張琴，王少麗，楊愿愿，董鈞鋒

（1.河南科技大學(xué)植物保護(hù)系，洛陽，471003；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所）

氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾敏感基線的測定和幼蟲體重的影響

張琴1，王少麗2，楊愿愿1，董鈞鋒1

（1.河南科技大學(xué)植物保護(hù)系，洛陽，471003；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所）

田間采集的甜菜夜蛾室內(nèi)飼養(yǎng)20代后，以飼料混毒法測定了氯蟲苯甲酰胺對其3齡幼蟲的毒力。結(jié)果表明，藥劑處理 48 h 和 72 h 后，LC50值分別為 0.747 5 mg/L 和 0.218 2 mg/L。 藥后 48 h，在最低濃度（0.004 3 mg/L）處理下，甜菜夜蛾幼蟲體重略高于對照，但未差異顯著水平，隨著處理濃度的提高，幼蟲體重顯著降低。本研究為氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾的毒力提供了可參考的敏感基線，同時表明其對甜菜夜蛾具有較高的殺蟲活性。

氯蟲苯甲酰胺；甜菜夜蛾；敏感基線；幼蟲體重

氯蟲苯甲酰胺是美國杜邦公司開發(fā)上市的一種鄰甲酰胺基苯甲酰胺類高效廣譜殺蟲劑，可防治常見的鱗翅目害蟲和部分其他害蟲[6,7]。其作用機(jī)理是激活害蟲魚尼丁受體，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)源鈣離子釋放失控，使肌肉細(xì)胞的收縮功能難以為繼[8]。經(jīng)氯蟲苯甲酰胺處理后的害蟲表現(xiàn)為進(jìn)食迅速停止、反胃和肌肉癱瘓，直至死亡。氯蟲苯甲酰胺對非靶標(biāo)節(jié)肢動物具有良好的選擇性，對哺乳動物、魚類和鳥類的毒性極低，對作物也十分安全，是一種環(huán)境友好、作用機(jī)理獨(dú)特的新型殺蟲劑。

對害蟲進(jìn)行化學(xué)防治之前，需要監(jiān)測害蟲對特定殺蟲劑的抗藥性程度，這是指導(dǎo)殺蟲藥劑合理使用的重要依據(jù)，但任何一種抗性監(jiān)測方法都必須首先建立敏感毒力基線，將其作為參比的標(biāo)準(zhǔn)[9]。氯蟲苯甲酰胺作用機(jī)制獨(dú)特，因此在大田應(yīng)用初期，害蟲對其應(yīng)該均處于敏感狀態(tài)。本研究于2009年度采集田間甜菜夜蛾的自然種群，室內(nèi)飼養(yǎng)20代后，測定了氯蟲苯甲酰胺對其幼蟲的毒力活性，建立了甜菜夜蛾對該藥劑的敏感基線，同時測定了經(jīng)氯蟲苯甲酰胺處理后，甜菜夜蛾幼蟲體重的變化，以期為以后甜菜夜蛾對氯蟲苯甲酰胺的抗性監(jiān)測和抗性治理工作提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試藥劑為20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑，美國杜邦公司生產(chǎn)。

甜菜夜蛾試蟲采自河南洛陽郊區(qū)大蔥田，室內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)20代以上。養(yǎng)蟲室內(nèi)溫度為25～28℃，相對濕度為 60%～70%，光周期為 L∶D＝18 h∶6 h。 初孵幼蟲在塑料養(yǎng)蟲盒（直徑10 cm，高2.3 cm）內(nèi)群體飼養(yǎng)，每盒100頭左右，3齡后單獨(dú)飼養(yǎng)于平底指形管內(nèi)。甜菜夜蛾幼蟲飼養(yǎng)以人工飼料，主要成分為熟大豆粉、麥胚粉和抗壞血酸等?；己蟮?天把蛹從指形管內(nèi)取出，經(jīng)4%甲醛水溶液消毒15 min，用自來水沖洗并晾干后放入羽化籠內(nèi)待羽化。成蟲羽化后轉(zhuǎn)入交配籠內(nèi)，籠內(nèi)懸掛塑料紙供成蟲產(chǎn)卵，以10%的蜂蜜水補(bǔ)充營養(yǎng)。

