趙鷹 胡長(zhǎng)軍 王鵬 馬斌林 劉虎

乳腺癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅女性的身體健康，新疆是乳腺癌高發(fā)區(qū)，近年來(lái)，雖然在早期診斷和治療方面取得了一定的進(jìn)展，但其死亡率仍無(wú)明顯下降，本研究通過(guò)檢測(cè)Ki67、Her-2和nm23蛋白在乳腺癌中的表達(dá)，探討其臨床意義，為臨床提供參考指標(biāo)。

1 材料和方法

1.1 一般資料 收集新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2007年10月～2008年6月經(jīng)病理證實(shí)的原發(fā)性乳腺癌手術(shù)切除的標(biāo)本104例，術(shù)前均未作過(guò)化療、放療和內(nèi)分泌治療，無(wú)其他合并惡性腫瘤和家族、遺傳性疾病病史，患者年齡27～80歲，中位年齡44歲;臨床Ⅰ期10例，Ⅱ期72例，Ⅲ期20例，Ⅳ期2例;腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移66例，未轉(zhuǎn)移38例。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料及方法 所有標(biāo)本均經(jīng)常規(guī)甲醛固定，石蠟包埋。進(jìn)行連續(xù)切片，PV9000通用型兩步法免疫組化方法檢測(cè)乳腺癌組織中Ki67、HER-2和nm23蛋白的表達(dá)。以上試劑均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，以各抗體的乳腺癌陽(yáng)性染色切片作為陽(yáng)性對(duì)照，用磷酸鹽緩沖液PBS代替一抗作陰性對(duì)照。細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性，觀察10個(gè)具有代表性的高倍視野，參照許良中等［1］采用著色強(qiáng)度積分與數(shù)量積分相加的方法判定結(jié)果:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)計(jì)分:無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為0分，小于等于25%為1分，26% ～50%為2分，51% ～75%為3分，大于75%為4分;染色強(qiáng)度計(jì)分:無(wú)色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;著色強(qiáng)度積分與數(shù)量積分相加:0分為(-)，2～3分為(±)，4～5分為(+)，6～7分為(++)，其中(+)和(++)判為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 13.0軟件包。比較Ki67、HER-2及nm23蛋白和乳腺癌各臨床指標(biāo)，進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 Ki67、Her-2和nm23蛋白的表達(dá) Ki67基因在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性表達(dá)者52例，占78.79%(52/66);在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性表達(dá)者22例，占57.89%(22/38)。HER-2基因在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性表達(dá)者23例，占34.85%(23/66);在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性表達(dá)者5例，占13.16%(5/38)。nm23基因在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性表達(dá)者46例，占69.70%(46/66);在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性表達(dá)者35例，占92.10%(35/38)。見(jiàn)表1。

表1 乳腺癌組織中Ki67、Her-2和nm23的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系

2.2 影響乳腺癌預(yù)后結(jié)果分析 對(duì)本組104例病例進(jìn)行術(shù)后分析，發(fā)現(xiàn)Ki67蛋白表達(dá)陽(yáng)性的病例共74例，其中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中有52例，占78.79%;明顯高于Ki67蛋白在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性表達(dá)的22例，占57.89%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。HER-2蛋白表達(dá)陽(yáng)性的病例共有28例，其中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中有23例，占34.85%;顯著高于HER-2抗原表達(dá)在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性的5例，占13.16%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。nm23蛋白表達(dá)陽(yáng)性的病例共81例，其中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中只有46例，占69.70%;明顯低于nm23蛋白在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性表達(dá)的35例，占92.10%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

Ki67蛋白是與增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，分布于核內(nèi)，其功能被認(rèn)為與染色質(zhì)相連及與細(xì)胞的有絲分裂密切相關(guān)，多個(gè)研究均發(fā)現(xiàn)，乳腺癌中Ki67的陽(yáng)性率與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著關(guān)系，而Ki67表達(dá)水平與乳腺癌患者生存率的直接關(guān)系國(guó)內(nèi)外罕見(jiàn)報(bào)道。本組資料顯示，Ki67蛋白表達(dá)水平與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是與腫瘤細(xì)胞的增殖活性密切相關(guān)的，Ki67是與增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，故Ki67表達(dá)水平高者易出現(xiàn)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。Ki67蛋白的表達(dá)，可反映腫瘤細(xì)胞活性，與惡性腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后高度相關(guān)［2］。

