郭鵬舉 高 巍
隨著畜牧養(yǎng)殖業(yè)集約化生產(chǎn)的發(fā)展,營(yíng)養(yǎng)代謝病特別是骨營(yíng)養(yǎng)不良成為制約畜牧業(yè)發(fā)展的主要疾病。有研究結(jié)果表明,動(dòng)物體內(nèi)陰陽離子平衡失調(diào)是造成骨營(yíng)養(yǎng)不良的主要原因。如今,隨著反芻動(dòng)物飼料中鉀含量的普遍提高,勢(shì)必對(duì)動(dòng)物體內(nèi)的電解質(zhì)平衡造成影響。本試驗(yàn)旨在通過測(cè)定不同鉀水平日糧對(duì)綿羊血清、尿液中生化指標(biāo)的影響,來探討高鉀日糧對(duì)反芻動(dòng)物體內(nèi)其它礦物質(zhì)元素以及健康等方面的影響,為今后進(jìn)一步的研究提供前期研究基礎(chǔ),為生產(chǎn)上合理配制日糧提供試驗(yàn)依據(jù)。
本試驗(yàn)選用4頭體重(40 kg左右)、年齡(2周歲左右)相近的健康新疆細(xì)毛羊羯羊?yàn)樵囼?yàn)動(dòng)物。常規(guī)舍飼喂養(yǎng),日糧定量分早(8:00)、晚(20:00)兩次喂給,自由飲水。
優(yōu)級(jí)純碳酸鉀(≥99%),江蘇化工廠生產(chǎn)。
本試驗(yàn)采用4×4拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì),試驗(yàn)方案見表1。將羊分為4組,分別飼喂不同鉀水平的日糧。A組為對(duì)照組(基礎(chǔ)日糧),B組(基礎(chǔ)日糧+538mg/kg)、C組(基礎(chǔ)日糧+1 084mg/kg)、D 組(基礎(chǔ)日糧+1 631mg/kg)為試驗(yàn)組,使4組的鉀水平分別達(dá)到1.4%、1.8%、2.2%和2.6%。試驗(yàn)從2009年3月到2009年6月,共分4期,每期13 d。預(yù)飼期10 d,正試期3 d。
表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案
綿羊基礎(chǔ)日糧由中等苜蓿干草、棉籽殼和混合精料組成,精粗比為40:60?;旌暇吓浞郊盃I(yíng)養(yǎng)水平見表2,試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表3。
表2 混合精料配方及營(yíng)養(yǎng)水平
表3 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
1.5.1 尿樣的采集
在正試期3 d內(nèi),每天早晨飼喂前1 h收集尿液,收集的尿液馬上用便攜式pH(雷磁PHS-3C型)測(cè)定尿液的pH值,然后采集約20 ml的尿液,加入濃鹽酸3滴,冰凍保存,留待測(cè)定尿液生化指標(biāo)。
1.5.2 血樣采集和血清制備
在正試期3 d內(nèi),每天下午飼喂前1 h對(duì)試驗(yàn)羊進(jìn)行頸靜脈采血,靜置后收集血清,冷凍保存,留待進(jìn)行各種成分的測(cè)定。
1.6.1 血清生化指標(biāo)測(cè)定
采用722型分光光度計(jì)測(cè)定血清Ca2+(核固紅染色法)、K+(四苯硼鈉比濁法)、P5+(鉬酸銨比色法)、Na+(醋酸鈾鋅法)、Mg2+(肽黃比色法)、肌酐(堿性苦味酸法)濃度和羥脯氨酸(氯胺T比色法)濃度。
1.6.2 尿液生化指標(biāo)測(cè)定
項(xiàng)目與方法同血清生化指標(biāo)測(cè)定類似。
采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,用Duncan's法進(jìn)行多重比較,各組數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。
表4 不同鉀水平日糧對(duì)綿羊血清中生化指標(biāo)的影響