1.2 室內(nèi)毒力測定

采用飼料混毒法。按照常規(guī)方法制作甜菜夜蛾幼蟲人工飼料，待飼料溫度降至40℃時，分別加入不同濃度的氯蟲苯甲酰胺水溶液，用電動九陽料理機(jī)攪拌60 s后迅速倒入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，制成不同濃度的混毒飼料，冷卻后放入4℃冰箱內(nèi)備用。

甜菜夜蛾初孵幼蟲在常規(guī)人工飼料上飼養(yǎng)至2齡末，挑選生長一致的試蟲單獨(dú)置于空的指形管內(nèi)，塞緊棉塞以防逃逸。待幼蟲蛻皮進(jìn)入3齡后饑餓3～6 h，然后飼以系列濃度的混毒飼料。共設(shè)置5個濃度，每個濃度設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)處理試蟲30頭，以飼喂常規(guī)人工飼料為空白對照，試驗條件同飼養(yǎng)條件。以試蟲身體明顯縮短、用毛筆尖輕觸不能協(xié)調(diào)運(yùn)動為死亡標(biāo)準(zhǔn)，處理48 h和72 h時檢查幼蟲死亡情況，計算死亡率。

1.3 藥劑處理后幼蟲體重的測定

氯蟲苯甲酰胺處理甜菜夜蛾試蟲的方法同室內(nèi)毒力測定方法。處理48 h和72 h后，在電子天平上分別稱取各系列藥劑濃度下存活的全部幼蟲體重。

1.4 數(shù)據(jù)分析

幼蟲死亡率數(shù)據(jù)經(jīng)Probit軟件處理，求出藥劑毒力回歸曲線、計算LC50值及95%置信限等。幼蟲體重數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS13.0軟件進(jìn)行方差分析，并用 Duncan’s的新復(fù)極差法 （P=0.05）檢驗其差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測定

氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾3齡幼蟲有較高的殺蟲活性，在2.666 7 mg/L濃度下，處理10～30 min即停止取食，并伴有嘔吐現(xiàn)象。由表1可以看出，處理48 h后，氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾3齡幼蟲的LC50為0.747 5 mg/L，處理72 h后，藥劑毒力顯著增加，LC50降為0.218 2 mg/L，比48 h時的LC50值下降了70.8%。

2.2 不同濃度氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾3齡幼蟲體重的影響

不同濃度氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾3齡幼蟲體重的影響見表2。從表2可以看出，藥后48 h，在最低藥劑濃度（0.004 3 mg/L）處理下，幼蟲體重略高于對照，但未達(dá)到顯著水平；隨著處理濃度的提高，幼蟲體重顯著降低。最高濃度（2.666 7 mg/L）處理下，存活的甜菜夜蛾幼蟲體重僅為1.16 mg，而空白對照處理下，體重為6.36 mg。藥后72 h，不同濃度氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾3齡幼蟲的體重均有顯著的影響，幼蟲體重隨藥劑濃度的提高呈下降趨勢，最高濃度處理下，幼蟲體重僅為1 mg。取食對照飼料48 h至72 h，甜菜夜蛾3齡幼蟲生長迅速，24 h內(nèi)體重由6.36 mg增長到了 8.92 mg，增加了40.3%。取食混毒飼料48 h至72 h，僅在0.106 7 mg/L濃度下，甜菜夜蛾幼蟲體重增加了5.6%，在其他濃度下，均保持不變或略有降低。

