趙荷劍 李郭飛 郭 亞 王朝輝 崔 蓓 賀維亞 魯廣秀 劉 森 劉大建

河南大學淮河醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 開封 475000

輕度認知損害(mild cognitive impairment,MCI)是介于正常衰老和癡呆之間的一種認知功能損害狀態(tài)。Johnson等報道,40%的 MCI患者 2年后可進展為 Alzheimer病(AD)[1];McKelvey等報道,53%的MCI患者3年后可發(fā)展為AD[2];相同年齡的正常個體每年發(fā)生AD的概率為1%～2%。鑒于此,許多學者認為,MCI是AD的極早期階段。已有研究證實AD、MCI患者和正常對照健康人的腦脊液Tau蛋白和Aβ水平有顯著差異,腦脊液中Tau蛋白和Aβ的濃度水平變化可以作為 MCI及 AD的診斷依據(jù),本研究對MCI患者和MCI患者的腦脊液 Tau蛋白和Aβ水平進行了比較,以期探討和驗證Tau蛋白和 Aβ 1-42在MCI和AD的診斷及鑒別診斷中的臨床應(yīng)用價值和意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象 MCI病例的納入標準:(1)僅有記憶缺陷,沒有其他認知障礙等癥狀;(2)經(jīng)神經(jīng)心理測試證實存在記憶損害;(3)患者日常生活能力正常;(4)根據(jù)美國統(tǒng)計診斷手冊第4版修訂本(DSM-IV)標準確診為非癡呆患者;(5)簡易智能狀態(tài)檢查量表(MMSE)≥27分;(6)MCI和對照組的患者無發(fā)熱癥狀和感染發(fā)生;(7)MCI患者和對照組的紅細胞沉降率均在正常范圍內(nèi);(8)所有患者均沒有伴發(fā)惡性腫瘤;(9)M CI患者和對照組均無自身免疫異常等相關(guān)疾病,且沒有接受過免疫抑制治療。根據(jù)以上納入標準,本研究共篩選納入MCI患者32例,其中男17例,女 15例,年齡51～ 84歲,平均(65±12.5)歲。

AD病例入組標準:(1)符合美國國立神經(jīng)病、語言障礙和腦卒中研究所-老年性癡呆及相關(guān)性疾病協(xié)會的“很可能AD”的診斷標準;(2)簡易智能狀態(tài)檢查量表(MMSE)評分＜24分;(3)Hachinski缺血指數(shù)量表評分＜4分;(4)根據(jù)臨床表現(xiàn),詳細的神經(jīng)、精神檢查,經(jīng)頭顱CT或MRI檢查和相關(guān)的實驗室檢查排除其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)以及其他系統(tǒng)和物質(zhì)原因等所致癡呆患者。據(jù)此標準,納入AD患者30例,其中男16例,女14例,年齡 51～86歲,平均(67±12.1)歲。

本研究以無中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、無癡呆的非神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者作為正常對照組,據(jù)此選擇接受硬膜外麻醉的手術(shù)患者31例非神經(jīng)系統(tǒng)疾病病人,男 17例,女 14例,年齡50～83歲,平均(66±11.8)歲。所有研究對象均自愿加入本研究,并簽署了知情同意書。

1.2 材料與方法 對納入的研究對象行腰椎穿刺術(shù),分別抽取腦脊液(CSF)2 ml,標記后置于-70℃冰箱中凍存?zhèn)溆?。同時采用MMSE、CDR和Hachinski等評分量表對研究對象的神經(jīng)認知及精神狀況進行評定。CSF中tau蛋白和Aβ1-42的檢測采用雙抗夾心ELISA試劑盒(Innogenetics公司)測定CSF中 tau蛋白和Aβ1-42的水平。采用DG5032型酶標儀(南京華東電子集團)檢測吸光度,操作的具體程序參考試劑盒說明書。根據(jù)標準管濃度及吸光度建立標準曲線,并根據(jù)各孔的吸光度計算tau蛋白和Aβ1-42蛋白的濃度。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析處理。多組均數(shù)的比較采用單因素方差分析,均數(shù)的兩兩比較采用最小顯著差法(LSD),顯著性水準取α=0.05。

2 結(jié)果

3組的CSF檢測結(jié)果見表1。與對照組比較,M CI和AD患者腦脊液Tau蛋白水平明顯升高,Aβ-42水平明顯下降(均 P＜0.01)