由表4可以看出,綿羊血清鈣含量是隨著日糧鉀水平的提高而增加,且A組與D組差異達(dá)到顯著水平(P<0.05),其它各組之間差異不顯著(P>0.05);血清磷含量也是隨著日糧鉀水平的提高而增加,但各組間差異不顯著(P>0.05);血清鉀的含量是隨著日糧鉀水平的提高有下降的趨勢(shì),各組之間差異不顯著(P>0.05);血清鈉含量是隨著日糧鉀水平的提高而下降,各組之間差異不顯著(P>0.05);各組之間的鎂含量也沒有達(dá)到顯著水平,C組鎂含量低于A、B、D組,但差異不顯著(P>0.05);各組之間的羥脯氨酸含量沒有達(dá)到顯著水平,B組的羥脯氨酸含量低于A、C、D組,但差異不顯著(P>0.05)。
血清礦物離子在維持動(dòng)物的正常代謝方面有非常重要的作用,它們參與機(jī)體各種生命活動(dòng):如維持細(xì)胞的通透性,肌肉、神經(jīng)細(xì)胞的應(yīng)激性,維持細(xì)胞內(nèi)外的滲透壓,調(diào)節(jié)機(jī)體的酸堿平衡,組成機(jī)體組織,形成生物活性物質(zhì)等。許多研究表明,隨著DCAB值的增加,奶用反芻動(dòng)物的血清鈣水平會(huì)降低,從而產(chǎn)生乳熱癥。眾所周知,陽離子鉀元素是對(duì)DCAB值影響最大的一個(gè)因素,隨著鉀水平的增加,DCAB值也就相應(yīng)增加。所以就不難理解Goff等(1997)報(bào)道的影響乳熱癥發(fā)病率的主要營(yíng)養(yǎng)因素是鉀和鈉,而不是鈣,尤其是在日糧鈣水平比較低時(shí)。楊亮等(2008)報(bào)道,隨著DCAB水平的升高,綿羊血Ca濃度逐漸降低,但差異不顯著。胡明等(2002)用內(nèi)蒙古半細(xì)毛羊羯羊作為試驗(yàn)動(dòng)物研究表明,血漿鈣的濃度隨DCAB值的增加有下降趨勢(shì),但當(dāng)DCAB值增到40 meq/100 g DM時(shí),血漿鈣的濃度又上升,這與本試驗(yàn)結(jié)果類似。本試驗(yàn)結(jié)果與一些研究者的結(jié)果不同的原因可能是由于試驗(yàn)動(dòng)物性別不同以及本試驗(yàn)日糧的鈣含量較高造成的。
劉宏峰(2004)、劉太宇(2008)報(bào)道,不同 DCAB水平日糧對(duì)血清磷含量的影響差異不顯著,與本試驗(yàn)結(jié)果類似。劉德惠(1996)用灌注KCl的方法研究表明,高鉀可使血磷含量明顯上升。差異原因可能與試驗(yàn)動(dòng)物品種和日糧類型不同有關(guān)。
有試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著日糧鉀水平的升高,血液中的鉀含量會(huì)升高。本試驗(yàn)結(jié)果是隨著日糧鉀水平的升高,血液中的鉀含量降低,但差異不顯著。原因可能是高鉀日糧導(dǎo)致動(dòng)物處于堿中毒,細(xì)胞內(nèi)的氫離子同血漿中的鉀離子發(fā)生交換,作為維持酸堿平衡和血液pH值的部分調(diào)節(jié)機(jī)制,以此降低血鉀濃度。
飼料添加高劑量的鉀時(shí),動(dòng)物胃腸道鎂的吸收量減少。發(fā)生低鎂血癥的主要原因是動(dòng)物對(duì)鎂的吸收量減少,而不是植物中鎂含量不高。韓正康(1996)報(bào)道,高鉀可使血清鎂上升,但差異不顯著,與本試驗(yàn)結(jié)果類似。原因可能是在鉀含量小于2.6%時(shí),并不直接影響鎂的吸收。
鉀調(diào)節(jié)主要涉及的激素是醛固酮。當(dāng)血漿中Na+的水平降低,K+的水平同時(shí)增加,便會(huì)促進(jìn)醛固酮的分泌。通過腎臟排除體內(nèi)過剩的鉀離子,這個(gè)調(diào)節(jié)機(jī)制維持機(jī)體細(xì)胞外液中恒定的Na:K比率。本試驗(yàn)結(jié)果表明,血清鈉含量是隨著日糧鉀水平的提高而下降,各組之間差異不顯著。
當(dāng)膠原降解時(shí),生成的羥脯氨酸不能再用于膠原的合成,并以肽的形式由尿排出。因此測(cè)定尿中羥脯氨酸的含量,可作為骨降解程度的參考指標(biāo)。當(dāng)尿中羥脯氨酸含量升高時(shí),血中羥脯氨酸的含量就可能降低。本試驗(yàn)中隨著日糧中鉀水平的升高,血液中的羥脯氨酸含量有升高趨勢(shì),尿中羥脯氨酸的含量升高。
