黃 嘯，陸 茵

(寧波大學(xué)應(yīng)用海洋生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 寧波 315211)

我國(guó)水產(chǎn)品資源豐富，特別是改革開(kāi)放以來(lái)，商品流通加快，水產(chǎn)品也不例外?，F(xiàn)在人們對(duì)水產(chǎn)品的需求不再是數(shù)量，而是更看重其品質(zhì)，從而對(duì)鮮活水產(chǎn)品的運(yùn)輸提出了更高的要求。鮮活水產(chǎn)品色香味俱全，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。然而，水產(chǎn)活體死亡后出現(xiàn)腐敗，口感和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值下降，食用價(jià)值也大打折扣。所以，水產(chǎn)活體運(yùn)輸市場(chǎng)也隨之急速發(fā)展起來(lái)。

水產(chǎn)活體暫養(yǎng)與貯運(yùn)的宗旨是要科學(xué)、合理、經(jīng)濟(jì)地維持水產(chǎn)活體在運(yùn)輸過(guò)程中存活所必需的生態(tài)環(huán)境，環(huán)境條件越是適宜，存活時(shí)間就越長(zhǎng)，從而解決運(yùn)輸過(guò)程中存活率低的問(wèn)題。

1 水產(chǎn)活體暫養(yǎng)和流通中的生理特征與環(huán)境需求

1.1 呼吸狀況

水產(chǎn)活體在流通中新陳代謝消耗氧氣，同時(shí)產(chǎn)出二氧化碳，氧氣從外界獲取，二氧化碳則應(yīng)及時(shí)排出體外，若過(guò)多滯留于體內(nèi)，必然會(huì)擾亂體液酸堿平衡，危及存活。所以呼吸活動(dòng)是水產(chǎn)動(dòng)物流通過(guò)程中的基本生理特征。

水中溶氧是影響水產(chǎn)活體的一個(gè)重要因素。氧分壓直接影響水產(chǎn)活體的鰓或其它呼吸器官的氣體交換，水中溶氧減少會(huì)使水產(chǎn)動(dòng)物呼吸頻率加快，如果水中溶氧濃度低于水產(chǎn)活體的窒息點(diǎn)，就會(huì)造成水產(chǎn)活體窒息死亡。各種水產(chǎn)活體的窒息點(diǎn)不盡相同，萬(wàn)松良等［1］報(bào)道鳡魚(yú)種的窒息點(diǎn)為 0.78 mg·L－1，其耐低氧能力屬中等偏弱型。廖勛波等［2］研究發(fā)現(xiàn):水溫24.0℃，鄱陽(yáng)湖黃顙魚(yú)的臨界窒息點(diǎn)為0.31 mg·L－1。此外，還有不少學(xué)者對(duì)水產(chǎn)活體的窒息點(diǎn)進(jìn)行了研究［3－5］。

在適宜水溫范圍內(nèi)，水溫升高，水產(chǎn)活體的呼吸加速;反之，則呼吸減慢。如果水溫劇變，將會(huì)抑制水產(chǎn)活體的呼吸運(yùn)動(dòng)。低溫可降低水產(chǎn)活體對(duì)氧氣的消耗，并抑制二氧化碳、氨、乳酸等生成［6］。陳 進(jìn) 樹(shù)［7］在 不 同 的 水 溫 梯 度 (25 ℃、22℃、19℃、16℃)下研究了神仙魚(yú)成魚(yú)和幼魚(yú)的呼吸頻率，結(jié)果表明:水溫對(duì)神仙魚(yú)呼吸頻率的影響呈非線性關(guān)系;水溫對(duì)神仙魚(yú)幼魚(yú)呼吸頻率的影響比成魚(yú)明顯。陳松波等［8］在不同溫度條件下 (6℃～34℃)對(duì)鯉魚(yú)成魚(yú)和幼魚(yú)的呼吸頻率進(jìn)行了研究，結(jié)果表明:高溫 (34℃)時(shí)鯉魚(yú)呼吸急促，成魚(yú)的呼吸頻率可達(dá)130次·min－1，幼魚(yú)呼吸頻率可達(dá)170次·min－1;低溫 (6℃)時(shí)呼吸減緩，成魚(yú)呼吸頻率下降到11次·min－1，幼魚(yú)的呼吸頻率下降到19次·min－1。因此，溫度是影響水產(chǎn)活體呼吸頻率的重要因素。在適宜溫度范圍內(nèi)盡量降低呼吸頻率，就能有效地提高水產(chǎn)活體的存活率。

