魏炳棟，陳 群，于秀芳，劉海燕

（吉林省農(nóng)業(yè)科學院畜牧分院，吉林 公主嶺 136100）

目前，消除雜粕抗營養(yǎng)因子的方法對營養(yǎng)成分的破壞較大，蛋白質(zhì)和氨基酸的利用率降低，影響了在生產(chǎn)中的使用。利用微生物發(fā)酵的方式，不但能夠高效的消除抗營養(yǎng)因子，而且能夠改變蛋白質(zhì)的結構，使其大分子結構分解成更有利于消化吸收的小肽。微生物在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的細胞代謝產(chǎn)物如乳酸、細胞素等能夠降低腸道pH，減少病原菌生存，促進腸道有益微生物增殖，并且具有顯著的抗氧化作用。因此，本試驗以生長期中豬（50～75 kg）為試驗對象，利用發(fā)酵雜粕來替代豆粕，測定試驗動物的生長性能、血液生理生化指標和血液抗氧化能力，研究發(fā)酵雜粕在中豬生產(chǎn)中的應用，從而進一步研究微生物發(fā)酵粕類飼料的生理活性。

1 材料與方法

1.1 試驗材料和主要試劑

乳酸菌酶解棉籽粕、菜籽粕和玉米臍子粕（水分40%、接種量6%、酸性蛋白酶0.5%、25～30℃發(fā)酵48 h），乳酸菌由吉林省農(nóng)科院畜牧分院動物營養(yǎng)實驗室保存提供，3,5－二硝基水楊酸、磺基水楊酸、甘氨酸、尿素氮試劑盒、堿性磷酸酶試劑盒、白蛋白試劑盒、總蛋白試劑盒、T－AOC試劑盒、SOD試劑盒、MDA試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 主要儀器

培養(yǎng)箱、超凈工作臺、TGL－16C臺式離心機、HH－W 21－420S電熱恒溫水浴鍋、PHS－3C酸度計、Specord S600紫外－可見分光光度計。

1.3 試驗動物及日糧

選用體重相近的生長中豬32頭，隨機分為4組，每組8頭，分別飼喂含有豆粕、乳酸菌發(fā)酵雜粕的日糧，試驗日糧配方及營養(yǎng)成分見表1。預飼期 5 d，試驗期28 d。

表1 試驗日糧配方及營養(yǎng)水平%

1.4 試驗動物管理

試驗期間試驗豬自由采食，每個欄圈安裝有鴨嘴式飲水器，供自由飲水。分別于試驗開始和結束時對所有試豬清晨空腹稱重，計算各階段每組的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）及飼料轉化率（FCR）。從試驗開始到結束，每天觀察并記錄豬群的健康狀況記錄腹瀉個體和持續(xù)時間，計算腹瀉率。

1.5 檢測指標

1.5.1 血樣采集

在試驗結束的清晨空腹前腔靜脈采血10 mL，取1 mL EDTA－2Na抗凝，全血測定血常規(guī)，另外9 mL血液靜止30 min，在4 000 rpm離心15 min制備血清，置于－20℃?zhèn)溆谩?/p>

1.5.2 血清生化指標的測定

由圖1和圖2可知，全國大部分地區(qū)Cd污染較為嚴重，而Cr和Ni污染較輕，這與表4表5評價結果一致?？傮w而言，除 Zn之外，非工業(yè)區(qū)和工業(yè)區(qū)的重金屬污染嚴重區(qū)域有相同的分布規(guī)律，即人口較多、工業(yè)集中、經(jīng)濟發(fā)達的中東部地區(qū)的降塵中重金屬含量普遍高于人口稀少、發(fā)展滯后的西部地區(qū)。不同之處在于，工業(yè)區(qū)中重金屬的污染情況更為嚴重且區(qū)域多集中在中西部重工業(yè)基地以及有色金屬礦區(qū)和冶煉區(qū)。

血清尿素氮（BUN）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、堿性磷酸酶（AKP）的測定均按試劑盒操作規(guī)程進行。

1.5.3 血液抗氧化指標的測定

血清超氧化物岐化酶（SOD）、總抗氧化能力（T－AOC）及丙二醛（MDA）的測定均按試劑盒說明書進行。

1.6 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0軟件進行單因素方差分析，不同組之間進行LSD多重比較，結果以平均值±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對中豬生長性能的影響

添加乳酸菌發(fā)酵酶解雜粕對中豬的ADG、ADFI和FCR影響見表2。

表2 乳酸菌發(fā)酵雜粕對中豬生長性能的影響

由表2可見，在日糧中添加乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕，均不同程度的促進了中豬的生長。與對照組相比，各試驗組ADG分別提高了4.0%、7.0%和7.3%，但差異不顯著（P＞0.05），各組ADFI差異不顯著（P＞0.05）。同時，日糧中添加發(fā)酵雜粕還有效的提高了飼料轉化率，與對照組相比，各組料肉比分別下降3.94%、6.36%和4.85%。

2.2 乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對中豬血液生理指標的影響

添加乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對試驗豬血液生理指標的影響見表3。

表3 乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對中豬血液生理指標的影響

由表3可見，對照組平均血紅蛋白濃度（MCHC）含量顯著高于試驗1組和2組（P＜0.05），但與試驗3組差異不顯著（P＞0.05），其余各生理指標各組間差異均不顯著（P＞0.05）。

