黃健宇 賴在真 杜玲 徐鴻緒

隨著免疫抑制劑在臨床的廣泛使用，以及免疫缺陷人群的增多，光滑念珠菌在臨床的檢出率明顯增加，在某些地區(qū)光滑念珠菌已成為僅次于白色念珠菌的第2位或第3位的常見念珠菌［1］。為了解我院光滑念珠菌的臨床分布特點(diǎn)及耐藥情況，現(xiàn)對(duì)2007年～2009年醫(yī)院感染患者留取的標(biāo)本中分離出的光滑念珠菌的臨床分布和耐藥性進(jìn)行回顧性分析?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 2007年1月至2009年12月醫(yī)院各臨床科室送檢的疑似感染標(biāo)本，包括ICU，內(nèi)科，外科，產(chǎn)房，器官移植，耳鼻喉科，綜合科室。標(biāo)本類型分別有痰，尿液，大便，分泌物等。

1.2 試劑 沙保羅培養(yǎng)基和科瑪嘉顯色培養(yǎng)基由廣州迪景微生物科技有限公司提供;法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的API 20C AUX酵母菌鑒定板條;ATB FUN GUS3真菌藥敏板條。

1.3 質(zhì)控菌株 白色假絲酵母菌ATCC 90028，克柔假絲酵母菌ATCC 6258，近平滑假絲酵母菌ATCC 22019，熱帶假絲酵母菌ATCC 750，光滑假絲酵母菌ATCC 90030。

1.4 鑒定培養(yǎng) 從沙保羅培養(yǎng)基中挑取單個(gè)菌落接種在科瑪嘉顯色培養(yǎng)基，在33～34℃環(huán)境中培養(yǎng)24～48 h，根據(jù)菌落顏色的差別和用法國生物梅里埃公司生產(chǎn)的API 20C AUX酵母菌鑒定到種。

1.5 藥敏試驗(yàn) 從沙保羅培養(yǎng)基中挑取單個(gè)菌落于3 ml 0.85%NaCl Medium中，調(diào)制成2個(gè)麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙海賹⑵淙〕?0μl加入到7 ml ATB F2 Medium中混勻，最后向ATB FUN GUS3真菌藥敏板條(含兩性霉素B、伏立康唑、5-氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑)各杯中加入135μlATB F2 Medium菌懸液，在33～37℃環(huán)境中培養(yǎng)24～48 h，然后讀取藥敏結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 按照美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)制定的藥敏試驗(yàn)結(jié)果解釋標(biāo)準(zhǔn)，采用Whonet 5.3軟件統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)本來源 光滑念珠菌分離鑒定的標(biāo)本來源構(gòu)成中，痰液標(biāo)本檢出率最高，其次是尿液，第三是大便(表1)。

2.2 真菌的鑒定結(jié)果 2007～2009年院臨床送檢標(biāo)本中，共分離出真菌3436株，其中光滑念珠菌的檢出率呈逐年上升的趨勢(shì)，其分布構(gòu)成比分別為15.6%、16.3%、21.8%。

2.3 藥敏結(jié)果 光滑念珠菌對(duì)5種抗真菌藥物(兩性霉素B，伏立康唑，5-氟胞嘧啶，氟康唑，伊曲康唑)的藥敏結(jié)果，平均敏感率兩性霉素B 100%敏感，伏立康唑95.8%敏感，5-氟胞嘧啶97.9%敏感，氟康唑87.3%，伊曲康唑55.4%敏感。見表2。

表1 2007～2009年光滑念珠菌的標(biāo)本來源與構(gòu)成比(%)

表2 2007～2009年光滑念珠菌對(duì)4種抗真菌藥物的敏感率(%)

