張 生,杜 鵑,梁美花,孫躍輝,黃金海

(1.天津市動(dòng)物園,天津 南開 300381;2.天津大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物工程食品科學(xué)系,天津 南開 300072)

夏秋季節(jié)水禽細(xì)菌病及其混合感染引起死亡是動(dòng)物園常見的疾病。臨床上多出現(xiàn)腹瀉,站立不起,一般在發(fā)病1～2 d死亡,如果不及時(shí)處理,常導(dǎo)致混合飼養(yǎng)的多種珍禽感染而死亡,造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。2008年9月天津市動(dòng)物園鵜鶘等珍禽發(fā)生類似細(xì)菌感染,造成多只珍禽死亡,報(bào)告如下。

1 流行情況

天津市動(dòng)物園鳥語林大多水生珍禽多采用混合飼養(yǎng)形式。2008年9月3日,發(fā)現(xiàn)3只綠頭鴨發(fā)病,表現(xiàn)兩腿麻痹,頭下垂,排出灰綠色水樣稀糞。隨后1只非洲雁、北京鴨也相繼發(fā)病,表現(xiàn)類似癥狀,次日6只鵜鶘、1只白鷺、1只夜鷺相繼表現(xiàn)精神沉郁、頭部下垂,無法站立,腹瀉。5日,6只鵜鶘、3只大天鵝、1只小天鵝相繼發(fā)病。前后分別用慶大霉素、土霉素、鏈霉素、維生素C、葡萄糖等灌服或翅下靜脈滴注治療,隔離單獨(dú)飼養(yǎng)發(fā)病珍禽,對(duì)地面、水域消毒處理。但先后死亡北京鴨、綠頭鴨、非洲雁各1只,7只鵜鶘,1只天鵝。剖檢癥狀基本相似。心包積液、心肌表面有出血斑點(diǎn),肝臟腫大、邊緣鈍化、土黃色或青紫色,質(zhì)地脆,脾臟、腸道彌散性出血。

2 病原的分離與鑒定

2.1 細(xì)菌的分離培養(yǎng) 病死鵜鶘、天鵝的肝臟抹片鏡檢,均可檢出革蘭陽性大桿菌,鵜鶘心包積液,還可看到單在、成雙排列的球菌。將鵜鶘心包積液、肝臟分別接種在鮮血瓊脂平板、普通瓊脂平板,37℃培養(yǎng)24 h,在普通瓊脂平板上長(zhǎng)出灰白色、濕潤(rùn)、邊緣整齊,直徑約2 mm大小的菌落 P2、B1、B2;血液瓊脂平板上生長(zhǎng)形成β溶血、直徑約1 mm左右的光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊的灰白色菌落P 1。將分離的4株純培養(yǎng)物涂片染色鏡檢,P1為革蘭陽性單在、成雙、短鏈狀鏈球菌,血清肉湯培養(yǎng)物生長(zhǎng)豐盛,形成絮狀沉淀;P 2、B1、B2菌為革蘭陽性、中等大小的桿菌,肉湯中均勻混濁。

2.2 分離菌的生化特性 結(jié)果見表1。

2.3 動(dòng)物致病力試驗(yàn) 用4株分離菌的24 h肉湯培養(yǎng)物0.2m L(約2.0×106CFU/m L),分別腹腔注射2只小鼠,B1、B2分別在接種后18～30 h內(nèi)全部死亡,小鼠精神沉郁、有震顫和抽搐等神經(jīng)癥狀。剖檢病變均為敗血癥,并從實(shí)質(zhì)臟器肝分離到接種菌。分離菌分別肌肉注射30日齡健康鴨3只,接種量為0.2 mL/只。B1、B2菌接種后 10～24 h相繼發(fā)病,病鴨出現(xiàn)不能站立,水樣腹瀉,2只出現(xiàn)死亡。病鴨肝臟腫大、質(zhì)脆,脾臟、腸道出血。P1、P2菌接種小鼠、鴨均出現(xiàn)死亡,但表現(xiàn)一過性精神沉郁。

表1 分離菌生化試驗(yàn)結(jié)果

2.4 血清學(xué)試驗(yàn) 從普通瓊脂平板上刮取分離菌B1制成108/m L的菌懸液,與2月后康復(fù)天鵝血清做玻板凝集反應(yīng),有明顯凝集現(xiàn)象發(fā)生,與3月齡鵝血清、未發(fā)病天鵝血清反應(yīng)陰性。

2.5 藥物敏感性試驗(yàn) 對(duì)4株分離菌的藥敏試驗(yàn)見表2,分離菌除對(duì)環(huán)丙沙星、氟哌酸、慶大霉素、丁胺卡那霉素敏感外,對(duì)其他大多數(shù)抗菌藥物都存在天然的廣譜耐藥性。

3 治療與預(yù)防

依據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果,采用敏感抗菌藥物飲水治療,同時(shí)用生石灰等對(duì)場(chǎng)地消毒,循環(huán)流水等進(jìn)行清理、凈化消毒處理。珍禽飼料中加入0.2%痢特靈全群飼喂,病禽隔離,并用50000 IU的丁胺卡那霉素注射治療,每天2次。用藥后3 d,全群死亡停止,逐步康復(fù)。

表2 分離株藥敏試驗(yàn)結(jié)果(抑菌圈直徑,mm)

應(yīng)用福爾馬林滅活的李氏桿菌、鏈球菌制備油乳劑滅活苗,注射相應(yīng)水禽,首免0.5～1.0 m L/只,間隔1月二免,每年5月再免疫1次,連續(xù)一年未見相關(guān)疾病的流行。

4 討論

依據(jù)多年的發(fā)病特點(diǎn),每年夏秋雨季多引發(fā)珍禽感染死亡。細(xì)菌分離鑒定及動(dòng)物試驗(yàn)表明,本次珍禽病的流行主要由單核細(xì)胞增生性李氏桿菌引起。鵜鶘的死亡可能與繼發(fā)化膿性鏈球菌有關(guān)。李氏桿菌廣泛存在于土壤、水、魚類、昆蟲、螺等溫血?jiǎng)游?可存在于動(dòng)物糞便、生殖道分泌物、鼻黏膜上,在多雨潮濕的夏秋季,由于動(dòng)物園珍禽生活的游戲水域,多種水禽混合飼養(yǎng),周邊土地潮濕,禽類糞便繁多,為多種細(xì)菌的繁殖創(chuàng)造了條件,易造成細(xì)菌病的流行發(fā)生。

從發(fā)病情況看,幾種水禽中,鵜鶘最為敏感,天鵝、綠頭鴨次之,鴨等其他水禽有一定抗力。分離李氏桿菌的致病性試驗(yàn)表明,小鼠、幼齡未成年鴨較為敏感,可用于毒理測(cè)定。但鏈球菌對(duì)不同動(dòng)物的致病力一般多具有宿主選擇性[1,5],鏈球菌分離自心包積液,因此,認(rèn)為該菌對(duì)鵜鶘有一定的致病性。

對(duì)珍禽李氏桿菌病的防治,主要要通過消毒,水域、環(huán)境的治理,同時(shí)可定期采用預(yù)防性抗菌藥物投服,條件許可的情況下,可制備自家滅活苗預(yù)防[3]。

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