湯麗霞,楊 光,禤潔甜,梁彩紅,林 蔚,陳華錦

(廣東省佛山市第一人民醫(yī)院臨床研究所 528000)

克氏綜合征(klinefelter syndrome,KS)是一種性染色體畸變引起的遺傳性男性不育疾病?；颊咻^正常男性多出至少一條X染色體,導(dǎo)致精小管發(fā)育不良,是遺傳性男性不育中最常見的原因。本文對(duì)染色體分析確診的22例成年KS患者和20例正常核型的成年男性不育患者進(jìn)行對(duì)照研究,尋找KS患者血清性激素水平在篩查診斷中的應(yīng)用規(guī)律。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2006年 1月至2009年8月本院泌尿外科門診男性不育患者,經(jīng)細(xì)胞遺傳學(xué)分析確診的KS患者22例為實(shí)驗(yàn)組;同時(shí)期染色體分析核型為46,XY男性不孕患者20例為對(duì)照組,年齡20～47歲。均于接受雄性激素替代治療前進(jìn)行精液檢查和血清性激素分析。

1.2 方法

1.2.1 染色體分析 拜迪公司外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基,新鮮外周血0.25 mL接種于5 L培養(yǎng)基,37℃、72 h培養(yǎng)。結(jié)束培養(yǎng)前加濃度為50μ g/mL的秋水仙素1～2小滴,常規(guī)制片和G顯帶染色,Leica CW4000 Karyo軟件進(jìn)行染色體核型分析,計(jì)數(shù)30～60個(gè)細(xì)胞,分析5個(gè)細(xì)胞核型。

1.2.2 化學(xué)發(fā)光免疫分析方法檢測(cè)性激素水平 ADVIA Centaur R全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀,Bayer HealthCare LLC生產(chǎn)血清促卵泡激素(FSH)、黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、睪酮(T)激素水平檢測(cè)試劑盒。新鮮血清標(biāo)本檢測(cè)。正常參考值系由試劑盒生產(chǎn)商提供。

1.2.3 精液常規(guī)分析 精液采集、運(yùn)送、顯微鏡檢查和計(jì)算機(jī)輔助精子分析方法符合WHO(1999)規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室和檢查標(biāo)準(zhǔn)。無(wú)精或少精判斷標(biāo)準(zhǔn):兩次精液檢查(3 000 r/min,離心10 min后鏡檢)均未發(fā)現(xiàn)精子,或正常精子計(jì)數(shù)小于15%。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用χ2檢驗(yàn)方法四格表專用公式對(duì)實(shí)驗(yàn)診斷進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2 結(jié) 果

2.1 染色體分析 實(shí)驗(yàn)組患者22例,染色體分析核型為47,XXY的患者21例,核型為48,XXYY患者1例。對(duì)照組為同時(shí)期臨床診斷男性不育的患者,其核型均為46,XY。

2.2 性激素檢測(cè) KS患者血清FSH和LH分別升高超過(guò)正常值上限的 6和3倍。SFH和 LH同步升高的病例數(shù)為100%。血清 T平均濃度降低,T降低病例數(shù)為18例(81.8%),T正常病例數(shù)占18.2%。血清E2平均濃度在正常范圍,但有42.9%的病例顯示血清E2濃度的異常增高或降低,見表1。對(duì)照組血清性激素水平除E2平均濃度輕微增高外,其余各項(xiàng)的平均值均在正常范圍。血清E2異常例數(shù)為11例(55%),LH和 T異常病例數(shù)各為 2例(10%),僅有 1例表現(xiàn)FSH和 LH同時(shí)增高,見表 1。

表1 兩組患者血清性激素水平及其異常率比較

2.3 精液分析 實(shí)驗(yàn)組精液分析均為無(wú)精,對(duì)照組精液分析16例精子計(jì)數(shù)小于15%,4例精子計(jì)數(shù)大于或等于15%。精子計(jì)數(shù)異常比率為75%。

