解江純，劉志東，田 慧，王 穎

（天津中醫(yī)藥大學(xué)現(xiàn)代中藥發(fā)現(xiàn)與制劑技術(shù)教育部工程研究中心，天津 300193）

芍藥苷（Paeoniflorn）為黃酮類化合物，是白芍和赤芍的主要活性成分之一。具有保肝、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等作用。近年來，學(xué)者們對芍藥苷的藥理活性進行越來越多的研究。研究表明，芍藥苷具有抗凝、抗動脈粥樣硬化、抗血栓、抗心肌或腦組織損傷等廣泛藥理作用[1-6]。根據(jù)芍藥苷的性質(zhì)，本文設(shè)計并考察其在不同磷酸鹽緩沖液（PBS）及不同溫度條件下的穩(wěn)定性，從而為藥材的提取及制劑的研究提供參考依據(jù)。

1 儀器與試藥

SHIMADZU高效液相色譜儀（日本島津），SPD-10A VP UV-VIS檢測器，LC-10AT輸液泵；PHS-3C精密pH計（上海雷磁儀器廠）；DKB-50A型超級恒溫水槽（上海精宏試驗設(shè)備有限公司）。

芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110736-200933[T1]）；芍藥苷提取物（南京澤朗醫(yī)藥有限公司，含量>90%）；甲醇（色譜純，天津康科德科技有限公司）；其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 分析方法的確定

2.1.1 色譜條件 Diamonsil C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5.0 μm）；流動相：甲醇-0.1%磷酸水溶液（40∶60）；檢測波長：230nm；柱溫：30℃；流速：1mL/min；進樣量 20 μL。

2.1.2 標準曲線的繪制 取芍藥苷對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解，分別移取不同量至10 mL量瓶中，配制成濃度為 0.55、1.1、3.3、5.5、8.8、11.0 mg/L系列對照品溶液。照2.1.1項下的色譜條件進行測定，記錄峰面積，以峰面積（A）對濃度（C）進行線性回歸。線性方程為A=39485 C-6228.3，r=0.9999，線性范圍0.55～11.0 mg/L。

2.1.3 精密度實驗 按上述操作方法，配制1.1、5.5、8.8 mg/L 3個濃度的芍藥苷對照品溶液，于1 d內(nèi)重復(fù)測定5次，計算日內(nèi)精密度；每日測定1次，連續(xù)測定5 d，計算日間精密度。低、中、高3個濃度的日內(nèi)精密度峰面積的相對均數(shù)標準差（RSD）分別為 1.4%、1.8%、0.7%，日間精密度 RSD分別為3.4%、3.2%、2.8%。

2.2 芍藥苷穩(wěn)定性研究

2.2.1 溫度對芍藥苷固體粉末的影響 稱取芍藥苷樣品適量，放入安瓿中，分別于（50±1）℃，（60±1）℃，（70±1）℃，（80±1）℃條件下加熱，并于 0，1，2，3，4，6，8 h取樣，將樣品溶于甲醇中定容至50 mL。將樣品稀釋10倍，進高效液相色譜（HPLC）進行測定，結(jié)果表明溫度對芍藥苷固體沒有影響，結(jié)果見表1。

表1 不同溫度條件下芍藥苷的相對含量Tab.1 The relative content of Paeoniflorin in different temperature%

2.2.2 pH值及溫度對芍藥苷降解速率的影響 稱取芍藥苷樣品適量，分別用pH2.0，5.0，8.0，9.0的PBS緩沖液及水溶解，取適量溶液置于三角瓶中，密封，于（50±1）℃，（60±1）℃，（70±1）℃，（80±1）℃恒溫水浴中，并分別于 0，1，2，3，4，6，8 h 取樣，每次取樣2 mL，過0.45 μm濾膜，進HPLC測定各時間點的溶液濃度（Ct），結(jié)果見下圖。結(jié)果表明，芍藥苷在酸性條件下穩(wěn)定性良好，對堿性環(huán)境敏感，在水溶液中已有微弱降解，隨pH值增加，降解越來越嚴重。

3 討論

在實驗過程中，發(fā)現(xiàn)芍藥苷在PBS=8.0和PBS=9.0溶液中，不同溫度條件下水解產(chǎn)生不同的降解產(chǎn)物，目前尚未見此方面報道，具體化合物結(jié)構(gòu)需進行深入研究。

芍藥苷對堿性環(huán)境和溫度非常敏感，所以在提取過程中應(yīng)注意避免在堿性的條件下進行。另外由于芍藥苷在堿性環(huán)境下不穩(wěn)定，在制劑中應(yīng)注意劑型的選擇。

[1] 劉 超，王 靜，楊 軍，等.赤芍總苷活血化瘀作用的研究[J].中藥材，2000，23（9）：557-560.

[2] 孫大軍，祁功才，呂文偉，等.赤芍總苷對實驗性血栓形成的影響及其作用機制[J].中國老年學(xué)雜志，2006,26（8）:1080-1081.

[3] 黃海霞，莫曉霞，耿 濤，等.赤芍總苷對培養(yǎng)乳鼠心肌細胞損傷的保護作用[J].生命科學(xué)研究，2005，9（2）：177-180.

[4] 楊 軍，王 靜，劉 超，等.赤芍總苷對實驗性腦缺血的保護作用[J].中藥材，2001，24（2）：124-125.

[5] 陳廣斌，吳 鐵，林堅濤，等.芍藥苷對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷中腦細胞調(diào)亡的影響[J].華西藥學(xué)雜志，2009，24（4）：354-356.

[6] 林桂平，向秋玲，陳健文，等.芍藥苷對腦缺血損傷的保護作用及其對腦血管通透性的影響[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2009，9（2）：151-154.