繆界萍

銀屑病是一種由多基因遺傳決定的、多環(huán)境因素刺激誘導(dǎo)的免疫異常性慢性炎癥性和增生性皮膚病[1]。目前，關(guān)于本病的免疫發(fā)病的機制尚未完全清楚，我們檢測了尋常性銀屑病患者血液中T淋巴細(xì)胞亞群和腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量，進(jìn)一步探討T細(xì)胞免疫和TNF-α在尋常型銀屑病的發(fā)生及持續(xù)存在中的機制和臨床意義，為臨床的治療及療效觀察提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 對象

尋常型銀屑病患者組 50例，均為2006年5月至2007年4月江蘇省中醫(yī)院皮膚科經(jīng)門診確診病例，男性 26例，女性24 例，年齡 19～64歲。正常對照組32例，年齡 24～63 歲，男性16例，女性 16例。均為江蘇省中醫(yī)院健康體檢者，無心、肝、腎等重要臟器疾患，無皮膚病及自身免疫性疾病，無免疫制劑應(yīng)用史。

1.2 檢測方法

1.2.1 T淋巴細(xì)胞亞群

美國Becton Dickinson公司 FACScalibur 流式細(xì)胞儀，采用美國Becton Dickinson公司Simultest IMK-Lymphocyte試劑盒，試劑盒中的雙色熒光抗體均是FITC和PE標(biāo)記的鼠抗人單克隆抗體，catalog No.340182。取腫瘤患者的外周靜脈血，肝素抗凝，采用BD公司生產(chǎn)的Smultest IMK-Lymphocyte雙色直標(biāo)的免疫熒光試劑盒，按試劑盒操作說明進(jìn)行染色，使用BD公司提供的質(zhì)控微球調(diào)校流式細(xì)胞儀使其分辨率達(dá)到最佳工作狀態(tài)。采用BD公司的SimulSET自動軟件進(jìn)行T淋巴細(xì)胞亞群測定和分析，計數(shù)成熟的T淋巴細(xì)胞亞群所占的百分率，T淋巴細(xì)胞（CD3+）、T輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞亞群T抑制/毒性細(xì)胞亞群同時還可以得到T輔助細(xì)胞/T抑制細(xì)胞的比值

1.2.2 TNF-α血清含量測定

由上海森雄生物技術(shù)有限公司提供，采用ELISA操作方法，均按試劑盒說明要求進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計方法

表1 尋常性銀屑病患者和對照組外周血T淋巴細(xì)胞亞群測定結(jié)果（±s）

表1 尋常性銀屑病患者和對照組外周血T淋巴細(xì)胞亞群測定結(jié)果（±s）

銀屑病組與正常對照組比較，**P＜0.01，*P＜0.05

組 別 n CD3+(%) CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+銀屑病組 50 64.92±9.81 34.44±6.33** 27.74.±6.74 1.32±0.49*正常對照組 32 65.97±5.44 38.00.±4.96 25.81±4.87 1.54±0.41

2 結(jié) 果

2.1 尋常型銀屑病患者和對照組外周血 T淋巴細(xì)胞亞群測定結(jié)果 銀屑病組的比值均低于對照組，有顯著性差異，分別為P＜0.01和P＜0.05。銀屑病組的CD8+（%）結(jié)果較對照組略有增高，但無顯著性差異，見表1。

2.2 尋常型銀屑病患者和正常對照組TNF-α 測定結(jié)果

尋常型銀屑病組的TNF-α結(jié)果顯著高于對照組，有顯著性差異（P＜0.01），見表2。

表2 尋常型銀屑病患者和正常對照組TNF-α結(jié)果（±s）

表2 尋常型銀屑病患者和正常對照組TNF-α結(jié)果（±s）

銀屑病組與正常對照組比較，**P＜0.01

組 別 n TNF-α(pg/mL)銀屑病組 50 40.26 ±32.56**對照組 32 24.35 ±12..85

3 討 論

銀屑病的病因和發(fā)病機制至今尚不清楚，近年來的研究認(rèn)為銀屑病是多基因遺傳背景下的T細(xì)胞免疫功能異常的疾病。T細(xì)胞免疫功能異常是銀屑病的一個重要的因素，T-淋巴細(xì)胞是機體免疫系統(tǒng)中主要的調(diào)節(jié)及效應(yīng)細(xì)胞，可通過對抗原的識別、處理、遞呈引起多種細(xì)胞因子同多種細(xì)胞之間的網(wǎng)絡(luò)聯(lián)系，構(gòu)成維持免疫功能的生理狀態(tài)平衡。T淋巴細(xì)胞是銀屑病發(fā)病過程中的主要效應(yīng)細(xì)胞，激活的T淋巴細(xì)胞及多種炎癥細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子等在發(fā)病過程中起重要作用。在我們的實驗結(jié)果中顯示，尋常型銀屑病患者外周血細(xì)胞所占的百分率和比值顯著低于對照組，提示T淋巴細(xì)胞免疫功能發(fā)生紊亂，T淋巴細(xì)胞確實參與了銀屑病的發(fā)生和發(fā)展過程?，F(xiàn)在普遍的觀點認(rèn)為：銀屑病的發(fā)病機制與細(xì)胞免疫，尤其是與T細(xì)胞密切相關(guān)，異常的T細(xì)胞功能導(dǎo)致繼發(fā)性的表皮KC（角質(zhì)形成細(xì)胞）過度增生[2]。Kastelan等[3]認(rèn)為，具有特殊活性的細(xì)胞在皮膚局部聚集，同時分泌細(xì)胞因子，產(chǎn)生一個I型細(xì)胞因子環(huán)境，為CD8+T細(xì)胞進(jìn)一步活化提供了基礎(chǔ)。細(xì)胞的活化提供最終觸發(fā)了銀屑病復(fù)雜的級聯(lián)應(yīng)，銀屑病的發(fā)生、發(fā)展過程是細(xì)胞，特別是Th1型細(xì)胞、I型細(xì)胞毒性T細(xì)胞與KC之間交互作用的過程，表明T細(xì)胞在銀屑病皮損的發(fā)生，發(fā)展及維持中起著關(guān)鍵性作用。