表1 3組腦脊液 Tau蛋白及Aβ1-42水平

3 討論

AD是一組原因未明的原發(fā)性腦變性疾病,常起病于老年或老年前期、多緩慢發(fā)病,逐漸進展,以癡呆為主要表現(xiàn)。一般認為,年齡每增加5年,患病率將增加1倍。隨著病情的逐漸加重,將會對患者的生活和學習等產(chǎn)生嚴重影響。而當前對該疾病的診斷通常根據(jù)病史和病人所出現(xiàn)的癥狀,評估患者的神經(jīng)和精神狀況,在排除了其他可引起類似癥狀的疾病后方可作出診斷,具有諸多影響因素和診斷的不確定性。

AD的重要病理特征是老年斑和神經(jīng)元纖維纏結(jié),老年斑的主要組織成分是Aβ,神經(jīng)元纖維纏結(jié)的主要原因是tau蛋白的過度磷酸化[3]。許多學者將Tau蛋白和Aβ的腦脊液水平異常作為AD診斷的分子標志物。Dubois等認為有記憶缺失等癥狀的MCI是AD發(fā)展的極早期階段,是介于正常和AD之間的一種認知功能損害狀態(tài),而研究表明在AD的臨床前期腦內(nèi)已經(jīng)出現(xiàn)老年斑和神經(jīng)元纖維纏結(jié)發(fā)生[4],有學者通過檢測MCI患者腦內(nèi)Tau蛋白和Aβ水平,認為Tau蛋白和Aβ1-42亦可作為MCI診斷的分子標志物。檢測這些分子的水平可能有助于MCI的診斷。

胡元元等報道,AD組腦脊液Tau蛋白及其磷酸化水平均顯著高于血管性癡呆和非癡呆性神經(jīng)系統(tǒng)疾病及正常對照[5],本研究的正常對照組的結(jié)果與胡氏等研究結(jié)果較為接近,而在MCI組Tau蛋白水平較胡氏AD組低,雖然Mesulam等證實,膽堿能神經(jīng)元從衰老到MCI最終發(fā)展為AD這一過程中,Tau蛋白在免疫病理學方面均存在相應(yīng)的變化[6],提示 Tau蛋白在MCI的進展過程中發(fā)揮重要作用,但在MCI與AD組之間Tau蛋白水平無統(tǒng)計學差異。

萬毅等[7]的研究報道表明,AD組的 Aβ1-42的水平明顯低于對照組。本研究所測得正常對照組結(jié)果與萬氏的正常組結(jié)果近似,而MCI組Aβ1-42的水平高于萬氏 AD組Aβ1-42的水平,雖然Kanai等證實,隨著 AD的加重 Aβ1-42腦脊液濃度下降,認為AD患者Aβ1-42腦脊液水平下降可能與神經(jīng)元死亡或Aβ1-42的清除障礙有關(guān)[8],說明 Aβ1-42的水平隨著疾病的進展?jié)舛冉档?但未顯示 MCI與AD間Aβ1-42水平有顯著差異。

我們的實驗結(jié)果表明,腦脊液 Tau蛋白和Aβ1-42的水平在MCI階段已經(jīng)有明顯的變化,但與AD發(fā)展階段無統(tǒng)計學關(guān)聯(lián),Tau蛋白和Aβ1-42的水平不能作為區(qū)分MCI與AD的鑒別診斷指標,仍需結(jié)合臨床及其他檢測結(jié)果。

[1]Johnson KA,Jones K,Holman BL.Preclinical prediction of Alzheimer's disease using SPECT[J].Neurology,1998,50:1563-1572.

[2]M cKelvey R,Bergman H,Stern J.Lack of prognostic significance of SPECT abnormalities in elderly subjects with a mild memo ry loss[J].Can J Neurol Sci,1999,26:23-28.

[3]王建枝,魏澤蘭,王群,等.τ蛋白磷酸化位點與其促微管組裝及與微管結(jié)合活性的體外分析[J].中國醫(yī)學科學院學報,2000,22:120-123.

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[5]胡元元,何善述,王建枝.腦脊液 tau蛋白含量測定對阿爾茨海默病的診斷價值[J].中華醫(yī)學雜志,2001,81(22):1377-1379.

[6]Mesulam M,Shaw P,Mash D,et al.Cholinergic nucleus basalis tauopathy emerges early in the aging-MCI-AD continuum[J].A nn Neurol,2004,55(6):815-828.

[7]萬毅,金丸和富,山之內(nèi)博.同時測定腦脊液中Tau蛋白和Aβ1-42含量對診斷阿爾茨海默病的意義[J].中國神經(jīng)科學雜志,2003,19(1):41-44.

[8]Kanai M,Matsubara E,Isoe K,et al.Longitudinal study of cere-brospinal fluid levels of tau,Aβ1-40,and Aβ1-42 in Alzheimer's disease:A study in Japan[J].Ann Neurol,1998,44:17.