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        Ⅱ型糖尿病大鼠神經(jīng)視網(wǎng)膜組織中差異蛋白質(zhì)分析

        2010-04-12 00:00:00王亞童明慶崔毓貴張民英
        分析化學(xué) 2010年10期

        摘要 以高脂飲食聯(lián)合小劑量鏈脲菌素(Streptozotocin, STZ ) 注射方法誘導(dǎo)大鼠II型糖尿病 (T2DM) 模型為研究對象, 采用比較蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)鑒定和分析早期糖尿病神經(jīng)視網(wǎng)膜差異表達(dá)蛋白。通過聯(lián)用液氮內(nèi)研磨、冰浴超聲、高速離心提取全蛋白技術(shù),提取每只大鼠神經(jīng)視網(wǎng)膜全蛋白質(zhì)總量約900 μg。采用雙向凝膠電泳(2DE) 分離技術(shù),獲得2500個(gè)以上可辯認(rèn)的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)。通過蛋白質(zhì)組學(xué)比對技術(shù)篩選出糖尿病狀態(tài)下神經(jīng)視網(wǎng)膜差異表達(dá)蛋白,用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜 (MALDITOF MS/MS) 和肽質(zhì)量指紋圖譜 (PMF) 鑒定出20個(gè)差異蛋白點(diǎn)。按照Gene Ontology (GO)分類體系,對差異蛋白歸類分析,揭示其亞細(xì)胞定位和分子功能。應(yīng)用Pathway Studio軟件對差異表達(dá)蛋白的生物學(xué)意義進(jìn)行分析,認(rèn)為凋亡是早期糖尿病視網(wǎng)膜病變(Diabetic retinopathy,DR) 重要的細(xì)胞事件;AnnexinΙ、CRYAB、mtHsp70蛋白是與病理過程相關(guān)的關(guān)鍵蛋白,對研究DR致病機(jī)制有重要意義。

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