何蘇琴， 白 濱

（1.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，蘭州 730070； 2.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜草與綠色農(nóng)業(yè)研究所，蘭州 730070）

2005年夏季，在甘肅省中部的半干旱種植區(qū)的一塊甜瓜品種試驗(yàn)田中，一些甜瓜植株在收獲前2周突然凋萎，植株逐漸黃化，葉片焦枯（圖1a、b）。來自臺灣的甜瓜品種‘臺農(nóng)2號’病株率達(dá)到50%。剖開病株的維管束，未見任何異常，病株根部可見主根和側(cè)根上有不連續(xù)的褐色壞疽斑，常規(guī)組織分離得到3株生長速度快的高溫型子囊菌，對其中的2個(gè)菌株進(jìn)行了形態(tài)特征、生物學(xué)特性及致病性研究，根據(jù)其形態(tài)特征和致病性，進(jìn)行病原菌的種類鑒定，結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

2005年7月分離自甜瓜病根，編號TG－1、TG－2。

1.2 形態(tài)學(xué)研究

將菌株 TG－1、TG－2接種于PDA平板中央，25～30℃培養(yǎng)，每天觀察，直至產(chǎn)生成熟的子囊殼。在光學(xué)顯微鏡下測量子囊殼和子囊孢子大小，每種結(jié)構(gòu)測量50個(gè)。

1.3 菌絲適宜生長溫度測定

將在25℃培養(yǎng)4 d的菌株剁取直徑5 mm的菌絲塊，接種于PDA平板中央，5～45℃培養(yǎng)，每5℃為一梯度，培養(yǎng)3 d后測量菌落直徑。每處理重復(fù)3次。

1.4 致病性測定

將菌株TG－1、TG－2接種于PDA平板中央，25～30℃培養(yǎng)4～5 d，剁成直徑5 mm的菌絲塊；甜瓜（品種：‘86－1’）、西瓜（品種：‘金鳳’）種子各100粒，55℃溫湯浸種后，置30℃溫箱催芽，約24 h后，挑選胚根長約5 mm的發(fā)芽種子移入直徑9 cm的含水濾紙培養(yǎng)皿內(nèi)，在胚根上貼接直徑5 mm的菌絲塊。每皿放10粒種子，每處理2皿，以不接菌為對照；置30℃溫箱培養(yǎng)，48 h調(diào)查致病情況。

2 結(jié)果

2.1 菌落及子囊殼和子囊孢子形態(tài)

在PDA平板25～30℃培養(yǎng)，菌落初無色，漸呈淡褐或灰褐色，氣生菌絲白色，極稀疏或在菌落邊緣稍豐茂；培養(yǎng)約20 d，開始產(chǎn)生子囊殼，培養(yǎng)30～60 d子囊殼成熟；子囊殼均勻散生，菌落邊緣稍密集；子囊殼初白色（圖1c），成熟時(shí)黑色（圖1d），球形，316.8～594.0μm；每個(gè)子囊殼中可產(chǎn)生上百枚子囊，每個(gè)子囊中僅產(chǎn)生一個(gè)子囊孢子（圖1e），子囊壁易消解；子囊孢子球形或近球形，初無色或淡褐色，成熟時(shí)深褐色至黑色，28.6～44.8μm。

2.2 菌絲適宜生長溫度

菌株TG－1、TG－2的菌絲適宜生長溫度均為30℃，培養(yǎng)3 d菌落直徑分別為83.0 mm和87.5 mm；5℃和40～45℃為菌絲生長抑制溫度；45℃培養(yǎng)3 d后轉(zhuǎn)放至30℃，24 h后兩菌株均可恢復(fù)生長。兩菌株在PDA平板不同溫度下培養(yǎng)3 d菌落直徑見圖2。

2.3 致病性

菌株TG－1、TG－2對供試的甜瓜、西瓜均具有強(qiáng)的致病性。接種48 h，甜瓜、西瓜胚根被害率均為100%；受害胚根呈淡褐色至褐色（圖1f、g），胚根生長明顯受抑制。

