亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        山楂中熊果酸和齊墩果酸的高效液相色譜分析

        2010-05-26 06:14:46周巧霞顧振綸
        中成藥 2010年5期
        關(guān)鍵詞:峰形齊墩丁基

        周巧霞, 顧振綸

        (1.蘇州九龍醫(yī)院藥劑科,江蘇蘇州 215021;2.蘇州中藥研究所,江蘇 蘇州 215007)

        山楂為薔薇科植物山楂Crataegus pinnatifidaBge.的干燥果實(shí),具有消食健胃.行氣散瘀作用。用于肉食積滯,胃腕脹滿,瘀血經(jīng)閉,高脂血癥[1]。現(xiàn)代藥理研究表明熊果酸和齊墩果酸是山楂降血脂的主要活性成分,且含量較高[2]。熊果酸和齊墩果酸為一對異構(gòu)體,含量測定多采用高效液相色譜法[3,4],但在檢測過程中發(fā)現(xiàn)兩組分分離效果不好且拖尾因子過大。本文建立的反相高效液相色譜法很好的解決了這兩點(diǎn),并對3個(gè)批號的樣品進(jìn)行了含量測定,結(jié)果令人滿意。

        1 材料與方法

        1.1 儀器與試劑 Waters510高效液相色譜儀(WDL-95色譜工作站,Waters484紫外檢測器,Waters7725i進(jìn)樣閥);Sartorius BS110S電子天平(萬分之一);PHS-3C型精密pH計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司雷磁儀器廠)。二蒸水;四丁基氫氧化銨、磷酸鹽等均為分析純;甲醇為色譜純。熊果酸和齊墩果酸含量測定用對照品(0742-9909和 110709-200505)購自中國藥品生物制品檢定所;山楂提取物為本所自制。

        1.2 樣品制備

        對照品溶液:取熊果酸和齊墩果酸對照品約12 mg,精密稱定,置50 mL量瓶中,加流動相溶解,并稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液。

        供試品溶液:取山楂提取物約25 mg,精密稱定,置50 mL量瓶中,加流動相溶解,并稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。

        1.3 色譜條件 分析柱采用μBandapakTMC18柱,300 mm×3.9 mm ID,10 μm粒徑(美國Waters公司);流動相為pH3.5的甲醇/磷酸鹽緩沖液(85/15含0.4%四丁基氫氧化銨),波長215 nm,流速1.0 mL/min,柱溫:40℃。

        2 結(jié)果

        2.1 pH的影響 分別配制pH值為2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0 的磷酸鹽緩沖液/甲醇為50/50的流動相,按上述分析方法分離樣品溶液。結(jié)果表明:pH在3.5時(shí)熊果酸和齊墩果酸的峰形和分離度較好;pH升高,峰形變窄、保留時(shí)間縮短,但熊果酸與齊墩果酸部分重疊;pH降低,峰形變寬、保留時(shí)間延長。故選擇pH為3.5左右。

        2.2 四丁基氫氧化銨的影響 分別配制含四丁基氫氧化銨為0.2%、0.4%、0.6%、0.8%(v/v)的流動相,按上述方法分析樣品溶液。結(jié)果表明:四丁基氫氧化銨濃度由0.2%增加到0.4%時(shí),峰形變窄、拖尾因子變小;由0.4%增加到0.6%、0.8%時(shí),峰形和拖尾因子無明顯變化。故選用四丁基氫氧化銨濃度為0.4%。

        2.3 甲醇濃度的影響 配制甲醇/磷酸鹽緩沖液不同比例的流動相,按上述方法分析樣品溶液。結(jié)果表明:甲醇比例在85%時(shí),既保持了良好的峰形、分離度和拖尾因子,又有合適的分析時(shí)間,故選擇甲醇/磷酸鹽緩沖液為85/15。

        2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密吸取對照品溶液2、4、6、8、10 μL分別注入高效液相色譜儀測定峰面積,以質(zhì)量對峰面積回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。熊果酸:Y=51 024X+996 0(r=0.999 8),線性范圍為0.82~4.1 μg;齊墩果酸:Y=48 839X+6 932(r=0.999 9),線性范圍為0.80 ~4.0 μg。

        2.5 精密度 用以上色譜條件將對照品溶液和樣品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次,熊果酸的RSD為0.57%,齊墩果酸的RSD為0.52%。

        2.6 重現(xiàn)性 制備供試品溶液5份,各吸取5 μL進(jìn)樣分析,計(jì)算含量。熊果酸的RSD為0.75%,齊墩果酸的RSD為0.68%。

        2.7 穩(wěn)定性 取供試品溶液分別于配制后0、1、3、5、21、23、25 h依法測定,熊果酸的RSD為1.45%,齊墩果酸的RSD為1.25%。

        2.8 回收率 采用加樣回收(n=5),精密稱取已知含量山楂提取物10 mg,精密加入熊果酸對照品液10 mL和齊墩果酸對照品液3 mL,加流動相稀釋至刻度,搖勻,按以上色譜條件測定,計(jì)算。熊果酸的平均回收率:98.52%,RSD 1.47%;齊墩果酸的平均回收率:98.13%,RSD 1.61%。

