中，其編碼基因位于16q22～q23.1[5]。它的高表達(dá)使腫瘤呈膨脹性生長(zhǎng)，瘤細(xì)胞之間保持密切的接觸，難以脫離原發(fā)瘤侵入周圍組織及血管，從而抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，故預(yù)后較好。本實(shí)驗(yàn)中，乳腺典型髓樣癌的上皮鈣依賴黏附素表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于非典型髓樣癌，提示乳腺典型髓樣癌瘤組織的膨脹性生長(zhǎng)與上皮鈣依賴黏附素的高表達(dá)有關(guān)，非典型髓樣癌瘤組織的浸潤(rùn)性或灶性生長(zhǎng)與上皮鈣依賴黏附素的低表達(dá)有關(guān)。上皮鈣依賴黏附素也是與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系最密切的一種細(xì)胞因子，特別是對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的乳腺癌患者預(yù)后價(jià)值更大[6-7]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示乳腺髓樣癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性、臨床分期越低，上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率越高;相反乳腺髓樣癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性、臨床分期越高，上皮鈣依賴黏附素和β-連環(huán)蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率越低。前者預(yù)后明顯好于后者。上皮鈣依賴黏附素可被視為一個(gè)獨(dú)立的乳腺髓樣癌預(yù)后指標(biāo)。

連環(huán)蛋白是上皮鈣依賴黏附素發(fā)揮正常功能所必需的。上皮鈣依賴黏附素通過(guò)α、β、γ-連環(huán)蛋白經(jīng)羥基端在細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞骨架的微絲連接形成復(fù)合體而發(fā)揮功能[8]。β-連環(huán)蛋白是整個(gè)復(fù)合體功能的主要調(diào)控因子，它的高表達(dá)使得上皮鈣依賴黏附素的作用得以充分發(fā)揮[9]。本實(shí)驗(yàn)中，β-連環(huán)蛋白在乳腺典型髓樣癌中的表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于非典型髓樣癌，且與上皮鈣依賴黏附素表達(dá)強(qiáng)度呈正相關(guān)，提示β-連環(huán)蛋白的表達(dá)差異與乳腺典型髓樣癌及非典型髓樣癌不同的生長(zhǎng)方式有關(guān)，Charpin等[10]在對(duì)髓樣癌的研究中亦認(rèn)為，典型髓樣癌上皮鈣依賴黏附素及β-連環(huán)蛋白的高表達(dá)限制了腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)，使其預(yù)后較好。但近年也有文獻(xiàn)報(bào)道，β-連環(huán)蛋白的過(guò)表達(dá)標(biāo)志著腫瘤的不良預(yù)后[11-13]。因此，β-連環(huán)蛋白能否成為影響乳腺髓樣癌的預(yù)后指標(biāo)尚有爭(zhēng)議。

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