王會(huì)芳，王三勇，芮 凱，吉訓(xùn)聰，陳綿才

（海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境與植物保護(hù)研究所，?？?571100 ）

紅麻炭疽病是紅麻生產(chǎn)上的主要病害，在紅麻整個(gè)生育期只要溫度、濕度適宜，其嫩葉、嫩莖、側(cè)芽、花蕾等均可受害。在病害流行季節(jié)，常常造成莖折或爛頭，嚴(yán)重影響了紅麻的產(chǎn)量和質(zhì)量[1]。筆者對(duì)采自福建漳州紅麻上的炭疽病樣本進(jìn)行了組織分離及回接實(shí)驗(yàn)，通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察，確認(rèn)誘發(fā)病害的病原菌為印度炭疽（Colletotrichuml indicum Dast.）[2]。殺菌劑應(yīng)用是控制病害發(fā)生和蔓延的有效途徑，但近十多年來(lái)國(guó)內(nèi)未見(jiàn)該病的藥劑篩選和防治研究的報(bào)道。本文選用了不同作用機(jī)理和不同作用方式的殺菌劑對(duì)該病原菌進(jìn)行了室內(nèi)毒力測(cè)定，旨在為病害的防治和科學(xué)用藥提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試病原菌株

病樣采自福建省漳州市，在PDA培養(yǎng)基上按常規(guī)方法進(jìn)行組織分離和病原菌純化[3]，獲得純培養(yǎng)菌株，實(shí)驗(yàn)室條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 供試藥劑及使用濃度

選擇來(lái)自不同農(nóng)藥生產(chǎn)企業(yè)的常規(guī)和新型殺菌劑商品9種，按表1設(shè)計(jì)使用濃度。

表1 供試藥劑及使用濃度Table 1 Fungicides and the application concentration

1.3 測(cè)定方法

利用生長(zhǎng)速率法進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。將上述藥劑分別配成所需濃度50倍，待培養(yǎng)基溶化后，分別用移液器吸取不同濃度的藥液1ml注入49ml培養(yǎng)基中，搖勻后倒入3個(gè)直徑為9cm的滅菌培養(yǎng)皿中，使其形成薄厚均勻的含藥培養(yǎng)基平板，以1ml無(wú)菌水代替藥液作對(duì)照。用直徑為5mm的打孔器將活化好的供試菌種（PCA培養(yǎng)基28℃培養(yǎng)5d）打取菌餅接入培養(yǎng)皿中央位置，置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中。培養(yǎng)5d后用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，求出相對(duì)抑制率[4]。用DPS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，求出各藥劑對(duì)紅麻炭疽病菌的毒力回歸方程、抑制中濃度（EC50）及相關(guān)系數(shù)（R）。

2 結(jié)果與分析

試驗(yàn)表明，供試藥劑均對(duì)紅麻炭疽病菌表現(xiàn)出一定的抑制作用。不同殺菌劑或同一殺菌劑的不同濃度之間表現(xiàn)不同的抑菌效果（見(jiàn)表2）。其中50%咪鮮胺錳鹽WP的抑制效果最好，其EC50和EC90分別為0.0443μg/ml和0.8077μg/ml。25%吡唑醚菌酯EC和10%的苯醚甲環(huán)唑WG也表現(xiàn)了良好的抑制效果，其EC50分別為0.1410μg/ml和0.4098μg/ml，EC90分別為954.8009μg/ml和207.7769μg/ml。12.5%的腈菌唑EC在高抑菌率上表現(xiàn)較好，其EC90為53.7855μg/ml，僅次于50%咪鮮胺錳鹽WP。相對(duì)于幾種新型藥劑，兩種常規(guī)藥劑75%百菌清WP和70%甲基托布津WP對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制效果偏差，其EC90分別達(dá)到了17509.4735μg/ml和1987.3312μg/ml。而50%醚菌酯WG雖EC50僅為1.1790μg/ml，但隨著藥量的增加，抑制率增長(zhǎng)并不顯著。25%嘧菌酯SC和50%硫磺SC未能做出合適的毒力回歸曲線。但從菌落生長(zhǎng)的直徑來(lái)看，在設(shè)計(jì)的濃度范圍內(nèi)，25%嘧菌酯SC也表現(xiàn)出較好的抑菌效果，而50%硫磺SC抑菌效果較差。

表2 9種藥劑對(duì)紅麻炭疽病菌菌絲生長(zhǎng)抑制效果Table 2 Result ofcontrollinganthracnose pathogen with nine fungicides

3 結(jié)論與討論

殺菌劑應(yīng)用是目前防治紅麻炭疽病的重要措施之一。利用生長(zhǎng)速率法對(duì)9種藥劑的室內(nèi)毒力測(cè)試表明，50%咪鮮胺錳鹽WP對(duì)紅麻炭疽病的抑菌效果最好，其EC50和EC90均小于1μg/ml。25%吡唑醚菌酯EC、10%苯醚甲環(huán)唑WG及12.5%腈菌唑EC也表現(xiàn)了較好的抑菌效果。而常規(guī)藥劑75%百菌清WP和70%甲基托布津WP對(duì)紅麻炭疽病的防治效果偏差，可能與其在大田中的長(zhǎng)期大量使用，使該菌產(chǎn)生了抗藥性有關(guān)。

25%嘧菌酯SC和50%硫磺SC經(jīng)過(guò)多次的實(shí)驗(yàn)均未能出現(xiàn)合適的毒力回歸曲線，表明生長(zhǎng)速率法并不太適用于這兩種藥劑的室內(nèi)毒力研究。而50%硫磺SC在高濃度下抑菌效果依然不佳。

本實(shí)驗(yàn)為藥劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果，基于這些殺菌劑的作用機(jī)理和作用方式的不同，有待于進(jìn)行其對(duì)孢子萌發(fā)與侵入的抑制效果測(cè)定。另外，運(yùn)用篩選出的新型高效低毒殺菌劑咪鮮胺錳鹽、吡唑醚菌酯、苯醚甲環(huán)唑和腈菌唑進(jìn)一步實(shí)施大田試驗(yàn)和驗(yàn)證其防治效果極為必要。

[1] 熊和平，喻春明，王玉富，等．麻類技術(shù)100問(wèn)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2009，3：56-57．

[2] 戎文治，徐珊．我國(guó)紅麻上的幾種真菌病害[J].浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1983，9（1）：47-53．

[3] 方中達(dá)．植病研究方法[M]，北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1998：122-125．

[4] 涂勇，姚昕，余前媛，等.不同殺菌劑對(duì)青棗炭疽病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，2：136-137．