郜俊清,趙德強(qiáng),金惠根,劉宗軍

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院心內(nèi)科,上海200062)

銀杏(Ginkgo biloba L.)在植物分類學(xué)上隸屬于裸子植物類中的銀杏科,其葉入藥在中國已有上千年的歷史。銀杏葉提取物的主要成分為黃酮類和內(nèi)酯類化合物,其中內(nèi)酯類化合物包括銀杏內(nèi)酯A、B、C、M和J。銀杏內(nèi)酯可治療中樞系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)及視覺、聽覺系統(tǒng)等疾病,而且對(duì)人類心血管疾病具有較好的治療及預(yù)防作用。本文對(duì)銀杏內(nèi)酯(Ginkgolides)在心血管方面的藥理作用及臨床運(yùn)用作一綜述。

1 傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的認(rèn)識(shí)

銀杏內(nèi)酯來源于銀杏科植物銀杏的葉片,銀杏葉古已作藥用,首載于《本草品匯精要》,認(rèn)為其具有活血化瘀,寬胸止痛作用?！吨兴幹尽?“甘苦澀,平?！薄皵糠螝?平喘咳,止帶濁。治痰喘咳嗽,白帶白濁?！眱?nèi)服:煎湯,1.5～3錢;或研末。

2 銀杏內(nèi)酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)

銀杏內(nèi)酯分子具有獨(dú)特的十二碳骨架結(jié)構(gòu),嵌有1個(gè)叔丁基和6個(gè)五元環(huán),包括1個(gè)螺壬烷,1個(gè)四氫呋喃環(huán)和3個(gè)內(nèi)酯環(huán)。當(dāng)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)中R3為羥基或羥基數(shù)目增多時(shí),銀杏內(nèi)酯的活性減弱;而當(dāng)R2為羥基且R3為H時(shí),則活性顯著增強(qiáng),其中以銀杏內(nèi)酯B對(duì)PAF產(chǎn)生的拮抗作用最強(qiáng),迄今對(duì)銀杏內(nèi)酯B的藥理作用研究也最為集中。

3 銀杏內(nèi)酯的藥理作用

3.1 抗缺血再灌注 銀杏內(nèi)酯B可以多靶點(diǎn)的對(duì)缺血再灌注損傷進(jìn)行保護(hù)[1]。采用大鼠心肌缺血再灌注模型,銀杏內(nèi)酯B對(duì)缺血再灌注心肌損害具有明顯的保護(hù)作用,能有效的降低再灌注損傷后心律失常的發(fā)生率、心肌單相動(dòng)作電位的改變;能顯著降低乳酸脫氫酶、肌酸磷酸激酶峰值的出現(xiàn)及提高超氧化物歧化酶的活性,其機(jī)制可能與拮抗PAF及抑制自由基的產(chǎn)生有關(guān)[2]。有研究[3-4]發(fā)現(xiàn),銀杏內(nèi)酯B能在缺血損傷模型中逆轉(zhuǎn)降低的左型鈣離子通道并且局部抑制鈣離子超載的作用。

3.2 抗炎 銀杏內(nèi)酯能抑制粒細(xì)胞的活性起到抗炎作用,并且其與拮抗PAF有關(guān)[5-6]。Chen等[7]使用GBE預(yù)處理人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,可以顯著地抑制人單核細(xì)胞株U937與受TNF-α刺激的人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞之間的結(jié)合,細(xì)胞酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫印跡顯示,GBE可以顯著地減少受TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞表面血管細(xì)胞黏附分子-1和細(xì)胞內(nèi)黏附分子-1的表達(dá),同時(shí)還可減少其細(xì)胞內(nèi)活性氧族的形成,電泳遷移率變動(dòng)分析表明,GBE可以抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-KB和激活蛋白1的活化。

3.3 血管內(nèi)皮及血管平滑肌調(diào)節(jié)作用 銀杏內(nèi)酯對(duì)多種刺激物誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙有著保護(hù)作用。林宇等[8]發(fā)現(xiàn),銀杏內(nèi)酯B對(duì)TNFα刺激內(nèi)皮細(xì)胞刺激引起的氧化應(yīng)激性損傷有一定的保護(hù)作用, TNFα(5 ng/mL)作用 24 h后。腦血管內(nèi)皮細(xì)胞(BVEC)中ROS的產(chǎn)生量明顯增加(P＜0.05),此作用可能是通過抑制ROS介導(dǎo)的ERK2激酶及轉(zhuǎn)錄因子AP-l的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)。陸曉茜等[9]的研究顯示,弱氧化修飾低密度脂蛋白對(duì)ECV304組織因子(TF)蛋白含量和mRNA水平的表達(dá)明顯上調(diào)、能明顯增加胞漿游離鈣離子(Ca2+),但是銀杏內(nèi)酯B能明顯抑制弱氧化修飾低密度脂蛋白的作用,對(duì)ECV304有一定的保護(hù)作用。同樣的結(jié)果[10],銀杏內(nèi)酯同樣也能抵抗因高半胱氨酸氧化應(yīng)激作用及下調(diào)eNOS作用導(dǎo)致的血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂。