2.4 FSH及LH在KS患者診斷中的敏感性及特異性 FSH單項(xiàng)增高診斷試驗(yàn)評(píng)價(jià)敏感性為100%,特異性75%;LH單項(xiàng)增高診斷評(píng)價(jià)敏感性100%,特異性90%。FSH和LH兩項(xiàng)序列實(shí)驗(yàn)診斷評(píng)價(jià)敏感性100%,特異性97.5%。

3 討 論

KS是人類常見的性染色體異常,也是最常見的引起男性不育的遺傳學(xué)原因。KS男性核型中X染色體均超出1條以上,可表現(xiàn)多種染色體核型,如:47,XXY或48,XXYY或48,XXXY以及嵌合型46,XY/47,XXY或46,XX/47,XXY等。有研究報(bào)道核型為47,XXY在新生兒中患病率大約為1/500～1/600[1-2]。核型為48,XXYY或48,XXXY核型在新生兒中占1/17 000～1/50 000[3]。本研究中實(shí)驗(yàn)組患者22例,21例47,XXY核型,1例48,XXYY核型。47,XXY核型的KS明顯高于其他核型的KS患病率。本研究中未涉及到嵌合型KS,嵌合型KS患者的血清性激素變化規(guī)律與嵌合的比例關(guān)系有待研究。

成年KS患者以促性腺激素分泌過(guò)多,性腺功能不全為主要特征。本研究中FSH和LH平均血清濃度分別高出正常值上限的6倍和3倍。實(shí)驗(yàn)組患者血清FSH、LH同時(shí)升高的例數(shù)占100%(22/22)。對(duì)照組血清FSH、LH兩項(xiàng)同時(shí)升高例數(shù)占5%(1/20)。如果以血清FSH、LH兩項(xiàng)指標(biāo)同時(shí)升高作為KS篩查的序列實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià),其特異性可達(dá)97.5%,敏感性可達(dá)100%?？梢娧錐SH、LH兩個(gè)指標(biāo)同時(shí)升高用于成年KS的篩查具有高度特異性和敏感性。

KS發(fā)病與母親年齡沒(méi)有顯著性相關(guān),KS新生兒表型通常顯示正常,因而產(chǎn)前篩查和診斷中KS很少被查出[4]。兒童時(shí)期KS患者缺乏特有癥狀,大約少于1/10的KS患者在青春期前被診斷[5]。低的診斷率與缺乏快速簡(jiǎn)便可以普遍應(yīng)用的篩查診斷方法有關(guān)。根據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道自青春中期(12.5～13歲)開始血清FSH和LH可表現(xiàn)同時(shí)高出正常值范圍[5-7],提示在青春中期以后的青少年中以FSH和LH兩項(xiàng)同時(shí)升高作為篩查KS患者指標(biāo),結(jié)合細(xì)胞遺傳學(xué)分析可能會(huì)提高青春期KS患者的診斷率,以改善目前KS主要在成年期被診斷,而延誤青春期激素替代治療時(shí)機(jī)的現(xiàn)狀。青春期雄性激素替代療法雖然不一定解決男性不育的問(wèn)題,但對(duì)改善由于男性激素缺乏引起的男性生理和心理發(fā)育上的癥狀有效[8-10]。血清FSH和LH組合篩查青春期中期后的KS患者的特異性和敏感性還需進(jìn)一步的評(píng)價(jià)。

性成熟和生殖功能依賴于下丘腦垂體和性腺激素的精密調(diào)節(jié)。垂體分泌的促性腺激素刺激男性睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌睪酮,而促性腺激素的釋放受下丘腦促性腺激素釋放激素的正反饋控制和血清睪酮水平的負(fù)反饋調(diào)節(jié)。本研究中81.8%(18/22)KS患者血清睪酮降低,18.2%(4/22)的KS患者血清睪酮在正常水平,血清睪酮在正常水平的KS患者的血清FSH和LH依然增高。因此,還不能單純認(rèn)為睪酮水平降低是克氏綜合征促性腺激素超常增高的原因[9]。KS患者性腺機(jī)能減退及精小管發(fā)育異常的分子機(jī)理還有待進(jìn)一步的研究。

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