周騰堅(jiān)

Coulter LH750(以下簡(jiǎn)稱LH750)是貝克曼庫(kù)爾特公司推出的高層次的全自動(dòng)五分類血液細(xì)胞分析儀。有5種不同的分析模式，每小時(shí)最高分析速度為110個(gè)樣本，能提供31項(xiàng)細(xì)胞分析參數(shù)，白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖及各種懷疑性、限定性旗標(biāo)。LH750基于先進(jìn)的V(電阻抗)、C(高頻傳導(dǎo))、S(激光散射)技術(shù)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行精確的分類。并可進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)及分類。作者所在科室于2008年4月引進(jìn)LH750分析儀一臺(tái)，至今已有一年半的時(shí)間，該儀器的使用大大提高了實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的分析速度和工作效率。但是在實(shí)際使用過(guò)程中由于各種主客觀因素的影響，降低了測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性?，F(xiàn)將我們?cè)谌粘９ぷ髦蠰H750的一些使用及常見(jiàn)故障排除情況總結(jié)如下，以便與使用該儀器的同行共同探討。

1 使用

1.1 標(biāo)本 標(biāo)本須由靜脈穿刺取得，不提倡毛細(xì)血管采血法。盛裝的試管有真空采血試管和非真空試管。推薦使用真空采血管，所注入血液的量必須達(dá)到刻度線以上，以保證儀器在吸樣過(guò)程中有足夠的血細(xì)胞供分析。必須充分抗凝，上機(jī)前再次顛倒混勻，既可以使試管內(nèi)的血液均勻分布，還可以在混勻過(guò)程中檢查血液中有無(wú)明顯凝塊，以免堵塞吸樣針。

1.2 抗凝劑 使用EDTA-K2抗凝劑，其對(duì)細(xì)胞形態(tài)和血小板計(jì)數(shù)的影響較小。作者所在實(shí)驗(yàn)室曾發(fā)生因血常規(guī)試管中加入了枸櫞酸鈉而造成血液部分凝固血小板計(jì)數(shù)明顯降低的差錯(cuò)事故，給了全科人員一次深刻的教訓(xùn)。

1.3 樣本編號(hào) LH750英文工作站提供兩種不同的編號(hào)方式。方式一：在主界面上點(diǎn)擊添加樣品請(qǐng)求→自動(dòng)編號(hào)順序→添加此樣品要求，此方法準(zhǔn)確可靠，不易跳號(hào)。方式二：點(diǎn)擊分析配置→自動(dòng)編號(hào)→起始為，此方法簡(jiǎn)便快捷，但容易跳號(hào)，因此需要操作者注意。

1.4 質(zhì)控 儀器自檢程序完成后，觀察各項(xiàng)參數(shù)及空白值。合格后再進(jìn)行每日的質(zhì)控物測(cè)定，只有質(zhì)控物測(cè)定值符合要求方可進(jìn)行常規(guī)標(biāo)本的測(cè)定。

1.5 上機(jī) 將編好的血常規(guī)試管按順序放入儀器的試管架中，2小時(shí)內(nèi)進(jìn)行自動(dòng)測(cè)定。需要注意的是標(biāo)本的靜置時(shí)間不宜過(guò)久。標(biāo)本久置后，試管中血液會(huì)出現(xiàn)分層現(xiàn)象，造成血液局部滲透壓差異，影響血細(xì)胞體積及有核細(xì)胞內(nèi)顆粒分布情況，造成血細(xì)胞分類不準(zhǔn)確。最明顯的即嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)出現(xiàn)假性升高，出現(xiàn)這種情況后，建議將標(biāo)本顛倒混勻后靜置10分鐘，待血液細(xì)胞所處內(nèi)環(huán)境恢復(fù)穩(wěn)定再行測(cè)定。

2 結(jié)果審核

2.1 在儀器測(cè)定過(guò)程中，需要對(duì)各個(gè)標(biāo)本的分類計(jì)數(shù)情況進(jìn)行仔細(xì)的分析，以確定報(bào)告的可靠性。在患者測(cè)試界面的Diff數(shù)據(jù)頁(yè)面，細(xì)胞計(jì)數(shù)一項(xiàng)顯示數(shù)字在8000以上時(shí)分類的結(jié)果更可靠。

2.2 分析散點(diǎn)圖 對(duì)于散點(diǎn)圖中各種不正常的點(diǎn)陣分布要有一定的警惕性，結(jié)合可疑性旗標(biāo)進(jìn)行綜合分析和判斷，必要時(shí)采用手工鏡檢。認(rèn)真觀察分析散點(diǎn)圖對(duì)于原始幼稚細(xì)胞、有核紅細(xì)胞和瘧原蟲的檢出很有幫助。