HER-2又稱 neu、C-erbB-2、NGL，位于人類第17號(hào)染色體長(zhǎng)臂(17q21)，編碼細(xì)胞膜磷酸糖蛋白，分子量為185×103u。近年來(lái)有關(guān)HER-2在乳腺癌中的表達(dá)與一些臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系報(bào)道不少，但結(jié)論并不完全一致。Sauer［3］等證明非倍數(shù)染色體乳腺癌細(xì)胞中HER-2表達(dá)增高，間接證明了C-erbB-2表達(dá)陽(yáng)性乳腺癌預(yù)后不良;Mittrz［4］等認(rèn)為HER-2不僅與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，而且與多數(shù)學(xué)者通過(guò)對(duì)乳腺癌患者的隨訪研究認(rèn)為HER-2的過(guò)度表達(dá)預(yù)示患者生存期較短，易復(fù)發(fā)，是判斷乳腺癌預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)［5］。

本實(shí)驗(yàn)HER-2的陽(yáng)性率為28%，與文獻(xiàn)報(bào)道一致［6］。HER-2的表達(dá)與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，HER-2的高表達(dá)，腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率明顯增高。表達(dá)C-erbB-2的癌組織常具有較高的增殖活性，腫瘤生長(zhǎng)活躍，其惡性程度高，轉(zhuǎn)移率也較高，間接預(yù)示著表達(dá)HER-2的浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌預(yù)后不良。眾多研究表明，HER-2蛋白的表達(dá)水平與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及預(yù)后等有顯著關(guān)系。本組資料顯示，HER-2蛋白表達(dá)水平與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，故它可作為乳腺癌預(yù)后的一項(xiàng)重要參數(shù)。

nm23又稱為抗轉(zhuǎn)移癌基因，是一種抑癌基因，是一種公認(rèn)的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因nm23蛋白表達(dá)水平與乳腺癌患者腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況和癌細(xì)胞分化程度呈顯著相關(guān)，對(duì)腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移起抑制作用。本研究顯示nm23在癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為77.9%，nm23的表達(dá)在淋巴結(jié)無(wú)轉(zhuǎn)移組明顯高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P＜0.05)，因此nm23基因可以作為判斷轉(zhuǎn)移的標(biāo)志物，對(duì)評(píng)估乳腺癌的預(yù)后有重要意義［7］。

近年研究表明，nm23與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系;nm23過(guò)度表達(dá)的惡性腫瘤更易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差［8，9］。

文獻(xiàn)［10］報(bào)道，人類乳腺癌 nm23表達(dá)陽(yáng)性率為63%-77%，且發(fā)現(xiàn)nm23陽(yáng)性表達(dá)與乳腺癌的進(jìn)展程度有關(guān)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是乳腺癌轉(zhuǎn)移的主要途徑。本組研究結(jié)果顯示，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌組織中nm23表達(dá)水平低于無(wú)轉(zhuǎn)移組(P＜0.05)，這提示nm23對(duì)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移起抑制作用，高表達(dá)者抑制了腫瘤的轉(zhuǎn)移。對(duì)乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展有重要意義［11］。

本組資料顯示，腫瘤細(xì)胞惡變后，包括HER-2在內(nèi)的眾多抑癌基因失活及癌基因激活，從而引起一系列改變，腫瘤組織代謝旺盛，合成DNA和RNA聚合酶活性增高，細(xì)胞增殖旺盛，Ki67、HER-2出現(xiàn)高表達(dá)。nm23則出現(xiàn)低表達(dá)。這說(shuō)明聯(lián)合檢測(cè)Ki67、HER-2和nm23蛋白更有助于乳腺癌患者的預(yù)后判斷，如聯(lián)合檢測(cè)Ki67、HER-2和nm23蛋白，發(fā)現(xiàn)前兩種指標(biāo)任1項(xiàng)陽(yáng)性者都應(yīng)加強(qiáng)術(shù)后的綜合治療及隨訪力度。

總之，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者nm23過(guò)度表達(dá)者預(yù)后好，C-erbB-2、Ki67過(guò)度表達(dá)者預(yù)后不良，三者聯(lián)合檢測(cè)可作為判斷乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者預(yù)后的有效指標(biāo)。

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