尋常型銀屑病在以T淋巴細(xì)胞為主的作用中又涉及了一系列復(fù)雜的細(xì)胞因子反應(yīng)，共同參與了銀屑病的發(fā)生，我們的實驗結(jié)果表明尋常型銀屑病患者血清中TNF-α的水平明顯高于正常人（P＜0.01），說明在尋常型銀屑病患者的疾病過程中，其血清中TNF-α確實存在高于正常人水平的TNF-α，其結(jié)果與Chodorowska[4]報道結(jié)果一致。馮崢等[5]應(yīng)用雙抗體夾心ELISA方法及免疫組織化學(xué)檢查檢測16例尋常型銀屑病患者及10例正常人血清中TNF-α濃度和皮膚標(biāo)本中TNF-α及其受體的分布。TNF-α水平在尋常型銀屑病患者血清及皮膚組織中均高于正常人。TNF-α是由單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的具有廣泛生物活性的多肽調(diào)節(jié)因子，除了有殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)活性外，還有促炎癥作用和免疫調(diào)節(jié)作用，與機體的炎癥免疫有著十分密切的關(guān)系。TNF-α是-種與銀屑病免疫炎性反應(yīng)密切相關(guān)的細(xì)胞因子，不僅能夠誘導(dǎo)皮膚內(nèi)粘附分子的表達(dá)，促進(jìn)淋巴細(xì)胞的浸潤，加速朗格罕細(xì)胞的成熟，增強其活化T細(xì)胞的能力，而且還能夠促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖[6]。TNF-α可促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞增生，其機制為TNF-α可增加角質(zhì)形成細(xì)胞TNF-α受體結(jié)合而促進(jìn)增生，同時TNF也是重要的促炎性細(xì)胞因子，促進(jìn)皮損的炎癥形成[7]。TNF-α作為促炎性因子，在銀屑病的發(fā)生、發(fā)展中起到重要的作用[8,9]。因此，銀屑病是T細(xì)胞免疫功能紊亂和細(xì)胞因子的表達(dá)異常可能是銀屑病發(fā)病的主要環(huán)節(jié)，免疫活性細(xì)胞和TNF-α等細(xì)胞因子通過免疫-炎癥網(wǎng)絡(luò)形式的相互作用而共同參與銀屑病的致病過程并在銀屑病的發(fā)生，發(fā)展及維持中起著重要的作用。檢測尋常型銀屑病患者外周血中的T淋細(xì)胞亞群和TNF-α對銀屑病的治療和疾病發(fā)展的機制探討都有重要的參考價值，同時為進(jìn)一步研發(fā)銀屑病藥物治療提供實驗依據(jù)。

雖然T淋巴細(xì)胞和TNF-α在銀屑病的發(fā)病機制中占有非常重要的地位，這些因素可能是整個機體防御系統(tǒng)對致病因素反應(yīng)的一部分，銀屑病的免疫發(fā)病機制中的許多細(xì)節(jié)尚未闡明，還在不同程度上受到許多包括遺傳在內(nèi)的各種其它因素的影響，需要我們從分子水平對環(huán)境因素和遺傳因素等各個角度對這一疾病有更進(jìn)一步研究，相信隨著研究的深入，將會發(fā)掘出更好的治療策略。

[1]鄭敏.銀屑病發(fā)病機制研究中若干問題的思考[J].中華皮膚科雜志,2006,39(3):121-123.

[2]鄭敏.銀屑病是細(xì)胞免疫介導(dǎo)性疾病?[J].中華皮膚病科雜志,2002,35(2):85-87.

[3]Kastelan M,Massari LP,Pasic A,et al. New trends in the immunopathogenesis of psoriasis[J].Acta Dermatovenerol Croat,2004,12(1):26-29.

[4]Chodorowska G.Plasma concentrations of IFN-r and TNF-α in psoriatic patients before and after Local treatment with dithranol ointment [J].J Eur Acad Der matol Venereol,1998,10(2):147-151.

[5]馮崢,葛萍,李恒進(jìn),等.銀屑病患者血清TNF2α濃度及其在皮損中的表達(dá)研究[J].軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報,2005,26 (2):81-83.

[6]Schopf RE,Aust H,Knop J. Treatment of psoriasis with the chimeric monoclonal antibody against tumor necrosis factor alpha, infliaimab[J]. J Am acad Dermatok,2002,46(6):886-891.

[7]楊志波,向亞萍,歐陽恒.銀屑病患者口服竹黃顆粒劑前后血清白介素-6和腫瘤壞死因子-α的水平的比較[J]. 中華皮膚科雜志,2002,33(6):423.

[8]Gisondi P,Gubinelli E,Cocuroccia B,et al. Targeting Tumor Necrosis Factor- alpha in the Therapyof Psoriasis[J]. CurrDrug Targets Inflamm Allergy,2004,3 (2 ):175-183.

[9]Schottelius AJ,Moldawer LL,Dinarello CA,et al. Biology of tumor necrosis factor- alpha - implications for psoriasis[J]. Exp Dermato l,2004,13(4):193-222.