血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)異常增殖、血管壁細(xì)胞外間質(zhì)組成改變導(dǎo)致的血管重構(gòu),在高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化和血管成形術(shù)后再狹窄等許多心血管疾病的發(fā)病中起著重要的作用。OXLDL能刺激血管平滑肌細(xì)胞異常增殖,對(duì)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的發(fā)生起著關(guān)鍵作用[11],在體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[12],銀杏內(nèi)酯B能抵抗OXLDL的作用,抑制血管平滑肌細(xì)胞的異常增殖。在季寧東等[13]的研究中發(fā)現(xiàn)銀杏內(nèi)酯B能拮抗血管緊張素Ⅱ?qū)ρ芷交〖?xì)胞的增殖作用。

3.4 抗心律失常 祁小燕等[14]進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),在生理?xiàng)l件下,GKB可縮短心室肌細(xì)胞動(dòng)作電位時(shí)程(APD),增大延遲整流鉀電流,且呈濃度依賴性。在缺血條件下,APD50、APD90明顯縮短,RP、APA減小, Vmax減慢,而GKB則可延緩和減輕缺血所引起上述參數(shù)的變化,且可逆轉(zhuǎn)缺血造成延遲整流鉀電流、L型鈣電流這2種離子流的減小。由此提示,GKB對(duì)抗心肌缺血所引起的心肌電生理的變化,從而預(yù)防心肌缺血所致的心律失常的發(fā)生。

3.5 抗動(dòng)脈粥樣硬化 銀杏內(nèi)酯對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化中的多個(gè)位點(diǎn)都有干預(yù)作用。陸曉茜等[9]選用動(dòng)脈粥樣硬化斑形成的早期危險(xiǎn)因素,弱氧化修飾低密度脂蛋白 40 mg/L,作為刺激因子作用于體外培養(yǎng)的ECV304細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)TF蛋白水平及mRNA水平顯著增加,且(Ca2+)迅速升高,而抗氧化劑GKB可部分抑制弱氧化修飾低密度脂蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣超載,在細(xì)胞的氧化損傷中具有一定保護(hù)作用。由此推測(cè)GKB可預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化斑的形成,減緩動(dòng)脈粥樣硬化的形成。

4 銀杏內(nèi)酯藥理作用機(jī)制

4.1 血小板活化因子抑制作用 血小板活化因子(PAF)是一種強(qiáng)效生物活性磷脂,由白細(xì)胞、血小板、內(nèi)皮細(xì)胞、肺、肝和腎等多種細(xì)胞和器官產(chǎn)生。PAF通過與靶細(xì)胞膜上的PAF受體結(jié)合而發(fā)揮作用[15]。可引起血小板聚集,中性粒細(xì)胞聚集和釋放,產(chǎn)生大量活性氧、白三烯等炎性介質(zhì)。PAF阻斷藥通過與細(xì)胞膜受體結(jié)合發(fā)揮作用,PAF受體阻斷藥能阻止PAF與受體結(jié)合,因此對(duì)與PAF生成過量有關(guān)的疾病如哮喘、敗血性休克等應(yīng)當(dāng)具有治療意義。潘家祜等[16]在對(duì)兔血小板凝聚實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)銀杏內(nèi)酯B據(jù)有良好的抗PAF活性,其半數(shù)有效量EC50:5.85×10-9mol/L,能有效的拮抗PAF的生物學(xué)作用。

4.2 清除氧自由基、抗氧化作用 利用低濃度過氧化氫誘導(dǎo)原代培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞氧化損傷,將銀杏內(nèi)酯B給予干預(yù),發(fā)現(xiàn)銀杏內(nèi)酯B能顯著使培養(yǎng)介質(zhì)中的LDH和MDA水平顯著下降,細(xì)胞內(nèi)Na+-K+-ATPase,GSH-PX活力顯著提高,同時(shí)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)得到改善[17]。張根葆等[2]的研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)銀杏內(nèi)酯B預(yù)處理的大鼠,明顯降低了丙二醛的產(chǎn)生,抑制再灌注過程中乳酸脫氫酶和肌酸磷酸激酶峰值的出現(xiàn),增加超氧化物歧化酶的活性,使心肌組織中氧自由基生成減少,維持了心肌膜相結(jié)構(gòu)的完整性,增加抗氧化能力。

4.3 鈣離子超載 陸曉茜等[9]選用動(dòng)脈粥樣硬化斑形成的早期危險(xiǎn)因素弱氧化修飾低密度脂蛋白作為刺激物作用于體外培養(yǎng)的ECV304細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)組織因子TF蛋白水平及mRNA水平顯著增加,且Ca迅速升高,而抗氧化劑銀杏內(nèi)酯,可部分抑制弱氧化修飾低密度脂蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣超載,在細(xì)胞的氧化損傷中具有一定保護(hù)作用。

5 結(jié)語

銀杏內(nèi)酯有明確的藥理作用和臨床療效[12-15]。但分子藥理作用機(jī)制研究尚處于起步階段,以上研究都從分子水平闡述了藥物藥效的基礎(chǔ),但都局限于個(gè)別的基因或蛋白的研究,尚未有系統(tǒng)的理論來闡明銀杏內(nèi)酯的作用機(jī)制,對(duì)藥物在整個(gè)調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中所起的作用,還需要采用系統(tǒng)生物學(xué)等方法來闡明其調(diào)節(jié)機(jī)制,促進(jìn)中醫(yī)藥學(xué)的發(fā)展。

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