水體pH值對(duì)水產(chǎn)活體的呼吸狀態(tài)也有很大影響，淡水魚(yú)最適pH為6.5～8.5，海水魚(yú)為7.0～8.5。余日清等［9］研究了低 pH(6.0～3.6)對(duì)草魚(yú)呼吸活動(dòng)機(jī)能及耗氧代謝的影響，結(jié)果表明:在pH 4.6～3.6條件下，草魚(yú)呼吸和氣體代謝活動(dòng)受干擾的程度隨酸度增大而急劇加重，具體表現(xiàn)為呼吸頻率加快，深度加大，耗氧率起始升高繼而迅速下降，并在極端pH(3.6)下最終引起機(jī)體組織缺氧而致死。

氨是毒性高、通透性大的化合物。水體中氨積累到一定程度時(shí)，會(huì)妨礙水產(chǎn)動(dòng)物的呼吸，即使是低濃度的氨也是有害的。陳惠等［10］做了不同氨濃度對(duì)魚(yú)類的毒性試驗(yàn)，結(jié)果表明氨對(duì)魚(yú)類的毒性較大，半數(shù)致死量在1 mg·L－1左右。

魚(yú)類對(duì)水環(huán)境中的二氧化碳也非常敏感，它直接影響鰓的氣體交換，如果含量過(guò)多，則對(duì)魚(yú)類有麻醉作用。水環(huán)境中的其它因素，如懸濁物、鹽度等［11］都能影響水產(chǎn)活體的興奮狀態(tài)，從而影響水產(chǎn)動(dòng)物的呼吸。

1.2 排泄?fàn)顩r

運(yùn)輸過(guò)程中，水產(chǎn)活體的尿量及尿濃度增加，尿中離子組成也起劇烈變化，加上未經(jīng)體循環(huán)排出的食物消化廢物，都會(huì)促成活體死亡。

水產(chǎn)魚(yú)類主要通過(guò)呼吸器官、腸道、皮膚和腎等排除體內(nèi)代謝廢物，其中腎是主要排泄器官，以尿的形式排出。一般，肉食性魚(yú)類的尿呈酸性，草食性魚(yú)類的尿呈堿性。淡水魚(yú)類排水量大于海水魚(yú)類。

如果排泄物在運(yùn)輸環(huán)境中積累，會(huì)使水質(zhì)惡化，加上細(xì)菌的作用，水中氨氮含量會(huì)不斷增加，減弱水產(chǎn)動(dòng)物的吸氧能力，造成水產(chǎn)動(dòng)物死亡。蔣艾青［12］發(fā)現(xiàn)排泄物如果處理不當(dāng)，就會(huì)造成水中氨氮和亞硝態(tài)氮的積累，造成水質(zhì)惡化，引起魚(yú)類死亡。

1.3 環(huán)境脅迫與應(yīng)激反應(yīng)

影響水產(chǎn)動(dòng)物健康的不良刺激因素很多，可歸納為物理因素、化學(xué)因素、生物因素及綜合因素4個(gè)方面。物理應(yīng)激因素主要有溫度、光照、聲音、電流等?；瘜W(xué)應(yīng)激因素主要有pH、溶解氣體、鹽度、重金屬和有機(jī)質(zhì)等［13］。

當(dāng)生存環(huán)境因子發(fā)生突變時(shí)，水產(chǎn)動(dòng)物的神經(jīng)、內(nèi)分泌、激素、血液指標(biāo)等生理狀態(tài)也會(huì)發(fā)生變化，并產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致新陳代謝過(guò)程加劇，引起死亡。

