張世強 陳冬波 王保慶 張?zhí)m勝 王自全

徐州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科,江蘇徐州 221006

惡性腫瘤患者機體免疫功能通常發(fā)生紊亂,而化療在殺傷腫瘤細胞的同時對機體免疫功能也造成一定程度的影響[1]。本研究應(yīng)用流式細胞術(shù)對83例肺癌化療患者外周血中T淋巴細胞亞群及NK細胞活性進行測定,觀察靜脈滴注復(fù)方苦參注射液對肺癌化療患者外周血細胞免疫功能的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年 8月—2010年 5月本科收治的Ⅲb～Ⅳ期肺癌患者83例,所有病例均經(jīng)細胞學(xué)和組織學(xué)病理證實為原發(fā)性肺癌,且Karnofsky評分＞60分,無其他腫瘤病史以及無嚴重的可能影響治療計劃按期完成的內(nèi)科疾病。將患者隨機分為觀察組和化療組。觀察組39例,其中男27例,女12例,平均年齡42～74歲;鱗癌 15例,腺癌 21例,腺鱗癌 2例,大細胞癌1例,采用化療聯(lián)合靜脈滴注復(fù)方苦參注射液治療;化療組44例,其中男29例,女 15例,平均年齡45～69歲;鱗癌17例,腺癌23例,腺鱗癌2例,大細胞癌2例,僅采用常規(guī)化療。兩組病例年齡、性別及病理類型經(jīng)比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。另外選擇31例健康人作為對照組,所有研究對象均于清晨抽取空腹靜脈血8 ml待檢。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 觀察組患者于化療前2～3 d開始用復(fù)方苦參注射液20 ml加入0.9%氯化鈉250 ml中靜脈滴注,每日1次,14 d為1個周期,共治療3～4個周期。兩組患者均采用NP化療方案。具體如下:長春瑞濱25 mg/m2,第 1天、第8天,靜脈滴注;順鉑25 mg/m2,第1天～第3天,靜脈滴注。兩組化療期間均輔助相同的止吐及保護胃黏膜藥,未使用任何生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑或其他對免疫功能有影響的藥。

1.2.2 試驗方法

1.2.2.1 觀察指標(biāo) 分別抽取肺癌患者和健康人的外周血,觀察自然殺傷細胞(NK細胞)活性、T淋巴細胞亞群 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+在化療前后的變化。

1.2.2.2 檢測方法 熒光抗體標(biāo)記所測物,抗體組合為 :CD3-CY5、CD8-PE 和 CD3-FITC 、CD56-PE,避光反應(yīng)15～20 min,制成單細胞懸液。全血樣本先用甲酸溶血,離子強度調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)離子濃度,1.0%多聚甲醛固定,3 000 r/min離心,5 min×2,加生理鹽水溶解稀釋后上流式細胞儀檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,數(shù)據(jù)以±s表示,組間比較采用 t檢驗,以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 化療前外周血T淋巴細胞亞群及NK細胞活性比較

83例肺癌患者化療前 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK細胞水平均低于健康對照組(P＜0.01),差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

表1 化療前肺癌組與對照組外周血T淋巴細胞亞群及NK細胞活性比較(%,±s)

表1 化療前肺癌組與對照組外周血T淋巴細胞亞群及NK細胞活性比較(%,±s)

與對照組比較**P＜0.01

組別 n CD3+ CD4+ CD4+/CD8+ NK對照組 31 62.01±6.53 45.76±6.80 1.76±0.34 24.11±8.38肺癌組 83 57.92±5.72** 41.50±5.72** 1.47±0.42** 19.95±6.74**

2.2 化療前后外周血T淋巴細胞亞群及NK細胞活性比較

化療組和觀察組患者化療后外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+NK細胞水平較化療前降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),但觀察組各項指標(biāo)均顯著高于化療組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組化療前后T淋巴細胞亞群及NK細胞活性比較(%,±s)

表2 兩組化療前后T淋巴細胞亞群及NK細胞活性比較(%,±s)

與化療前比較*P＜0.05;與化療組比較△P＜0.05

組別 n CD3+化療前 化療后CD4+化療前 化療后CD4+/CD8+化療前 化療后NK化療前 化療后化療組 4457.74±5.133.09±4.65* 40.37±6.0934.82±5.76* 1.49±0.37 1.21±0.27* 20.17±6.9315.44±5.37*觀察組 3958.26±4.87 56.07±5.14*△ 42.09±6.13 37.81±6.02*△ 1.52±0.41 1.34±0.31*△ 19.82±6.79 17.95±5.72*△

3 討論

我國肺癌的發(fā)病率逐年升高,大部分患者就診時已處于腫瘤晚期,需要行腫瘤內(nèi)科化療。有研究[2-4]發(fā)現(xiàn),化療在殺滅腫瘤細胞的同時也伴隨因化療引起的負面效應(yīng),免疫功能降低是主要并發(fā)癥之一,而在腫瘤的治療過程中,保護機體免疫狀態(tài)與殺傷腫瘤細胞具有同等重要的地位。傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論認為扶正培本、活血化瘀、清熱解毒的中藥能保護或提高機體的免疫功能,調(diào)動機體自身的抗癌能力,從而達到延長患者生存期、改善生活質(zhì)量的作用。近年來,已有許多研究[5-7]證實,對化療患者采用中醫(yī)藥輔助治療能減輕藥物毒性和各種治療的不良反應(yīng),可以有效保護人體的免疫功能。

復(fù)方苦參注射液為純中藥抗癌藥,其主要成分為苦參堿、氧化苦參堿等多種生物堿。近年研究[8-10]表明,苦參類生物堿具有較強的抗腫瘤活性,可誘導(dǎo)腫瘤細胞向正常細胞分化,具有促凋亡作用,可顯著提高細胞免疫功能,是良好的免疫調(diào)節(jié)劑。本研究結(jié)果顯示,肺癌患者化療前 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK細胞數(shù)均低于健康對照組,提示肺癌患者的機體免疫功能明顯低于正常人,而且進一步分析表明單純化療組和觀察組患者化療后外周血CD3+、CD4+、NK細胞含量以及CD4+/CD8+水平較化療前繼續(xù)降低,說明化療損傷了肺癌患者免疫機能,從而導(dǎo)致其免疫功能進一步下降。而化療后觀察組肺癌患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK細胞數(shù)均顯著高于單純化療組,說明化療的同時應(yīng)用復(fù)方苦參可改善化療對肺癌患者的免疫抑制狀態(tài),使機體的免疫功能特別是細胞免疫功能增強,間接發(fā)揮了對腫瘤細胞的抑制與殺傷作用。

復(fù)方苦參減輕化療對肺癌患者免疫抑制的機制尚不清楚,中醫(yī)學(xué)對于腫瘤的致病因素有“正氣不足,而后邪氣踞之”的認識,其“正氣”一定程度包括了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的免疫防御功能。崔澂等[11]研究發(fā)現(xiàn),氧化苦參堿可通過降低Colon26腫瘤細胞分泌TGF-β1和IL-10,從而下調(diào)Colon26對T細胞增殖、活化及對T、NK細胞ζ鏈表達的抑制,在一定程度上逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的免疫抑制。

因此,復(fù)方苦參對改善肺癌化療患者的細胞免疫功能有重要意義,對肺癌化療患者有一定的臨床應(yīng)用價值,建議在臨床中進一步推廣和應(yīng)用。

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