        2.9 樣品分析 取三批山楂提取物,按供試品溶液制備項(xiàng)下配制,測定含量,結(jié)果見表1、圖1和圖2。

        表1 山楂提取物中熊果酸和齊墩果酸含量測定

        圖1 對照品HPLC圖譜

        圖2 山楂提取物HPLC圖譜

        3 討論

        拖尾因子是高效液相色譜定量分析時(shí)非常重要的一個(gè)影響因素,特別是在相鄰兩峰靠得比較近得時(shí)候,直接關(guān)系定量的準(zhǔn)確性。本文方法在建立時(shí)嘗試了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-磷酸鹽緩沖液、乙腈-磷酸鹽緩沖液等多個(gè)流動相,甲醇-磷酸鹽緩沖液體系表現(xiàn)出了較好的分離度和峰形,但拖尾因子仍較大。為了解決這一問題,嘗試了在甲醇-磷酸鹽緩沖液體系中加三乙胺和四丁基氫氧化銨。三乙胺的加入對峰形和拖尾因子沒有明顯影響,但四丁基氫氧化銨加入后,熊果酸和齊墩果酸的峰形明顯變窄、拖尾因子變小。可能的原因是四丁基氫氧化銨加入后與兩種成分結(jié)合生成離子對,改善了在C18色譜柱上的保留。

        在反相柱上甲醇的比例增減對熊果酸和齊墩果酸的保留和分離度有影響。選擇的流動相體系既要使兩組分能與眾多雜質(zhì)分離,又要保證有合適的分析時(shí)間。

        經(jīng)全波長紫外-可見掃描,熊果酸和齊墩果酸的最大吸收波長為207 nm;由于甲醇在此波長處有較強(qiáng)的末端吸收,為了減少干擾又盡量不降低靈敏度,確定在215 nm波長測定熊果酸和齊墩果酸含量。

        本法應(yīng)用時(shí),應(yīng)注意pH值的穩(wěn)定,過高或過低都將影響色譜峰的分離度、峰形和拖尾因子,建議將pH值穩(wěn)定在3.5。流動相長時(shí)間放置再使用會導(dǎo)致組分保留時(shí)間延長,宜現(xiàn)配現(xiàn)用。

        經(jīng)不同品牌的C18色譜柱測試,方法的重現(xiàn)性較好。本法曾用于不同產(chǎn)地山楂提取物的含量測定,色譜峰的分離度、峰形和拖尾因子均較好。

        [1]中國藥典[S].一部.2005:22-22.

        [2]陰 健,郭力弓.中藥現(xiàn)代研究與臨床應(yīng)用[M].北京:學(xué)苑出版社,1993:101-108.

        [3]白雪梅,付煜榮,田嘉銘.高效液相色譜法測定大山楂丸和山楂鮮果中齊墩果酸及熊果酸的含量[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2006,26(8):981-982.

        [4]黃秋妹,李 宗.HPLC法測定山楂中熊果酸和齊墩果酸的含量[J]. 海峽藥學(xué),2007,19(3):43-45.

        猜你喜歡
        峰形齊墩丁基
        基于LC-16i離子色譜儀的峰形優(yōu)化與分離機(jī)制探究
        二月桂酸二丁基錫的應(yīng)用及研究進(jìn)展
        云南化工(2021年5期)2021-12-21 07:41:12
        高校液相色譜對3,5-二硝基鄰甲基苯甲酸含量的測定
        齊墩果酸固體分散體的制備
        中成藥(2018年10期)2018-10-26 03:40:56
        齊墩果酸對自然衰老大鼠睪丸DNA損傷保護(hù)作用及機(jī)制研究
        齊墩果酸衍生物的合成及其對胰脂肪酶的抑制作用
        測定鉤吻中的鉤吻堿和鉤吻堿子的方法
        水線草熊果酸和齊墩果酸含量測定
        固體超強(qiáng)酸催化合成丁基糖苷
        N-正丁基吡啶四氟硼酸鹽離子液體的合成
        亚洲中文久久精品字幕| 伊人狠狠色j香婷婷综合| 青青草免费在线手机视频| 日韩精品中文字幕一区二区| 成人一区二区免费中文字幕视频| 精品国产乱码久久久久久口爆网站| 亚洲精品6久久久久中文字幕| 国产无套粉嫩白浆内精| 亚洲精品国产第一综合色吧| 看av免费毛片手机播放| 亚洲AV毛片无码成人区httP| 国产精品黄页免费高清在线观看| 情爱偷拍视频一区二区| 无码日韩精品一区二区三区免费| 久久国产精品视频影院| 在线免费观看毛视频亚洲精品| 97se色综合一区二区二区| 色婷婷久久综合中文久久蜜桃av| 亚洲一区二区三区av在线免费| 性色国产成人久久久精品二区三区| 亚洲自偷自拍另类第1页| 亚洲国产精品久久久久秋霞影院| 久久一日本道色综合久久大香| 日本女优五十路中文字幕| 精品乱人伦一区二区三区| 综合三区后入内射国产馆| 亚洲国产视频精品一区二区| 不卡一本av天堂专区| 色一情一区二区三区四区| 国产女人精品视频国产灰线| 亚洲国产天堂av成人在线播放| 中国孕妇变态孕交xxxx| 色爱区综合五月激情| 国产一区二区丁香婷婷| 午夜一区二区视频在线观看| 51国产黑色丝袜高跟鞋| 免费无码中文字幕A级毛片| 日韩在线精品免费观看| 国产日韩av在线播放| 午夜探花在线观看| 97自拍视频国产在线观看|