楊建省，羅永煌，黎曉敏

（西南大學(xué)動物科技學(xué)院，重慶 400715）

動物消化不良在臨床中經(jīng)常發(fā)生，會導(dǎo)致動物生產(chǎn)性能下降甚至死亡，往往造成巨大的經(jīng)濟損失，嚴重妨礙了畜牧業(yè)的發(fā)展。促進動物胃腸蠕動的西藥具有副作用大、長期使用易造成藥物在動物體內(nèi)的殘留等缺點。中藥制劑恰恰可避免這些弊端，且具有價格低廉、毒性作用小等諸多優(yōu)點，有較好的應(yīng)用前景[1]。

本實驗室自行研制的一種促進動物胃腸蠕動的中藥復(fù)方注射液，經(jīng)藥效學(xué)試驗研究表明，其具有治療動物消化不良的作用。試驗通過小鼠對促進動物胃腸蠕動的高、中、低劑量中藥復(fù)方注射液進行了精子畸形試驗，以期了解此注射液對精子有無致畸變作用，從而為其臨床應(yīng)用提供可靠的理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

促進動物胃腸蠕動的中藥復(fù)方注射液由西南大學(xué)藥學(xué)院藥理學(xué)實驗室提供。

1.2 試驗動物

昆明系SPF級小白鼠50只，由重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 試驗試劑

注射用環(huán)磷酰胺，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品批號09051921。

伊紅染色液，成都科龍化工試劑廠生產(chǎn)，產(chǎn)品批號 090103。

1.4 試驗方法

1.4.1 精子畸形試驗

試驗選取 8周齡、體重為 28～32 g昆明系雄性小鼠50只，隨機分為5組：陰性對照組（滅菌生理鹽水 0.2 mL·10 g－1）、陽性對照組（環(huán)磷酰胺80mg·kg－1）、低劑量組（30 g·kg－1）、中劑量組（60 g·kg－1）、高劑量組（120 g·kg－1）。連續(xù) 5 d 肌肉注射染毒，于首次給藥后第35天處死小鼠，取兩側(cè)附睪用眼科剪縱向剪開，置于裝有伊紅溶液2%的0.2mL小試管中，用吸管吹起于管底30～40次，使精子從附睪中充分游離出來，靜置染色 3～5 min，搖勻，吸取精子懸液滴于清潔薄片上，推片晾干，用甲醇固定5min，用水沖洗，干燥后先在低倍鏡下找到背景清晰、精子重疊較少的視野，再用高倍鏡順序檢查精子形態(tài)并計數(shù)，每只小鼠至少應(yīng)檢查1 000個精子[2－3]。精子的畸形主要表現(xiàn)在頭部，其次在尾部，畸形類型有：無鉤、香蕉形、無定形、胖頭、尾折疊、雙頭、雙尾等。記錄異常的精子數(shù)。

1.4.2 精子畸形率

精子畸形按式（1）計算：

2 結(jié)果

各組小鼠的精子畸形情況見附表和附圖。

附表 一種促進動物胃腸蠕動中藥復(fù)方注射液對小鼠精子畸形試驗結(jié)果

由附表可知，各劑量組與陰性對照組比較，差異不顯著（P＞0.05）；各劑量組與陽性對照組比較，差異極顯著（P＜0.01）；各劑量組之間無顯著差異（P＞0.05）。說明這種促動物胃腸蠕動的中藥復(fù)方注射液對小鼠精子畸形率沒有顯著影響。

附圖 精子畸形試驗照片

3 討論與結(jié)論

有關(guān)資料證明，精子的發(fā)生受多基因控制，這些基因分布于多條染色體上。精原細胞后期或初級精母細胞早期是對化學(xué)誘變劑較為敏感的時期。當(dāng)環(huán)境中化學(xué)物質(zhì)使精子形成的某些基因發(fā)生突變或表達受到干擾，就會導(dǎo)致精子畸形，致使畸形率增高。因此，小鼠精子畸形實驗是評價環(huán)境理化因子對哺乳動物雄性生殖細胞遺傳學(xué)損傷和生殖毒性的一種有效檢測方法[4]。

環(huán)磷酰胺是臨床上廣泛應(yīng)用的抗腫瘤藥物，同時也是一種生殖細胞毒物，能明顯誘導(dǎo)小鼠精子畸形率增加[5]。本試驗結(jié)果表明，在精子畸形試驗中，試驗組中有畸形精子出現(xiàn)，但各劑量組與陰性對照組比較差異不顯著（P＞0.05），各劑量組之間比較差異也不顯著（P＞0.05），且各劑量組、陰性組與陽性組比較差異極顯著（P＜0.01）。說明這種促動物胃腸蠕動的中藥復(fù)方注射液是安全的中藥制劑，對雄性小白鼠的精子無致畸變作用。

[1]張秀英,叢霞,張紅等.獸藥乳炎消的一般毒性研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2001（3）:32－33.

[2]盛彩霞,周萍.介紹一種改良伊紅染液的配制法[J].診斷病理學(xué)雜志,2006,13（2）:160.

[3]魏青,范瑞泉,陳鐵江,等.小鼠精子畸形試驗改良法和傳統(tǒng)法效果比較[J].華南預(yù)防醫(yī)學(xué),2004,30（2）:51－52.

[4]溫得中,劉陽,朱玉琢.甘草對醋酸鉛誘發(fā)小鼠精子畸形的抑制作用[J].吉林大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版）,2004,30（6）:868－870.

[5]李鳳文,劉榮珍,趙鵬,等.環(huán)磷酰胺對小白鼠精子畸形影響的探討[J].廣西醫(yī)學(xué),2003,25（3）:328－330.