田瑞杰 柳春興

經(jīng)皮給藥系統(tǒng)(Transdermal Drug Delivery，TDD)使藥劑學(xué)中的一個(gè)新興的領(lǐng)域，因其具有可繞過(guò)肝臟通過(guò)效應(yīng)及避免胃腸道破壞，降低藥物毒性和刺激性等優(yōu)點(diǎn)。跌打活血涂膜劑為外科外用劑型，主要由大黃、三七、梔子、沒(méi)藥等中藥組成，具有清熱解毒、活血化瘀、消腫止痛之功效。臨床主要由于治療非骨折性軟組織損傷，鎮(zhèn)痛效果好，治愈時(shí)間短。為探討藥物作用機(jī)制，進(jìn)一步提高藥物治療效果，為跌打活血涂膜劑的經(jīng)皮作用進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)選擇紫外分光光度法，采用雙室滲透擴(kuò)散裝置，建立了涂膜劑體外經(jīng)皮滲透檢測(cè)方法，考察了促進(jìn)劑對(duì)涂膜劑經(jīng)皮滲透的影響。

1 材料儀器

1.1 材料 跌打活血涂膜劑(自制，批號(hào):000516):月桂氮卓酮(藥用，廣州助劑化工);油酸(分析純);丙二醇(分析純);無(wú)水乙醇(分析純);藥用甘油(上海制皂廠);生理鹽水(自制，批號(hào):000412);聚乙烯醇(PVA17-88，天津市化學(xué)試劑廠);三七、大黃、梔子、乳香、沒(méi)藥等(新疆醫(yī)科大學(xué)提供)。

1.2 TV-1221型分光光度計(jì)(北京通用分析儀器廠);雙室滲透擴(kuò)散池(自制，與Franz槽相似);超級(jí)恒溫水浴(上海市實(shí)驗(yàn)儀器廠);DF-101B型集熱式恒溫磁力攪拌器(浙江樂(lè)清市樂(lè)成電器廠)。

2 方法

2.1 涂膜劑的制備 ①處方:制大黃:5 g，生梔子:2.5 g，冰片 1.5 g，三七1.5 g，乳香 1.5 g，沒(méi)藥 1.5 g，PVA17-885 g，甘油 5 ml，無(wú)水乙醇:10 ml;②制備［1］:稱取大黃、三七、梔子等6味藥材，用均勻設(shè)計(jì)篩選出的優(yōu)化提取條件經(jīng)回流提取，過(guò)濾滅菌得中藥提取液，根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件選定聚乙烯醇、藥液、無(wú)水乙醇和甘油構(gòu)成涂膜劑的基本處方，選用L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn)，以成膜時(shí)間及外觀質(zhì)量為優(yōu)選指標(biāo)進(jìn)行篩選，得最佳處方為:藥液PVA(ml:g=10:5)，甘油5 ml，無(wú)水乙醇10 ml。稱取PVA10 g，純化水適量浸泡24 h，使其充分溶脹，于90℃水浴加熱使其較快溶于水中，濾過(guò)，得均勻無(wú)塊狀物膠漿。依次將10 ml藥液、5 ml甘油及無(wú)水乙醇10 ml緩緩加入上述膠漿液中，并不斷攪拌，以防PVA析出，最后用純化水定容至100 ml，攪勻，即得。

2.2 體外滲透實(shí)驗(yàn)

2.2.1 樣品液的制備 精密吸取涂膜劑0.5 ml，置水浴揮干，殘留物用生理鹽水溶解，微孔濾膜過(guò)濾，轉(zhuǎn)移至10 ml溶液瓶中，定容至刻度。

2.2.2 空白液的制備 按2.1涂膜劑的制備方法，支撐不含中藥的空白涂膜劑，同時(shí)制成空白液。

2.2.3 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇［2］取上述兩種溶液在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，測(cè)定器吸收度，確定樣品液在294 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，空白液在此處對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，故測(cè)定波長(zhǎng)選擇在294 nm。

