許 慧，譚雅玲

(上饒市立醫(yī)院，江西 上饒 334000)

網(wǎng)織紅細胞是反映骨髓紅系造血功能以及判斷貧血和相關(guān)疾病療效的重要指標[1]，過去檢測方法采用傳統(tǒng)手工顯微鏡目視計數(shù)法費時費力，穩(wěn)定性和重復性差，隨著自動化血細胞分析儀的發(fā)展，網(wǎng)織紅細胞計數(shù)也逐漸實現(xiàn)自動化檢測，該技術(shù)為網(wǎng)織紅細胞的計數(shù)提供了更先進的檢測手段和更多的相關(guān)參數(shù)。本文以SysmexXT-2000i全自動血液分析儀測定網(wǎng)織紅細胞并與人工鏡檢法比較，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 收集本院2008年8月～2009年5月住院病人175人，采用BD系列真空管空腹靜脈采血2ml(每1m l血液用1.4～1.5mg EDTA-K2抗凝)，標本于2小時內(nèi)處理完。

1.2 儀器與試劑

日本SYSMEX公司生產(chǎn)的Sysmex XT-2000i全自動血液分析儀及配套試劑；1%煌焦油藍1g，枸櫞酸鈉0.4g，氯化鈉0.85g將上述試劑溶于雙蒸餾水100ml中，過濾后備用(調(diào)節(jié) pH=7.4-7.8)；OLYMPUS 顯微鏡，miller窺盤。

1.3 方法 儀器操作人員經(jīng)過廠家嚴格培訓，嚴格按儀器操作規(guī)程做網(wǎng)織紅細胞分析，每天均隨機進行室內(nèi)質(zhì)控。使用Sysmex XT-2000i全自動血液分析儀在室溫25℃時用自動進樣檢測。手工法按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》方法，用儀器法計數(shù)后剩余標本由主管技師進行miller窺盤計數(shù)，且在2h內(nèi)完成檢驗。

1.4 統(tǒng)計學外理 數(shù)據(jù)使用SPSS 15.0軟件處理，采用配對樣品t檢驗和相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 重復性試驗 取高中低值標本3份，兩種方法分別處理分析10次，求得均值標準差(s)變異系數(shù)(CV)結(jié)果見表1。

表1 高、中、低值兩種方法測定結(jié)果

以上數(shù)據(jù)表明，儀器法的重復性好，精確度高于人工顯微鏡目測法。

2.2 對照試驗 對175例病人標本用兩種方法計數(shù)結(jié)果的比較(見表 2)。

表2 175例標本兩種方法所測結(jié)果比較

以上數(shù)據(jù)表明兩法對比P＞0.05，無顯著性差異，相關(guān)系數(shù)γ＝0.953，相關(guān)性良好。

3 討論

網(wǎng)織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后向成熟紅細胞發(fā)育的未完全成熟的紅細胞，其胞漿內(nèi)含有殘留的嗜堿性物質(zhì)核糖粒及核糖核酸，在活體染色時這些殘存的RNA(嗜堿性物質(zhì))可以被煌焦油藍染成藍色冠狀、絲球狀、破網(wǎng)狀、點粒狀結(jié)構(gòu)物，故稱之為網(wǎng)織紅細胞[1]。目前國內(nèi)普遍使用的網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法為手工鏡檢法，大量的實驗數(shù)據(jù)說明，手工法操作費時，影響因素多，如血液和染液比例不當；氣溫、濕度對染色的影響；涂片厚薄不均；用二甲苯擦片等，計數(shù)細胞少，導致計數(shù)結(jié)果精密度較差，變異系數(shù)大。在實驗過程中，發(fā)現(xiàn)個別標本染色涂片檢查時細胞表面有染料殘渣顆粒沉積，影響了計數(shù)。但其能直接觀察細胞形態(tài)，而且不需要昂貴的儀器、設備和試劑等。Sysmex XT-2000i全自動血液分析儀采用核酸熒光染色和流式激光測量的原理[2]，測定聚次甲基熒光染料與網(wǎng)織紅細胞內(nèi)存在的RNA結(jié)合的側(cè)向熒光信號和前向散射光信號，分別反映網(wǎng)織紅細胞的核酸含量和體積大小，不但能客觀地計數(shù)網(wǎng)織紅細胞的數(shù)量而且還能將其分為高熒光強度(幼雅型)、中熒光強度(成熟型)、低熒光強度(老化型)三類，并可計算未成熟網(wǎng)織紅細胞比率和網(wǎng)織紅細胞成熟度指數(shù)，以上新的參數(shù)可敏感、準確的反映RBC生成狀況，對各種貧血的診斷、治療及預后判斷起著重要的作用，同時對估計腫瘤放療、化療后骨髓造血功能的恢復及器官移植效果的評價有較重大的意義[3]。從實驗數(shù)據(jù)可見，Sysmex XT-2000i全自動血液分析儀測RET具有方便、快捷、精密度高、與手工法有良好的相關(guān)性，且檢測參數(shù)多、干擾少等特點，可為臨床更好地提供相關(guān)病情診斷及治療轉(zhuǎn)歸信息；但一部先進的儀器的正常運作，還需要準確的儀器校正、良好的質(zhì)控物隨時檢測儀器的狀態(tài)，而且在全自動分析過程中還存在一些干擾因素如有核紅細胞、瘧原蟲等造成的干擾,有干擾時應結(jié)合其他散點圖共同分析。

綜上所述，手工顯微鏡目測法計數(shù)應與全自動分析儀相互結(jié)合使用，取長補短，使實驗結(jié)果更加準確、科學。

[1]葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第2版,南京:東南大學出版社,1997:14～15.

[2]寇麗鈞.臨床基礎檢驗學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002,8:18～19.

[3]Bock A,Herkner KR.Reticulocytematurity pattern analysis as a predictive marker of erythropoiesis in paediarics[J]. Clin Lab Haemat,1994,16(3):343～348.