閆文婧
筆者所在醫(yī)院于2002~2008年從標本中分離到21株馬紅球菌,現(xiàn)就其分離鑒定、藥敏試驗,以及在臨床標本中的分布特點報告如下。
1.1 標本來源 2002~2008年臨床科室送檢的標本,包括痰液、尿液、血液、胸水和創(chuàng)面分泌物。
1.2 培養(yǎng)基及藥敏紙片 血平板、M-H瓊脂及藥敏紙片均有法國梅里埃公司生產(chǎn),部分培養(yǎng)基醫(yī)院自備。
1.3 細菌培養(yǎng)及鑒定 儀器法:用法國梅里埃公司生產(chǎn)的半自動ATB expression鑒定;手工法:嚴格按文獻[1]操作,用杭州天和微生物有限公司生產(chǎn)的微量生化鑒定管進行鑒定。兩種方法所測結(jié)果一致。藥敏試驗用K-B法,并用金黃色葡萄球菌ATCC25923、糞腸球菌ATCC29212標準菌株進行質(zhì)量控制,判斷標準依據(jù)NCCLS規(guī)定。
2.1 細菌鑒定 各種標本均接種于血平板35℃培養(yǎng)18~24 h后,生長出21株生物學性狀如下的細菌:菌落直徑0.5 mm左右,黏液狀,表面光滑、濕潤,邊緣整齊,大部分菌落產(chǎn)生桔紅色或橙紅色色素。放置48~72 h后,菌落增大到1~2 mm,色素更加明顯。新鮮菌落涂片革蘭染色為陽性、卵圓形短桿菌,無鞭毛,無芽孢,抗酸染色部分陽性。陳舊培養(yǎng)物以球形為主。21株細菌經(jīng)ATB Expression系統(tǒng)鑒定全部為馬紅球菌。其鑒定百分率>99.99%的15株,百分率在97.30%~99.99%的4株,百分率在95.30%~97.29%的4株。手工法做21株細菌的生化反應如下:觸酶陽性,硫化氫、七葉苷、動力、肌醇、甘露醇、鼠李糖、山梨醇、蔗糖、枸櫞酸鹽、木糖、尿素、硝酸鹽還原均陰性。與質(zhì)控菌株ATCC25923,可形成CAMP樣反應。
2.2 藥敏試驗 用K-B法檢測,對萬古霉素、利福平、氧氟沙星和環(huán)丙沙星無耐藥菌株(0,0%);對頭孢三嗪、頭孢他啶無耐藥各為1株占4.7%;另外,對氯霉素、阿米卡星、頭孢唑啉和青霉素G無耐藥分別為3株占14.2%、7株占33.3%、14株占66.7%、20株占95.2%。
2.3 菌種分布 21株馬紅球菌,來源于痰液10株,占47.61%;尿液6株,占28.57%;血液3株,占14.28%;創(chuàng)面分泌物1株,占4.7%;胸水1株,占4.7%。各種標本均排除污染菌的可能。需要說明的是:21株馬紅球菌中,在2個月至10歲兒童有15株,占71.42%。
據(jù)文獻報道,馬紅球菌存在于土壤中,是馬、豬、牛等動物的致病菌,曾從小馬肺部、馬生殖道及豬的次頜骨線中分離出。該菌引起人類致病較少見,易引起艾滋病、血液病、腎移植等患者的肺部感染。馬紅球菌感染的患者,臨床均有持續(xù)高熱,重度感染,免疫系統(tǒng)受損等特點[2]。
與其它菌的區(qū)別主要有,觸酶陽性、硫化氫陰性可與紅斑丹毒菌區(qū)別;不發(fā)酵糖醇類于棒狀桿菌屬區(qū)別;觸酶陽性、七葉苷陰性可與腸球菌屬區(qū)別;無動力、不發(fā)酵糖醇類、不能水解七葉苷可與李斯特菌區(qū)別;細菌的菌落形態(tài)和菌體形態(tài)可與奴卡菌區(qū)別。
關于其耐藥性特點,臨床上馬紅球菌感染,環(huán)丙沙星、氧氟沙星、頭孢三嗪、氯霉素和利福平等抗生素具有高度敏感性。臨床常推薦聯(lián)合抗菌藥物治療,以產(chǎn)生協(xié)同作用。細菌耐藥性是一個全球性問題,國內(nèi)外報道均認為,細菌耐藥性增加與抗生素應用有關[2]。對臨床抗生素的應用,應根據(jù)藥敏試驗結(jié)果選用,同時加強抗生素使用的管理??裳泳徏毦退幮缘漠a(chǎn)生。
從本組臨床分布看,其感染可以是多部位的,如呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、傷口、胸腔等。其中呼吸系統(tǒng)感染占第一位為47.61%,其次是泌尿系統(tǒng)感染占28.57%。因此在進行痰液、尿液標本的細菌培養(yǎng)時,應注意該菌的檢出。由于上述兩種標本有時雜菌種類較多,可被誤導,尤其是該菌生長緩慢,培養(yǎng)18~24 h后菌落較小,產(chǎn)生色素不明顯,故容易漏檢。因此,為了提高陽性率,筆者認為,在對痰液、尿液標本細菌培養(yǎng)18~24 h,結(jié)果陰性者,應將平板放置48~72 h后再觀察,以提高檢出率。另外,21株馬紅球菌來源于2個月至10歲兒童有15株,占71.42%。這可能與兒童的免疫系統(tǒng)還沒有發(fā)育完全,免疫力弱有關。
[1]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006.789-791.
[2]張鳳凱,金少鴻,吳 銓,等.北京地區(qū)醫(yī)院細菌對常見抗生素耐藥性現(xiàn)狀及變遷[J].中華醫(yī)學雜志,1997,77(6):327-328.