2.2.4 鼠皮的制備 取體重為18～20 g的雄性小鼠，用8%硫化鈉溶液脫去背部毛，用生理鹽水洗凈皮膚，自然飼養(yǎng)1 d，于次日實(shí)驗(yàn)前斷頸處死，立即剝離背部皮膚，分離皮下組織及脂肪。選用無(wú)破損者浸泡于生理鹽水中，置冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2.5 透皮實(shí)驗(yàn)［3］采用自制雙室滲透裝置(擴(kuò)散池管口半徑D=1.80 cm，橫截面積S=10.57 cm2)，鼠皮真皮面向接收池，固定在擴(kuò)散池接收池之間，使皮膚與接收池接觸。在接收池加入0.9%生理鹽水40 ml后，開(kāi)啟循環(huán)水浴(37±1)℃和磁力攪拌(轉(zhuǎn)速為100 r/min)，分別用注射器將0.5 ml樣品液注入擴(kuò)散池，用電吹風(fēng)加速成膜，在持續(xù)攪拌下，于4，8，12，10，24 h定時(shí)取出全部接收介質(zhì)，分別用微孔濾膜過(guò)濾，并立即向接收池注入新鮮生理鹽水40 ml，共取8次，同法作空白對(duì)照，在同條件下分別量取樣品和空白接收介質(zhì)，分別測(cè)定波長(zhǎng)294 nm處樣品和空白擴(kuò)散介質(zhì)的吸收度值A(chǔ)樣和A空;樣品和空白擴(kuò)散介質(zhì)的吸收度值A(chǔ)樣和A空。

2.2.6 累積滲透百分率的測(cè)定［4］樣品注和空白液經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾，在294 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度值。然后按下列公式計(jì)算累積滲透百分率，以減小鼠皮本身生理性物質(zhì)所造成的影響。

2.3 促進(jìn)劑的作用［5］不同促進(jìn)劑對(duì)涂膜劑的促滲影響按2.1所示方法制備涂膜劑，分別加入含不同體積分?jǐn)?shù)的月桂氮卓酮、油酸和丙二醇。制成含不同促進(jìn)劑的涂膜劑，按2.2所示方法進(jìn)行體外滲透實(shí)驗(yàn)，計(jì)算每4 h累積滲透百分率Q。將Q對(duì)t回歸的直線方程，結(jié)果。見(jiàn)表1、表2、表3。

表1 氮酮對(duì)涂膜液離體鼠皮滲透的影響(n=5)

表2 油酸對(duì)涂膜液離體鼠皮滲透的影響(n=5)

表3 丙二醇對(duì)涂膜液離體鼠皮滲透的影響(n=5)

3 討論

跌打活血涂抹劑含蒽醌、皂苷和梔子苷等多種中藥有效成分，紫外吸收為各類成分的加和，此時(shí)紫外吸收值也可簡(jiǎn)介反映出總的有效成分的含量高低。因此，在離體鼠皮滲透實(shí)驗(yàn)中，采用紫外分光光度法測(cè)定接收池介質(zhì)的吸收度值，符合中醫(yī)理論整體觀和中醫(yī)用藥的實(shí)際，計(jì)算累積滲透百分率可間接反映出涂膜劑中總有效成分在不同種類促進(jìn)劑的滲透效果情況。在促進(jìn)劑種類、體積百分?jǐn)?shù)的優(yōu)選中，接收池介質(zhì)的紫外吸收值不失為一個(gè)簡(jiǎn)便、快捷的間接滲透率評(píng)價(jià)指標(biāo)。

由于離體皮膚上時(shí)間和接收液接觸，皮膚蛋白會(huì)脫落或溶解于接收液中，至接收液混濁或呈乳光，故測(cè)定前應(yīng)對(duì)樣品液和空白液以微孔濾膜過(guò)濾。

［1］魏鳳玲，齊敏超，鐘家勝.大黃蒽醌類成分提取工藝優(yōu)選.中國(guó)中藥雜志，1998，(20):609.

［2］袁久榮.中藥鑒別紫外譜線組法及應(yīng)用.人民衛(wèi)生出版社，1999:66.

［3］鄭俊民.經(jīng)皮給藥新劑型.北京人民衛(wèi)生出版社，1997:100.

［4］劉建平，吳奇.促進(jìn)劑對(duì)咳喘涂膜劑中黃岑苷經(jīng)皮滲透的影響.中國(guó)藥學(xué)雜志，997，3(10):599.

［5］劉斌，向星，曾祥平.復(fù)方利巴韋林的制備及臨床應(yīng)用.中國(guó)藥學(xué)雜志，1996，31(3):151.