王海峰, 邱芳萍

(長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,吉林長(zhǎng)春 130012)

0 引 言

甘草是臨床最常應(yīng)用的藥品。生甘草能清熱解毒,潤(rùn)肺止咳,調(diào)和諸藥性;炙甘草能補(bǔ)脾益氣,臨床用量特大,出口量大。除藥用之外,食品上也大量用甘草做糕點(diǎn)添加劑,它的甜度是蔗糖的百倍。甘草的主要有效成分為甘草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(glycyrrhetinic acid)等三萜類(lèi)化合物、甘草黃酮類(lèi)化合物以及甘草多糖等[1-2]。文獻(xiàn)[3]研究表明,甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤的作用,還用于防治病毒性肝炎、癌癥以及艾滋病等。近年來(lái),甘草藥材由于遭到過(guò)度采挖,資源急劇減少,保護(hù)甘草資源已迫在眉睫。國(guó)內(nèi)多采用水回流法,該法存在用水量大、耗時(shí)長(zhǎng)、甘草酸收率低、雜質(zhì)多等弊端,也不同程度地造成資源的浪費(fèi)。為此,文中對(duì)甘草酸的氨性醇提法進(jìn)行了優(yōu)化,以期對(duì)實(shí)驗(yàn)研究和生產(chǎn)實(shí)踐有所幫助[4]。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 材料與試劑

甘草,河北安國(guó)中藥材市場(chǎng)。

無(wú)水乙醇、氨水等,均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

DK-98-I電子恒溫水浴鍋,天津泰斯特儀器有限公司;

T687鼓風(fēng)干燥箱,天津泰斯特儀器有限公司;

萬(wàn)能粉碎機(jī),常州品正干燥設(shè)備有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 氨性醇提取法

準(zhǔn)確稱(chēng)取甘草粉末5 g于錐形瓶中,加入適量的氨性乙醇溶液,加熱到一定溫度,保持一段時(shí)間,冷卻后抽濾,得濾液,冷凍干燥得粗甘草酸。

2.2 甘草酸提取工藝的優(yōu)化

試驗(yàn)是對(duì)提取時(shí)間、溫度、氨水濃度、乙醇濃度等影響提取效果因素的單因素實(shí)驗(yàn),各單因素初始固定條件是:提取時(shí)間為4.5 h,溫度為60℃,乙醇濃度為10%,氨水濃度為0.5%。根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,運(yùn)用根據(jù)DPS的正交回歸組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,進(jìn)行響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)。

3 結(jié)果與分析

3.1 氨性醇提取法單因素實(shí)驗(yàn)

3.1.1 時(shí)間對(duì)甘草酸提取率的影響

設(shè)定溫度為60℃,氨水濃度為0.5%,乙醇濃度為10%,改變提取時(shí)間,得出提取時(shí)間對(duì)甘草酸提取率的影響,結(jié)果如圖1所示。

圖1 提取時(shí)間對(duì)甘草酸提取率的影響

圖1表明,隨時(shí)間的延長(zhǎng),甘草酸的提取率逐漸增加,當(dāng)提取時(shí)間達(dá)到6.5 h時(shí),提取率達(dá)到最高。