由表5可以看出,綿羊尿液的pH值隨著日糧鉀水平的提高而增加,且A組、B組和C組相互之間pH值達(dá)到極顯著的水平(P<0.01),A組、B組和D組相互之間pH值也達(dá)到極顯著的水平(P<0.01),C組與D組之間差異不顯著(P>0.05)。綿羊尿鈣含量隨日糧鉀水平的提高有降低的趨勢(shì),但各組間差異不顯著(P>0.05);尿磷含量隨日糧鉀水平的提高而降低,但差異不顯著(P>0.05);尿鉀含量隨日糧鉀水平的提高有升高的趨勢(shì),且A組和D組之間達(dá)到顯著水平(P<0.05),其它各組之間差異不顯著(P>0.05);尿鈉含量隨日糧鉀水平的提高而升高,但差異沒有達(dá)到顯著水平(P>0.05);尿鎂含量隨日糧鉀水平的提高而升高,但差異不顯著(P>0.05);羥脯氨酸含量隨日糧鉀水平的提高而升高,但差異不顯著(P>0.05)。
表5 不同鉀水平日糧對(duì)綿羊尿液中生化指標(biāo)的影響
尿液pH值是監(jiān)測(cè)動(dòng)物酸-堿狀況非常敏感和簡(jiǎn)便的方法。尿液pH值比血液指標(biāo)更敏感地反映日糧因素的差別。表6列出了不同DCAB值條件下尿液pH值的情況。從表6可以看出,正DCAB值的尿液pH值在7~8,與本試驗(yàn)結(jié)果一致。也就是隨著日糧鉀離子水平的升高,綿羊尿液pH值也顯著升高。
表6 不同DCAB值條件下尿液的pH值*
尿鈣是鈣排泄的主要途徑之一,是腸鈣吸收、骨鈣吸收、腎小球?yàn)V過、腎小管重吸收等多種生理過程的最后結(jié)果。尿鈣可以反映體內(nèi)鈣代謝的變化,與骨鈣和骨磷的代謝直接相關(guān)。與血鈣含量不同,尿鈣含量有隨日糧鉀水平的提高而降低的趨勢(shì);尿磷含量則也隨日糧鉀水平的提高而降低。這兩者與韓正康(1996)的研究結(jié)果一致。原因可能是尿量增加而產(chǎn)生的稀釋作用所致。尿鉀含量隨日糧鉀水平的提高而升高,且A組和D組之間達(dá)到顯著水平(P<0.05)。由于動(dòng)物體內(nèi)有很嚴(yán)密的鉀調(diào)控機(jī)制,所以當(dāng)血鉀含量升高時(shí),機(jī)體就會(huì)從尿中排出多余的鉀,保證機(jī)體內(nèi)礦物質(zhì)元素的穩(wěn)定狀態(tài)。同時(shí),反芻動(dòng)物體內(nèi)尚無明顯有效的維持鎂平衡的機(jī)制,缺乏動(dòng)員大量鎂貯的能力。血清鎂的精細(xì)平衡,在很大程度上依賴于飼料鎂的日攝入量,當(dāng)攝入量明顯減少或攝入鎂的利用率降低,即可引起低鎂血癥。本試驗(yàn)結(jié)果中,尿鎂含量隨日糧鉀水平的提高而升高,與劉德惠(1996)的研究結(jié)果一致。與尿鉀一樣,尿鈉含量隨日糧鉀水平的提高而升高,這主要是由醛固酮激素調(diào)節(jié)的。當(dāng)血漿中Na+的水平降低,K+的水平同時(shí)增加,便會(huì)促進(jìn)醛固酮的分泌。通過腎臟排除體內(nèi)過剩的鉀離子,這個(gè)調(diào)節(jié)機(jī)制維持機(jī)體細(xì)胞外液中恒定的Na:K比率。
前已述及,測(cè)定尿中羥脯氨酸的含量,可作為骨降解程度的參考指標(biāo)。當(dāng)尿中羥脯氨酸含量升高時(shí),血中羥脯氨酸的含量就可能降低。本試驗(yàn)中隨著日糧中鉀水平的升高,血液中的羥脯氨酸含量有升高趨勢(shì),尿中羥脯氨酸的含量升高。
通過本試驗(yàn)可以得出,隨著日糧中鉀水平(1.4%~2.6%)的提高,綿羊血清中鈣有升高的趨勢(shì),說明低血鈣并不是單獨(dú)由高鉀造成的;隨著日糧中鉀水平的提高,綿羊尿液的pH值隨著日糧鉀水平的提高而增加,且A組、B組和C組相互之間pH值達(dá)到極顯著的水平(P<0.01),A組、B組和D組相互之間pH值也達(dá)到極顯著的水平(P<0.01),C組與D組之間差異不顯著(P>0.05);隨著日糧中鉀水平的提高,尿中鉀含量有提高的趨勢(shì)。對(duì)于反芻動(dòng)物鉀與鈣、鎂、磷、鈉等礦物質(zhì)元素代謝的相互關(guān)系,可以說是錯(cuò)綜復(fù)雜,它們之間存在直接或間接或繼發(fā)的關(guān)系,今后還需進(jìn)行更深入的研究。
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