黃文革，郭芬芬，陳鳳英，劉慰華，張健，黃河清

（中山大學實驗動物中心，廣州 510080）

我校實驗動物中心北校區(qū)屏障系統(tǒng)動物實驗設施于2007年5月投入使用，為了確保屏障系統(tǒng)正常規(guī)范的運行、以利于科研工作的順利開展，結(jié)合本中心屏障系統(tǒng)動物實驗設施的實際情況，我們初步摸索、積累了一些科學、行之有效的運營管理經(jīng)驗，總結(jié)如下。

1 建立完整的管理體系

1.1 建立完整的文件體系

建立各級各類人員的崗位職責，包括實驗室負責人員、實驗管理與操作人員，動物飼養(yǎng)人員、設施維護與消毒滅菌人員等崗位職責，這些體系一旦完善建立，應嚴格執(zhí)行。

1.2 建立標準的屏障環(huán)境操作規(guī)程

包括人員、物品、動物進出屏障系統(tǒng)的標準操作規(guī)程；雙扉真空高壓蒸汽滅菌器使用與維護的標準操作規(guī)程；使用屏障系統(tǒng)動物實驗室的標準操作規(guī)程；系統(tǒng)內(nèi)實驗動物購買的標準操作規(guī)程；系統(tǒng)內(nèi)實驗動物接收和檢疫的標準操作規(guī)程；系統(tǒng)內(nèi)實驗動物的飼料、墊料、飲水管理的標準操作規(guī)程；中央空調(diào)維護操作規(guī)程；系統(tǒng)內(nèi)大、小鼠飼養(yǎng)室的標準操作規(guī)程；系統(tǒng)內(nèi)實驗室清潔消毒方法的標準操作規(guī)程；系統(tǒng)內(nèi)實驗室日常工作記錄的操作規(guī)程及各種動物實驗操作技術(shù)標準規(guī)程。各項操作規(guī)程一旦建立必須嚴格地執(zhí)行［1］。

2 人員隊伍的建設和管理

2.1 系統(tǒng)內(nèi)工作人員的管理

從事屏障系統(tǒng)工作的管理人員、實驗操作人員、飼養(yǎng)人員、設施設備維護人員必須經(jīng)過特定的技術(shù)培訓，且要持有實驗動物權(quán)威機構(gòu)頒發(fā)的資格上崗證，方可進入屏障系統(tǒng)工作。管理人員要熟悉掌握屏障系統(tǒng)動物實驗室的設施設備的基本性能和使用方法、保證系統(tǒng)正常運行的各種程序，實驗操作人員全面負責協(xié)助各學科實驗研究人員對動物實驗的操作和觀察。要求這些人員對屏障系統(tǒng)動物實驗室具有高度的責任心，隨時關(guān)注系統(tǒng)的安全和正常運轉(zhuǎn)，及時發(fā)現(xiàn)和解決問題，為此，我們采取管理人員值班制。定期對工作人員進行培訓，樹立無菌操作觀念。

2.2 外來研究人員的管理

進入系統(tǒng)的實驗研究人員必須經(jīng)過標準化屏障系統(tǒng)運行管理的技術(shù)培訓，且在工作中要接受管理員的技術(shù)指導。本中心由于面向全校及附屬醫(yī)院的科研人員開放，協(xié)及面較廣，且流動性大，因此在管理上就有其特殊性；本著保證科研人員能及時進行動物實驗，在每一個需要進入屏障系統(tǒng)實驗室實驗的實驗研究人員進入屏障系統(tǒng)前，我們采取由專職的管理人員每周定點定時對其進行培訓，其主要內(nèi)容為屏障系統(tǒng)動物實驗室的標準操作規(guī)程以及人員、物品和動物進出屏障系統(tǒng)動物實驗室的流程、路線和注意事項等，獲得本部屏障系統(tǒng)實驗準入證，方可進入系統(tǒng)進行動物實驗。對研究生開設《實驗動物學》課程，也可定期舉辦一些講座。

3 實驗動物環(huán)境設施的管理

實驗動物環(huán)境設施是培育不同級別實驗動物和進行相應級別動物實驗的基本條件，是實驗動物科學發(fā)展的“硬件”，其管理就是“軟件”了，為了充分發(fā)揮硬件的作用，就必須做好實驗動物環(huán)境設施的管理。

3.1 系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境的設施指標管理

主要指標包括溫度、濕度、噪音、光照、室內(nèi)風速、氨濃度、室內(nèi)換氣次數(shù)、空氣潔凈度、各區(qū)域壓力差等。每天定時觀察并記錄系統(tǒng)內(nèi)各動物實驗室的溫度、濕度以及各區(qū)域壓力差；本單位在更換中效或高效過濾時對各區(qū)域壓力差進行自測，根據(jù)它們的變化，對空調(diào)系統(tǒng)的風速、溫度、濕度進行調(diào)整，對風閥進行更換處理。其余各項環(huán)境指標一般一個季度檢測一次［1-2］。

