毛祖輝

(湖南省武岡市中醫(yī)院 湖南 邵陽 422400)

補(bǔ)腎通痹膠囊為我院以劉謀升主任醫(yī)生為首的臨床醫(yī)師共同研究而成,由露蜂房、制川烏、當(dāng)歸、赤芍、獨(dú)活、鹿茸、川芎、黃芪等12味中藥組成。露蜂房為方中君藥具有補(bǔ)腎壯骨、舒筋活絡(luò)、通痹止痛的功效。原方以藥材細(xì)粉裝膠囊而成。本方經(jīng)我院醫(yī)生臨床20年來使用觀察,效果甚好,用量日益增大。因此擬將其研制成顆粒劑后再裝膠囊而成,這樣既能保證療效、提高制劑質(zhì)量、減少服用數(shù)量又能方便患者使用。本人參考相關(guān)文獻(xiàn)[1]采取正交試驗(yàn),以蜂房總黃酮提取率為指標(biāo),優(yōu)選提取工藝條件。

1 儀器與試藥

島津uv-2401型紫外分光光度計(jì),BP-211D型電子天平。HHS-214型電熱恒溫水浴鍋,藥材由我院藥劑科提供,經(jīng)鑒定符合中國藥典2005年版(第一部)標(biāo)準(zhǔn)。蘆丁對(duì)照品(批號(hào)100080-200906)購于中國藥品生物制品檢定所。試劑(亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇等為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

(1)提取方法稱取處方量置圓底燒瓶中加乙醇浸漬1h,按正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行提取。(2)提取條件的選擇:為了優(yōu)化提取工藝,根據(jù)處方中藥材性質(zhì)及提取過程中的影響因素。選取乙醇濃度,加醇量、提取時(shí)間及提取次數(shù)4個(gè)因素。選擇L9(34)正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn),通過方差分析優(yōu)選醇提取最佳工藝條件。(3)蜂房總黃酮的含量測(cè)定[2]:標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備,精密稱取蘆丁置50mL的容量瓶中,標(biāo)準(zhǔn)品10.55mg加95%的乙醇溶解并稀釋制刻度,搖勻精密稱取此溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL分別置于25mL容量瓶中,各加水至6.0mL并加5%的亞硝酸鈉溶液1mL混勻放置6min,加10%硝酸鋁1mL混勻,放置6min,再加4%的氫氧化鈉試液10mL加水至刻度。搖勻,同時(shí)在另一個(gè)容量瓶中加相應(yīng)試劑做空白對(duì)照。以在511波長(zhǎng)外測(cè)定吸收度,以蘆丁含量為橫坐標(biāo),以吸收度為縱坐標(biāo),繪標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.124x+0.011,r=0.9998。提出液中總黃酮的含量測(cè)定,將正交試驗(yàn)所得樣品提取液用相應(yīng)濃度的乙醇的定容至500mL,備用依照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法制備。測(cè)定在511nm對(duì)應(yīng)的吸收度,由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出蜂房總黃酮的含量(表1)。(4)經(jīng)SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)表1、2可知,D>A>B>C表明提取次數(shù)D對(duì)提取結(jié)果影響最大,其次為乙醇濃度A,再次為乙醇用量B而提取時(shí)間影響最小。故最佳工藝確定為A1、B2、C3、D1即用10倍量的75%的乙醇回流提取3次,每次1h。(5)醇提優(yōu)選結(jié)果驗(yàn)證:稱取2倍量的處方藥材,按所定的最佳提取工藝進(jìn)行提取,測(cè)定總黃酮含量,計(jì)算總黃酮的提取率,結(jié)果3次實(shí)驗(yàn)的總黃酮提取率為(1.21±0.09)均為正交試驗(yàn)的較高水平,且結(jié)果穩(wěn)定。

表1 正交試驗(yàn)方法與結(jié)果

表2 方差分析結(jié)果

3 討論

補(bǔ)腎通痹膠囊作為我院的一種院內(nèi)制劑,在我院用于治療類風(fēng)濕、坐骨神經(jīng)病、腰頸椎盤突出已有10多年的臨床觀察。且療效確切,在患者中有較高信譽(yù),故為提高質(zhì)量,確保療效,方便病人而采取正交試驗(yàn)法優(yōu)選提取工藝。

[1]武鴻翔.露蜂房中化學(xué)成份的研究與臨床運(yùn)用概況[J].云南中醫(yī)中藥雜志,2001,22(3):29.

[2]屈紅明,尹鵬.冬凌藥中總黃酮提出工藝研究與含量測(cè)定[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2006,17(1):1929.

[3]中國藥典,2005.