2.3 分析直方圖 通過(guò)紅細(xì)胞直方圖的分析，對(duì)缺鐵性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、再障及地中海貧血的診斷提供初步的實(shí)驗(yàn)室證據(jù)。有擬合曲線的血小板直方圖其結(jié)果可靠性高。

3 LH750常見(jiàn)故障及排除

3.1 在主機(jī)屏幕上出現(xiàn)“LOWVCUUM DRIFTED”。原因：由于空氣中的灰塵等原因，0號(hào)口完全或不完全被堵住，造成6英寸負(fù)壓(6”)漂移。處理：按儀器鍵盤F-9-2-ENTER，調(diào)整負(fù)壓水平至6.000。若無(wú)法調(diào)整，可能堵塞嚴(yán)重所致，需將調(diào)節(jié)閥拆下進(jìn)行清洗。從0號(hào)孔注蒸餾水，從1號(hào)孔出來(lái)，將調(diào)節(jié)閥甩干，干燥后裝回。

3.2 主機(jī)屏幕提示“BED NOT ADVANCED” 原因：搖床皮帶因異物粘附或機(jī)械原因前進(jìn)緩慢，甚至停止。處理：主機(jī)鍵盤上按F-9-6-ENTER，觀察搖床皮帶滾動(dòng)是否有規(guī)律，清楚粘附的血塊，必要時(shí)拆下?lián)u床，清洗搖床皮帶及其下面的控制活塞組件，裝回。

3.3 主機(jī)屏幕提示“BACKWASH TANK NOT FULL”處理：按儀器鍵盤F-3-0-ENTER，如果灌注的速度比較慢，則是高負(fù)壓不足，處理高負(fù)壓管道。如果灌注時(shí)進(jìn)來(lái)氣泡，可能是VC28瓶子破裂，更換之。

3.4 主機(jī)屏幕提示“ASPIRATION TIME OUT” 原因：自動(dòng)進(jìn)樣針超過(guò)5秒鐘還沒(méi)有進(jìn)行穿刺動(dòng)作。處理：檢查電源箱的30PSI壓力，將其調(diào)節(jié)在正常范圍內(nèi)。

3.5 VACUUN OVERFLOW TANK 負(fù)壓溢流瓶，是儀器高負(fù)壓的存儲(chǔ)瓶。壓力不正常時(shí)，拔掉從右側(cè)VL40閥過(guò)來(lái)的兩根圓管，并觀察氣泵的負(fù)壓指示，負(fù)壓指示13～16inchHg，說(shuō)明儀器高負(fù)壓正常。如果負(fù)壓指示大于16inchHg，負(fù)壓保護(hù)瓶頂部可能有結(jié)晶，清洗之，或重新插拔儀器VAC端。

4 心得及總結(jié)

我們認(rèn)為，在正式操作儀器前，對(duì)每位操作人員進(jìn)行系統(tǒng)的崗前培訓(xùn)是非常有必要的。通過(guò)培訓(xùn)，即可以加深操作者對(duì)儀器本身的認(rèn)識(shí)，也可以有效降低日后的失誤率，提高工作效率。

LH750雖然采用先進(jìn)的VCS技術(shù)，但是并不能完全代替手工測(cè)定，必要時(shí)進(jìn)行手工計(jì)數(shù)及分類。血細(xì)胞分析儀屬精密儀器，實(shí)驗(yàn)室的溫度濕度電源配置等必須符合儀器自身的要求，另外要特別注意控制室內(nèi)的灰塵，堅(jiān)持每天打掃實(shí)驗(yàn)室。要養(yǎng)成每天開(kāi)始工作前主動(dòng)檢查試劑情況的習(xí)慣。另外，儀器每天開(kāi)機(jī)運(yùn)行“START UP”程序，進(jìn)行自檢、清洗和空白值的測(cè)定，使每項(xiàng)參數(shù)都低于儀器設(shè)定的下限。在儀器運(yùn)行工作中，注意觀察各項(xiàng)壓力指標(biāo)是否正常，評(píng)估儀器運(yùn)行狀態(tài)，保證儀器處于最佳工作狀態(tài)。將常見(jiàn)的報(bào)警提示記錄在冊(cè)并在以后的工作中改正，相互討論操作心得。每天工作結(jié)束后，要堅(jiān)持進(jìn)行日常保養(yǎng)。總之，適宜的工作環(huán)境、良好的操作習(xí)慣和必要的保養(yǎng)工作，對(duì)于減少儀器失誤率和提高結(jié)果的可靠性起到了積極的作用。