武 靜

(泰安市婦幼保健院檢驗(yàn)科，山東 泰安 271000)

手足口病是由腸道病毒(以柯薩奇A群16，EV71型多見(jiàn))引起的急性傳染病，多發(fā)生于學(xué)齡前兒童，尤以3歲以下年齡組發(fā)病率最高。普通病例多表現(xiàn)急性起病、發(fā)熱、口腔黏膜出現(xiàn)散在皰疹，手、足和臀部出現(xiàn)斑丘疹、皰疹，皰疹周圍可有炎性紅暈，皰內(nèi)液體較少。可伴有咳嗽、流涕、食欲不振等癥狀。部分病例僅表現(xiàn)為皮疹或皰疹性咽峽炎。重癥病例可出現(xiàn)腦炎、腦脊髓炎、腦膜炎、肺水腫、循環(huán)衰竭等。

1 臨床資料

1.1一般資料 所有17例患兒均符合《手足口病預(yù)防控制指南(2008年版)》診斷標(biāo)準(zhǔn)，男3例，女14例，年齡5個(gè)月～9歲，平均32.82±24.40月，均來(lái)自我院2009年4月份住院病人。對(duì)照組17例，男10例，女7例，年齡16個(gè)月～5歲，平均34.00±9.87月，為同期本院體檢健康兒童，無(wú)任何疾病史。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集 抽取手足口患兒及健康兒童靜脈血各3 ml，3000 r/min離心10 min，留取血清，無(wú)菌分裝后置于-40 ℃冰箱備用。

1.2.2細(xì)胞因子的測(cè)定 IL-6、IL-10、TNF-α測(cè)定均采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn) (ELISA),應(yīng)用美國(guó)ADL(Adlitteram Diagnostic laboratories)酶聯(lián)免疫診斷試劑盒, 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，采用深圳Rayto RT-6100型酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，濃度值以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)。

1.4結(jié)果 手足口病組血清IL-6、TNF-α水平顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，兩組血漿IL-10水平比較無(wú)顯著差異(P>0.05)，見(jiàn)表1。

2 討 論

TNF-α和IL-6具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的生物學(xué)作用，其作用體現(xiàn)在兩方面[1]，一方面是機(jī)體免疫防護(hù)的重要介質(zhì)，另一方面可參與機(jī)體的免疫病理?yè)p傷。

TNF-α主要由活化單核細(xì)胞—巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,激活的中性粒細(xì)胞也能合成。正常情況下血清中濃度較低,它具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化等多種生理作用。當(dāng)細(xì)菌或病毒感染時(shí)，則可刺激單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生并釋放大量的TNF-α， TNF-α主要作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，通過(guò)增加某些粘附分子(如ICAM-1等)的表達(dá)，誘發(fā)血小板活化分子(PAF)及IL-1的釋放，而促進(jìn)炎癥細(xì)胞粘附、游走、浸潤(rùn)及中性粒細(xì)胞脫顆粒，同時(shí)通過(guò)自分泌方式作用于單核巨噬細(xì)胞本身而釋放炎癥介質(zhì)加劇炎癥反應(yīng)，引起局部的免疫反應(yīng)甚至系統(tǒng)損害[2]，病理狀態(tài)下TNF-a可損傷心功能，誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡，而且TNF-a血清水平的變化與多種心臟疾病有關(guān)。

IL-6是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子[3]，主要是由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生，來(lái)源于所有經(jīng)過(guò)TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞和組織，可調(diào)節(jié)多種組織細(xì)胞的生長(zhǎng)與分化，為炎癥反應(yīng)的主要調(diào)節(jié)介質(zhì),參與血管的炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答、造血、腫瘤等生物學(xué)過(guò)程[4]。與其他因子一起構(gòu)成復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)，調(diào)整免疫與應(yīng)激反應(yīng),而且與臨床諸多疾病的病理變化密切相關(guān)。在通常情況下，正常人血清中含有的微量IL-6，認(rèn)為是內(nèi)皮細(xì)胞持續(xù)分泌的結(jié)果，在炎癥、感染和患有某些腫瘤等情況下，血清中IL-6的含量會(huì)有不同程度上升。細(xì)胞因子異常產(chǎn)生常是許多疾病的誘發(fā)或促進(jìn)因素。它能誘導(dǎo)纖維蛋白元啟動(dòng)凝血因子,使血管炎癥部位纖維母細(xì)胞增生,膠原沉積。當(dāng)患兒受到病毒侵襲時(shí),由于分泌性免疫球蛋白A水平降低,清除能力降低,使體內(nèi)的細(xì)胞因子通過(guò)血液運(yùn)輸?shù)綑C(jī)體的各個(gè)部位,導(dǎo)致血清IL-6水平的增高。在創(chuàng)傷和炎癥過(guò)程中，IL-6不僅激活中性粒細(xì)胞，而且還能延遲吞噬細(xì)胞對(duì)衰老和喪失功能的中性粒細(xì)胞的吞噬，從而加劇了創(chuàng)傷后炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，IL-6的大量釋放對(duì)患者是一個(gè)危險(xiǎn)的信號(hào)。

IL-10是一種具有多重功效的炎癥抑制性細(xì)胞因子，主要由Th2淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞、活化的B細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞產(chǎn)生，其主要生物學(xué)活性是免疫抑制作用，能抑制單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等產(chǎn)生促炎性因子和趨化因子，抑制IL-1、 IL-6、 IL-8、TNF等的釋放，可能有促進(jìn)粘膜炎癥消散的作用。抑制抗原刺激的細(xì)胞免疫反應(yīng)，延遲T、B細(xì)胞凋亡，并可能增加反復(fù)或持續(xù)的微生物侵襲的易感性。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示手足口病患者血漿IL-6、TNF-α水平顯著增高，說(shuō)明IL-6、TNF-α參與了HFMD的病理生理過(guò)程，監(jiān)測(cè)它們的水平變化對(duì)指導(dǎo)臨床實(shí)踐、觀察治療效果和預(yù)后觀察均具有十分重要的臨床價(jià)值。IL-10水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能是由于細(xì)胞因子具有速效性特點(diǎn)，一般不是預(yù)先合成儲(chǔ)存于細(xì)胞內(nèi)，其基因的轉(zhuǎn)換和分子的合成與釋放極其快捷，同時(shí)mRNA分子不穩(wěn)定易分解，而且細(xì)胞因子半衰期很短，所以細(xì)胞因子的作用時(shí)間很短，由于病人從發(fā)病到抽血檢驗(yàn)已有一段時(shí)間，很可能錯(cuò)過(guò)了細(xì)胞因子釋放的高峰時(shí)期，所以研究仍需加大樣品例數(shù)。

[1] 蔡意和.支氣管肺炎患兒治療前后血清SOD、TNF和T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)的臨床意義[J]. 放射免疫學(xué)雜志,2004,17(1):9-10.

[2] 何予工,阮翹,常學(xué)民,等.超短波輔治支氣管肺炎患兒前后血清細(xì)胞因子的變化[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2006,21(4):220-221.

[3] 錢建剛,馬云寶,張曉懿.支氣管肺炎患兒血清6種細(xì)胞因子測(cè)定[J]. 放射免疫學(xué)雜志,2005,18(5):333-335.

[4] SongM,Kellum JA.Interleukin-6[J].Crit Med,2005,33:463-465.