水產(chǎn)動(dòng)物在運(yùn)輸過(guò)程中受到刺激因子的作用后，會(huì)首先出現(xiàn)交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)反應(yīng)。Cannon最早全面研究了交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)的作用，曾提出應(yīng)急反應(yīng)學(xué)說(shuō)，認(rèn)為機(jī)體遭遇特殊情況時(shí)，這一系統(tǒng)將立即被激發(fā)，腎上腺素與去甲腎上腺素的分泌大大增加，它們作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，提高興奮性，使機(jī)體處于警覺(jué)狀態(tài)［14］。反應(yīng)靈敏、呼吸加快、心跳加快、血壓升高，有利于應(yīng)急時(shí)重要器官得到更多的血液供應(yīng);肝糖原分解增強(qiáng)、脂肪分解加速、血糖升高，以適應(yīng)在應(yīng)急情況下對(duì)能量的需要。實(shí)際上，引起應(yīng)急反應(yīng)的各種刺激，也是引起應(yīng)激反應(yīng)的刺激，當(dāng)機(jī)體受到應(yīng)激刺激時(shí)，同時(shí)引起應(yīng)急反應(yīng)與應(yīng)激反應(yīng)，兩者相輔相成，共同維持機(jī)體的適應(yīng)能力。

劉小玲［15］指出應(yīng)激從以下2個(gè)方面影響魚(yú)體的健康。一是強(qiáng)烈的或劇烈的機(jī)能和組織改變，導(dǎo)致局部或全身性病變;二是通過(guò)抑制免疫機(jī)能(包括特異性的和非特異性的)，導(dǎo)致魚(yú)類死亡率提高。

2 水產(chǎn)活體的運(yùn)輸方法

2.1 麻醉運(yùn)輸

為降低水產(chǎn)動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)與新陳代謝，減少對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的傷害，提高存活率，麻醉劑已廣泛用于水產(chǎn)動(dòng)物的活體運(yùn)輸中。麻醉運(yùn)輸是采用麻醉劑抑制水產(chǎn)動(dòng)物的中樞神經(jīng)，抑制其反射功能，從而降低呼吸和代謝強(qiáng)度，提高存活率的運(yùn)輸方式。麻醉運(yùn)輸具有存活率高、運(yùn)輸密度大、運(yùn)輸時(shí)間長(zhǎng)、操作方便等優(yōu)點(diǎn)，到達(dá)目的地后，水產(chǎn)動(dòng)物放入清水中即可復(fù)蘇，采用適量的麻醉劑可以使水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)應(yīng)激的強(qiáng)度降低，并且麻醉魚(yú)的皮質(zhì)醇激素水平恢復(fù)要比非麻醉的快，麻醉運(yùn)輸維護(hù)了魚(yú)血液生化指標(biāo)的穩(wěn)定，對(duì)于維持魚(yú)體生理代謝平衡有重要作用。劉長(zhǎng)琳［16］等用MS-222對(duì)半滑舌鰨進(jìn)行麻醉實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)MS-222麻醉半滑舌鰨效果較好，魚(yú)體入麻時(shí)間短、復(fù)蘇快，安全邊界寬，反復(fù)麻醉無(wú)明顯耐受性，是理想的水產(chǎn)用麻醉劑。國(guó)外一些學(xué)者也發(fā)現(xiàn) MS-222 用于真鯛［17］、庸鰈［18］的麻醉運(yùn)輸效果較好，水產(chǎn)活體運(yùn)輸存活率較高。張富林等［19］等用丁香酚做麻醉劑，發(fā)現(xiàn)效果比 MS-222還要好，所用濃度更低，麻醉開(kāi)始時(shí)間更短。