3 討論

近年來，白色念珠菌在臨床真菌感染中有所下降，而非白色念珠菌感染有所升高，其中，由光滑念珠菌引起的感染明顯增加，由其所致的黏膜和系統(tǒng)性感染不斷增多，光滑念珠菌已成為臨床常見的念珠菌［2］。2007年～2009年我院微生物實(shí)驗(yàn)室接收的臨床標(biāo)本當(dāng)中，光滑念珠菌的檢出率呈逐年遞增的趨勢(shì)，至2009年達(dá)21.8%，僅次于白色念珠菌，與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［1］。3年內(nèi)分離出的618株光滑念珠菌，2007年167例，2008年193例，2009年258例。內(nèi)科檢出的光滑念珠菌最多，分別占43.7%，48.2%，46.9%;其次是ICU 26.9%，25.9%，26.0%，主要原因可能跟這兩個(gè)科室的患者由于病情需要大量使用廣譜抗生素，免疫抑制劑以及各種介入性醫(yī)療手段增加有關(guān)。皮質(zhì)類固醇的應(yīng)用導(dǎo)致炎性反應(yīng)抑制，使吞噬細(xì)胞功能減弱，易誘發(fā)真菌感染。住院時(shí)間長、大劑量廣譜抗菌藥物的應(yīng)用，是感染的直接誘因。嚴(yán)重的創(chuàng)傷患者急性應(yīng)激反應(yīng)，較大的創(chuàng)面特別是在醫(yī)療設(shè)備消毒不徹底的情況下均增加感染機(jī)會(huì)［3］。

2007～2009年光滑念珠菌在痰液中檢出率均最高，分別為40.7%、38.9%、31.0%，這與深部真菌感染部位以呼吸道為主有關(guān)。真菌在受損的呼吸道黏膜易于定植，一旦菌群失調(diào)及內(nèi)環(huán)境紊亂，則造成內(nèi)源性感染［4］。我們的分析結(jié)果顯示，尿液標(biāo)本中光滑念珠菌的檢出率所占比例也較高，這跟患者長期留置導(dǎo)尿管有關(guān)。有文獻(xiàn)報(bào)道，光滑念珠菌是引起念珠菌血癥的第2位常見病原菌［5］，但由于本院血培養(yǎng)送檢率低，統(tǒng)計(jì)菌株較少，未見相關(guān)發(fā)現(xiàn)。

真菌感染的患者通常已患有一種或以上的嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病，濫用抗真菌藥物會(huì)引起真菌感染類型的變遷和導(dǎo)致對(duì)抗真菌藥物的耐藥性增強(qiáng)［6］，因此對(duì)臨床標(biāo)本分離培養(yǎng)出的真菌進(jìn)行體外抗真菌藥物敏感試驗(yàn)和進(jìn)行真菌耐藥性監(jiān)測(cè)是非常重要的。本研究藥敏結(jié)果顯示，我院2007～2009年分離出的光滑念珠菌對(duì)兩性霉素B，伏立康唑，5-氟胞嘧啶這幾種常用的抗真菌藥物的敏感性較好，三年平均敏感率分別為100%、95.8%、97.9%，但兩性霉素B的腎毒性大，臨床應(yīng)用受到限制。其次為氟康唑，三年平均敏感率87.3%，伊曲康唑的抑菌效果則較差，僅為55.4%。從我們體外藥敏情況看，光滑念珠菌的耐藥情況雖然并不嚴(yán)重，但是在治療上頗為棘手，因?yàn)楦腥镜幕颊咄ǔ２∏閺?fù)雜且嚴(yán)重，有較高的死亡率，抗真菌藥物可選擇范圍不大，因此臨床微生物室必須做好光滑念珠菌的分離培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn)，重視真菌耐藥性監(jiān)測(cè)［7］。

目前認(rèn)為光滑念珠菌感染的危險(xiǎn)因素包括:糖尿病、長時(shí)間住院、手術(shù)、導(dǎo)尿、靜脈留置導(dǎo)管以及使用過氟康唑等。因此，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)光滑念珠菌的研究以進(jìn)一步明確光滑念珠菌感染的危險(xiǎn)因素和耐藥變化趨勢(shì)。根據(jù)藥敏實(shí)驗(yàn)合理使用抗菌藥物，盡可能避免長時(shí)間使用多種廣譜抗菌藥物，減少不必要的創(chuàng)傷性檢查，提高院內(nèi)繼發(fā)真菌感染的意識(shí)等措施，減少真菌感染的機(jī)會(huì)。

［1］Li L，Redding S，Dongari-Bagtzoglou A.Candida glabrata，an emerging oral opportunistic pathogen.J Dent Res，2007，86(3):204-215.

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［3］張春和，金艷，陳東科.臨床無菌體液標(biāo)本中真菌分離及耐藥性分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2008，18(10):1489-1491.

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