3.1.2 溫度對(duì)甘草酸提取率的影響

設(shè)定提取時(shí)間為4.5 h,氨水濃度為0.5%,乙醇濃度為10%,改變溫度,得出溫度對(duì)甘草酸提取率的影響,結(jié)果如圖2所示。

圖2 溫度對(duì)甘草酸提取率的影響

由圖2可知,溫度對(duì)甘草酸提取率的影響不大,隨著溫度的不斷升高,甘草酸的提取率逐漸增加,40℃時(shí)達(dá)到最大,此后,其提取率基本保持不變。

3.1.3 氨水濃度對(duì)甘草酸提取率的影響

設(shè)定時(shí)間為4.5 h,溫度為60℃,乙醇濃度為10%,改變氨水濃度,得出氨水濃度對(duì)甘草酸提取率的影響,結(jié)果如圖3所示。

圖3 氨水濃度對(duì)甘草酸提取率的影響

圖3表明,在氨水濃度達(dá)到0.5%時(shí),甘草酸提取率最高。

3.1.4 乙醇濃度對(duì)甘草酸提取率的影響

設(shè)定時(shí)間為4.5 h,溫度為60℃,氨水濃度為0.5%,改變乙醇濃度,得出乙醇濃度對(duì)甘草酸提取率的影響,結(jié)果如圖4所示。

圖4 乙醇濃度對(duì)甘草酸提取率的影響

圖4表明,在乙醇濃度為20%時(shí),提取率最高,隨著乙醇濃度的增加,提取率逐漸減少。

3.2 響應(yīng)面試驗(yàn)分析[5]

3.2.1 因素水平的選取

在氨性醇提法單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取時(shí)間、溫度、氨水濃度、乙醇濃度4個(gè)對(duì)甘草酸提取率效果顯著的因素進(jìn)行響應(yīng)面分析。試驗(yàn)因素與水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

表1 響應(yīng)面分析因素與水平表

3.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

以A,B,C,D為自變量,以甘草酸提取率為響應(yīng)面,試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 響應(yīng)面分析方案及實(shí)驗(yàn)結(jié)果

采用DPS9.50統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多元回歸擬合[6]?；貧w方差分析顯著性檢驗(yàn)表明,該模型的R2=0.994 2,表明該模型與實(shí)際試驗(yàn)擬合較好,自變量與響應(yīng)值線(xiàn)性關(guān)系顯著,可以用于甘草酸氨性醇提試驗(yàn)的理論預(yù)測(cè)。

由于各因素對(duì)甘草提取率的影響不是簡(jiǎn)單的線(xiàn)性關(guān)系,為了更明確各因素對(duì)響應(yīng)值Y采用DPS9.50統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)表1數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸分析,得到如下回歸方程:

利用DPS9.50軟件對(duì)表2數(shù)據(jù)進(jìn)行二次多元回歸擬合,所得到二次回歸方程的響應(yīng)面,如圖5～圖8所示。

從響應(yīng)面分析圖上可以找出最佳參數(shù)之間的相互作用。得出甘草酸提取率最佳工藝是:提取時(shí)間為5.84 h,提取溫度為40.28℃,氨水濃度為0.41%,乙醇濃度為16.78%。在此條件下提取率理論值最高達(dá)到66.40%。

圖5 提取時(shí)間與提取溫度對(duì)甘草酸提取率影響的響應(yīng)面

圖6 提取溫度與氨水濃度對(duì)甘草酸提取率影響的響應(yīng)面

圖7 氨水濃度與乙醇濃度對(duì)甘草酸提取率影響的響應(yīng)面

圖8 乙醇濃度與提取時(shí)間對(duì)甘草酸提取率影響的響應(yīng)面

4 討 論

甘草酸除應(yīng)用于醫(yī)藥外,它還被廣泛應(yīng)用于食品添加劑(如低熱值甜味劑)、化妝品、煙草、釀造、國(guó)防等行業(yè),被列為重要的精細(xì)化工產(chǎn)品[6-9]。為此,對(duì)甘草的深度開(kāi)發(fā)加工和綜合利用是一項(xiàng)值得重視的課題。將響應(yīng)面法應(yīng)用到甘草酸的提取工藝的研究,采用合理的試驗(yàn)設(shè)計(jì),依據(jù)回歸分析各工藝條件的影響因子,取得了比較好的結(jié)果。實(shí)際值與理論值相近,這表明利用響應(yīng)面分析法得到的提取工藝參數(shù)是真實(shí)可靠、具有實(shí)用價(jià)值的。根據(jù)響應(yīng)面法實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)得出最優(yōu)條件下提取率為66.40%。

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