2.3 乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對中豬血液生化指標的影響

乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對中豬血液生化指標的影響見表4。

表4 乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對中豬血液生化指標的影響

由表4可見，乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕能夠提高試驗豬血液總蛋白和白蛋白含量，試驗3組（全發(fā)酵雜粕組）的TP、ALB含量最高。同時，發(fā)酵雜粕能夠顯著降低血清BUN的含量（P＜0.05）。試驗 2組和 3組的AKP值顯著低于試驗1組和對照組（P＜0.05），而對照組和試驗 1組差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對中豬血液抗氧化指標的影響

乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對中豬血液抗氧化指標的影響見表5。

表5 乳酸菌酶解發(fā)酵雜粕對中豬血液生化指標的影響

由表5可知，日糧中添加乳酸菌發(fā)酵雜粕可提高血漿SOD和T－AOC活性并且顯著降低血漿中MDA濃度（P＜0.05）。即乳酸菌發(fā)酵雜粕能夠提高試驗豬抗氧化酶活性，增強機體的抗氧化能力。

3 討論

乳酸菌發(fā)酵飼料可提高豬生長性能的機制可能是乳酸菌發(fā)酵雜粕中含有大量的乳酸菌，其可在腸道內(nèi)大量增殖，產(chǎn)生大量乳酸，使pH降低，激活胃蛋白酶原并使胃蛋白酶活性提高，從而提高對飼料蛋白質(zhì)的消化率；飼喂有益微生物可競爭性抑制病原體附到腸細胞上，有助于動物建立正常微生物區(qū)系，排除和抑制潛在病原菌；雜粕類蛋白的結構十分緊密，分子量大，不易被機體消化吸收[2－4]。經(jīng)發(fā)酵處理后，大分子的蛋白質(zhì)被降解為小分子的蛋白和肽類，可被小腸完整而有效地吸收，減少了大腸后段氨氣和有毒胺類的產(chǎn)生。特別是一部分作為營養(yǎng)調(diào)控物質(zhì)的生理活性小肽，可直接作為神經(jīng)遞質(zhì)間接刺激腸道激素受體或促進酶的分泌，從而促進小腸發(fā)育，并使小腸的免疫功能和吸收能力得到加強，有利于營養(yǎng)物質(zhì)在機體內(nèi)沉積，最大限度地發(fā)揮其生產(chǎn)潛能[5]。

血液是動物機體重要的內(nèi)環(huán)境之一，又是物質(zhì)在機體內(nèi)與外界環(huán)境交換的媒介。血液生化指標可反映出豬各組織器官的功能、營養(yǎng)代謝和生產(chǎn)性能。血清總蛋白是動物的免疫學檢測指標之一，含量的高低直接反映出飼料狀況、生長發(fā)育及生理狀況。在某種程度上受飼料蛋白質(zhì)的影響。在一定范圍內(nèi)血清總蛋白含量升高，表明蛋白合成代謝加強，使其與組織蛋白質(zhì)保持動態(tài)平衡的正向作用加強。血清白蛋白由肝臟合成，是機體蛋白質(zhì)的一個來源，可用于修補組織和提供能量。血液中的BUN是通過鳥氨酸循環(huán)合成，是蛋白質(zhì)、氨基酸代謝的終產(chǎn)物，其濃度受飼料中蛋白質(zhì)、氨基酸量與質(zhì)的影響，其含量與體內(nèi)氮沉積率、蛋白質(zhì)或氨基酸的利用率呈顯著負相關。因此，BUN可以準確反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況，較低的BUN表明氨基酸平衡好，機體蛋白質(zhì)合成率較高。從血清總蛋白、白蛋白和BUN的含量來看，乳酸菌發(fā)酵雜粕可使中豬血漿中總蛋白和白蛋白的含量升高，而尿素氮的含量顯著降低（P＜0.05），說明發(fā)酵酶解雜粕可提高試驗豬對蛋白質(zhì)和氨基酸的利用率。

機體抗氧化能力的強弱與健康程度存在著密切關系。機體抗氧化防御系統(tǒng)主要由抗氧化酶類和抗氧化劑構成，包括SOD、GSH－Px、CAT等酶類和VE、VC、類胡蘿卜素、氨基酸等。防御體系各成分之間能夠相互協(xié)調(diào)、相互代償、相互依賴共同發(fā)揮抗氧化作用。動物機體內(nèi)SOD在清除自由基、抗氧化損傷和維持細胞的結構方面起重要作用。

4 結論

在中豬日糧中添加乳酸菌發(fā)酵酶解雜粕具有明顯的促生長作用，可提高平均日增重7.0%～7.3%，料肉比下降4.85%～6.36%；發(fā)酵雜粕可以替代豆粕在中豬生產(chǎn)中使用，其對其血液生理指標無影響，還可顯著促進了機體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成，提高對蛋白質(zhì)和氨基酸的利用率；發(fā)酵雜粕具有顯著的抗氧化性，能夠提高抗氧化酶的活性，增強機體的抗氧化能力。

[1]李德發(fā).豬的營養(yǎng)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)科學技術出版社,2003.

[2]王乃富.乳酸菌發(fā)酵酶解豆粉及其生物活性研究[D].無錫:江南大學,2007.

[3]張艷銘,甄二英.豆粕替代物在畜禽飼料中的應用[J].飼料博覽,2005（9）:26－28.

[4]楊偉春,尹遜慧,劉偉.菜籽粕的營養(yǎng)特性及其在畜禽生產(chǎn)中的研究與應用[J].廣東飼料,2009,18（1）:36－39.

[5]孫林.微生物固態(tài)發(fā)酵菜籽粕的研究[D].合肥:安徽農(nóng)業(yè)大學,2008.