3 結(jié)論及討論

3.1 病原菌種類鑒定

根據(jù)每個(gè)子囊內(nèi)僅產(chǎn)生一個(gè)子囊孢子的主要特征和對甜瓜及西瓜的致病性，將供試菌株TG－1、TG－2鑒定為MonosporascuscannonballusPollack＆Uecker。這是蔡竹固、童伯開報(bào)道［1］1994年該菌在臺灣的洋香瓜（cantaloupe melons）田發(fā)生，引起洋香瓜萎凋以來，該菌在我國大陸的首次報(bào)道。

病菌的干培養(yǎng)物和活菌株保存于甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所抗性鑒定研究室。

3.2 接種菌絲塊的菌齡對菌絲生長起始溫度及生長速度的影響

試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，接種菌絲塊的菌齡，對菌絲生長起始溫度及生長速度有較大影響。以20 d菌齡的培養(yǎng)物為接種菌絲塊時(shí)，培養(yǎng)3 d，菌株TG－1、TG－2的菌絲生長起始溫度均為20℃，在25、30、35℃下的菌落直徑分別為24.00、47.33、32.67 mm和26.33、41.33、28.00 mm，與以4 d菌齡的培養(yǎng)物為接種菌絲塊時(shí)菌絲生長起始溫度（10℃）和菌絲生長速度明顯不同。除不同菌株原本存在差異外，這有可能是造成不同作者報(bào)道的M.cannonballus菌株菌絲生長起始溫度及生長速度差異極大［2－5］的原因之一。

3.3 黑點(diǎn)根腐病對全球瓜類生產(chǎn)的影響

自1974年，Pollack ＆Uecker根據(jù)Troutman＆Matejka1970年從美國亞利桑那州的洋香瓜病株分離到的能夠造成側(cè)根腐敗的真菌建立了新屬和新種MonosporascuscannonballusPollack ＆Uecker以來，由Monosporascus引起的黑點(diǎn)根腐病在世界各地的西瓜、甜瓜種植區(qū)陸續(xù)發(fā)生，以色列、突尼斯、伊朗、印度、巴基斯坦、利比亞、墨西哥、美國西南部、西班牙南部、日本、沙特阿拉伯、中國臺灣、洪都拉斯、危地馬拉、巴西、埃及、意大利、韓國等近20個(gè)國家和地區(qū)相繼報(bào)道了該病的發(fā)生［5－13］。該病造成的損失率大約為10%～25%，個(gè)別田塊可達(dá)100%［5］。該病現(xiàn)在已成為全球瓜類生產(chǎn)中新興的重要病害。

在不同的地區(qū)，由Monosporascus引起的黑點(diǎn)根腐病被稱作倒秧（melon collapse）、突然枯萎（sudden wilt）、根腐（root rot）、敗藤（vine decline）及根腐和敗藤（root rot and vine decline），病害常發(fā)生在炎熱的、半干旱甜瓜種植區(qū)，尤其是鹽堿性地中［5，9］。

圖1 甜瓜黑點(diǎn)根腐病菌所致田間癥狀及病菌形態(tài)特征

圖2 TG－1、TG－2在PDA平板上培養(yǎng)3 d的菌落直徑

M.cannonballus繁殖能力強(qiáng)，寄主范圍和自然分布廣。一個(gè)成熟的洋香瓜根系可以產(chǎn)生大約40萬個(gè)子囊孢子，這些孢子落入0.03 m3的土中，相當(dāng)于每克土壤含有10個(gè)子囊孢子，而每克土壤含有2個(gè)子囊孢子便有可能給甜瓜生產(chǎn)造成威脅［14］。在人工接種下可以危害西瓜、胡瓜、越瓜、甜瓜、冬瓜、蒲瓜、絲瓜、南瓜及苦瓜等9種瓜類作物，對辣椒、甜椒、茄子、番茄等作物的幼苗亦有致病性，可抑制莖、根生長，且降低出土率［15］；可以在豆類、小麥、玉米、高粱和甜菜根上定殖，并減少小麥和玉米的地上部干重［16］。在巴西，從種植不同作物和未墾殖的荒地共10塊地采集的土壤樣本中都檢出了M.cannonballus的子囊孢子，種植洋香瓜的土壤樣本中子囊孢子平均密度明顯高于其他樣本，達(dá)8.09子囊孢子／g［17］。

全球性氣候變化、瓜類栽培方式的改變（如地膜覆蓋等增溫措施的應(yīng)用）及感病品種的種植可能是該病對全球瓜類生產(chǎn)危害日趨嚴(yán)重的重要原因。

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