3.2 系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境的消毒管理

每天工作結(jié)束后，對系統(tǒng)內(nèi)的臺面、地面用無菌水清潔后用0.1％過氧乙酸消毒液擦拭消毒，每周定期進行二次噴霧消毒，每一季度對內(nèi)環(huán)境進行一次無菌檢查，指標為空氣落菌數(shù)。為了避免細菌的耐藥性，我們采用兩種消毒液輪換使用；同時，每天在確認系統(tǒng)內(nèi)無人時，對無動物區(qū)域定點進行一次紫外線照射30min加強空氣消毒；經(jīng)過兩年多的運作管理，證明此方法是可行、有效的。

4 系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境物品的管理

參照國家有關(guān)實驗動物標準，結(jié)合動物設施及生產(chǎn)實際對動物所需的飲水、飼料、墊料、籠具等建立了檢測方法和檢測制度，將檢測動物質(zhì)量為主轉(zhuǎn)變?yōu)闄z測動物生存環(huán)境為主，以便能及時發(fā)現(xiàn)并控制病原微生物對動物的污染［3］。

4.1 物品的消毒

一切物品都需要經(jīng)過滅菌、消毒后才可傳進屏障系統(tǒng)。每種物品都有不同的特性，其滅菌的方法也有所不同。（1）能耐高溫高壓物品，如籠具、水瓶、無菌隔離服、飼料、木屑等，均可經(jīng)高壓滅菌器滅菌或121℃、30min高溫處理，可達滅菌目的，同時，其消毒效果的檢測可通過設備微型打印機打印的數(shù)據(jù)作參考，通過觀察這些數(shù)據(jù)與要求是否相符可判斷滅菌效果的好壞；也可在用121℃化學指示劑檢測消毒效果，或者定期對滅菌器做B-D實驗，檢測高壓滅菌器滅菌的消毒效果。為了保證飼料的營養(yǎng)元素，本部采用經(jīng)鈷60輻射滅菌的全價飼料，同時，定期進行無菌抽查，分別接種肉湯和硫乙醇酸鈉培養(yǎng)基，37℃下培養(yǎng)48h。墊料，我們外購新鮮木刨花，先經(jīng)過篩子去除小的粉末，再將墊料裝入已洗凈的盒子或裝入口袋里進行高壓消毒，其目的是減少內(nèi)環(huán)境的塵埃顆粒。（2）可經(jīng)消毒液浸泡消毒、滅菌，又不耐高溫高壓的物品，如塑料箱等，可經(jīng)渡槽消毒液浸泡一定時間，在系統(tǒng)內(nèi)把物品從渡槽取出來后，需要用無菌水進行沖洗以去除消毒后遺留的消毒藥物，放在系統(tǒng)內(nèi)的潔凈儲物間晾干備用。（3）不能高壓，又不能浸泡的物品，或者已經(jīng)滅菌的商品化的實驗消耗品，如一次性注射器（未開封外包裝的）等，先把物品表面進行75％酒精噴霧，再放在物品傳遞窗經(jīng)過紫外線照射消毒20min后，傳遞到系統(tǒng)內(nèi)的潔凈儲物間存放備用。

4.2 無菌水的檢測

動物飲用水經(jīng)過這兩年多的檢測觀察，我們根據(jù)自身條件和情況制定了一套飼養(yǎng)及檢測方法。每周一、四更換所有飲水瓶，而后將消毒好的水瓶重新灌裝無菌水，同時，我們每半個月對純水機進行反沖洗及消毒，每個月進行無菌檢測，隨時監(jiān)控，以保證屏障內(nèi)的動物飲水質(zhì)量。

4.3 動物尸體及廢棄物的處理

動物尸體采取集中處理。平時將動物尸體儲藏于尸體房的冰柜中，由有關(guān)機構(gòu)定期回收進行無害化處理。

5 小結(jié)

中山大學實驗動物中心動物實驗屏障系統(tǒng)自2007年啟用以來，就建立了一套科學的、合理的屏障系統(tǒng)運行管理規(guī)范。實施2年以來，經(jīng)省實驗動物檢測所多次檢測，屏障系統(tǒng)內(nèi)各環(huán)境指標都符合國家標準。由于系統(tǒng)的人員進出、空氣過濾、設施老化及其它難以預計的因素，其不可能無限期保持潔凈環(huán)境狀態(tài)。在現(xiàn)有條件下，只有建立一套合理管理規(guī)章制度，加強系統(tǒng)的日常維護，才能保證屏障系統(tǒng)內(nèi)的實驗動物免受微生物的污染?？傊?，屏障系統(tǒng)的管理是一項高標準、嚴要求，在其運行過程中，必須嚴格按照規(guī)程操作，才能保證動物實驗屏障環(huán)境系統(tǒng)的各項指標符合要求，保證系統(tǒng)正常運行。

［1］俞利平，吳培林，亢曉冬.高校實驗動物屏障系統(tǒng)運行中的體會［J］.杭州師范學院學報（醫(yī)學版），2008，28（2）：91-92.

［2］王永金，雷培琪，曾嘵嵐.SPF級動物屏障系統(tǒng)的運營管理［J］.四川生理科學雜志，2008，30（3）：122-123.

［3］練有文，莫梅英.我院SPF屏障系統(tǒng)設施概況及動物質(zhì)量管理初探［J］.實驗動物科學與管理，2004，21：34-36.