3 結(jié)論與討論

氯蟲苯甲酰胺作用于害蟲的肌肉組織，見效快，高濃度下10～20 min甜菜夜蛾幼蟲即停止取食并伴有嘔吐、身體卷曲縮短等中毒癥狀，但死亡過程較為緩慢，低濃度下，從出現(xiàn)中毒癥狀到徹底死亡可持續(xù)5～10 d，所以在試驗過程中，判斷害蟲的死亡標(biāo)準(zhǔn)尤為關(guān)鍵。陳煥瑜等[10]以輕觸蟲體不能協(xié)調(diào)運(yùn)動為小菜蛾幼蟲死亡標(biāo)準(zhǔn)，測出氯蟲苯甲酰胺處理48 h后對小菜蛾3齡幼蟲的LC50為0.808 mg/L；而程東美等[11]以輕觸蟲體不動作為判斷小菜蛾幼蟲死亡標(biāo)準(zhǔn)，測出氯蟲苯甲酰胺處理48 h后對小菜蛾 3齡幼蟲的LC50為 13.90 mg/L，兩者相差 16.2倍。經(jīng)過多次觀察比較，作者以甜菜夜蛾幼蟲身體明顯縮短、輕觸不能協(xié)調(diào)運(yùn)動為幼蟲死亡標(biāo)準(zhǔn)。按照這個標(biāo)準(zhǔn)判定死亡的甜菜夜蛾幼蟲即使轉(zhuǎn)移到寄主葉片或者對照人工飼料上也不能存活，因此這個標(biāo)準(zhǔn)適合作為死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)，但需要研究者細(xì)心觀察、謹(jǐn)慎判定。

表1 氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾3齡幼蟲的室內(nèi)毒力測定

表2 不同濃度氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾3齡幼蟲體重的影響

室內(nèi)毒力測定選用的甜菜夜蛾3齡初幼蟲均進(jìn)行了饑餓處理。研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加高濃度的氯蟲苯甲酰胺時，甜菜夜蛾幼蟲很快停止取食并出現(xiàn)中毒癥狀，而藥劑含量較低時幼蟲取食量較大，生長發(fā)育較快，但取食一段時間后絕大部分幼蟲停止取食，個別幼蟲可以繼續(xù)取食而存活下來。所以在田間進(jìn)行防治時要選用較高濃度藥劑進(jìn)行噴施，防止害蟲對葉片過多取食，造成品質(zhì)下降和產(chǎn)量損失。

本研究測定了氯蟲苯甲酰胺對甜菜夜蛾3齡幼蟲的敏感度，可作為以后進(jìn)行抗性監(jiān)測時的參考敏感基線。氯蟲苯甲酰胺是一種作用機(jī)理獨(dú)特的新型殺蟲劑，在實(shí)驗室條件下對甜菜夜蛾3齡幼蟲表現(xiàn)出較高的殺蟲活性，而且使幼蟲身體縮短，體重降低，極大地減弱了其幼蟲的生長，是防治甜菜夜蛾的理想殺蟲劑，但其在田間的實(shí)際防治效果尚需進(jìn)一步試驗研究。

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Effects of Chlorantraniliprole on Baseline Sensitivity and Weight of Larval ofSpodoptera exigua

ZHANG Qin1,WANG Shao1i2,YANG Yuanyuan1,DONG Junfeng1
(1.Department of P1ant Protection,Henan University of Science and Techno1ogy,Luoyang 471003;2.Institute of Vegetab1es and F1owers,Chinese Academy of Agricu1tura1 Sciences)

Beet armyworm,Spodoptera exigua,were co11ected from the fie1d and reared in 1aboratory for 20 generations,and the sensitivity of 3th 1arvae ofS.exiguato ch1orantrani1ipro1e was investigated.The resu1ts showed that LC50va1ues were 0.747 5 mg/L and 0.218 2 mg/L after insecticide treatment for 48 h and 72 h.The 1arva1 weight ofS.exiguais a 1itt1e higher than the contro1 after ch1orantrani1ipro1e treatment with the 1owest concentration (0.004 3 mg/L)for 48 h.However,there was significant difference between treatment and contro1 with the increase of ch1orantrani1ipro1e concentration.This study provided base1ine for the susceptibi1ity of S.exigua to ch1orantrani1ipro1e and revea1ed its higher toxicity to this insect.

Ch1orantrani1ipro1e;Spodoptera exigua;Base1ine sensitivity;Weight of 1arva1

10.3865/j.issn.1001-3547.2010.18.028

公益性行業(yè)科研專項（200803007）和北京市自然科學(xué)基金項目（6102021）

張琴（1985-），女，碩士研究生，研究方向為蔬菜害蟲防治

2010-06-22