其它常用的麻醉劑還有乙醇、乙醚、二氧化碳、三氯乙醛、三氯特丁醇、三溴乙醇、巴比妥鈉、尿烷、苯巴比妥鈉、碳酸氫鈉、丁香油、苯唑卡因［20］、乙二醇苯醚等［21］。

2.2 充氧運(yùn)輸

充氧運(yùn)輸是指運(yùn)輸途中按設(shè)定的要求向水體內(nèi)充氧，保證水產(chǎn)動(dòng)物在運(yùn)輸途中氧氣充足，確保水產(chǎn)動(dòng)物在運(yùn)輸途中的水體環(huán)境溶氧不低于水產(chǎn)動(dòng)物的窒息點(diǎn)。氧氣供應(yīng)充足，可在一定時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)高密度暫養(yǎng)。充氧運(yùn)輸具有存活率高，運(yùn)輸密度高，且能最大程度地保持水產(chǎn)動(dòng)物正常的生理水平。目前，應(yīng)用的比較多的水體充氧方式有噴淋式增氧、射流式增氧等機(jī)械方式;使用密封袋運(yùn)輸這種人為充入氧氣的方法;在水體中投入增氧劑來(lái)增氧的方法。陳文召等［22］研究了一種雙噴嘴射流器的充氧性能，在較佳工作條件下，動(dòng)力效率高，如能運(yùn)用在水產(chǎn)活體運(yùn)輸中，能達(dá)到高效的充氧效果。鄧希海［23］設(shè)計(jì)了一種換水換氣式充氧密封水產(chǎn)苗種運(yùn)輸裝置，鳙魚(yú)苗存活最長(zhǎng)時(shí)間為55 h。劉德禧［24］用密封充氧運(yùn)輸魚(yú)苗的方法，發(fā)現(xiàn)充氧一次可以運(yùn)輸30 h左右。張耀明等［25］早在1983年就利用雙氧水作增氧劑運(yùn)輸魚(yú)苗，取得很大成功。楊正鋒等［26］討論了增氧劑在水產(chǎn)生產(chǎn)多個(gè)環(huán)節(jié)中的應(yīng)用，說(shuō)明在長(zhǎng)途運(yùn)輸中也可使用一定量的增氧劑來(lái)提高運(yùn)輸成活率。

2.3 無(wú)水運(yùn)輸

無(wú)水運(yùn)輸是讓水產(chǎn)動(dòng)物脫離大量的水環(huán)境，到達(dá)降低其新陳代謝的目的。研究較多的是將水產(chǎn)動(dòng)物的運(yùn)輸環(huán)境溫度降到生態(tài)冰溫，使其在生態(tài)冰溫下冬眠。處于冰溫冬眠的水產(chǎn)動(dòng)物，呼吸和新陳代謝極低，為無(wú)水?；钸\(yùn)輸提供了條件。國(guó)外早就進(jìn)行了生態(tài)冰溫的運(yùn)輸研究，把牙鲆降溫馴化，在生態(tài)冰溫區(qū)冬眠后，從水中撈出，在無(wú)水、體表干燥的狀態(tài)，用0.5℃的冰溫卡車運(yùn)輸6 h后，將其放入水中，幾秒鐘后魚(yú)蘇醒、游動(dòng)，牙鲆的口感、風(fēng)味超群。另一組實(shí)驗(yàn)，牙鲆120尾、河豚10尾、鯛6尾，冰溫陸運(yùn)約20 h，運(yùn)輸過(guò)程中，使用了滲入魚(yú)體表呼吸所需的氧的緩沖材料，魚(yú)表皮干燥至水分含量20%，呈現(xiàn)“木乃伊”狀態(tài)，把魚(yú)放入水中，魚(yú)立刻蘇醒。采用同樣的技術(shù)和方法，進(jìn)行了24 h空運(yùn)試驗(yàn)，取得成功，魚(yú)體全部存活。運(yùn)用活體冰溫干燥法，使冰溫區(qū)人工冬眠的魚(yú)干燥，抑制了魚(yú)體表的呼吸代謝，魚(yú)的生存時(shí)間延長(zhǎng)了10倍，能經(jīng)受20 h以上的長(zhǎng)途運(yùn)輸［27］。另外，干燥冬眠的魚(yú)體，魚(yú)肉的口感、光澤均良好，這是由于人工冬眠緩慢降低水溫處理后，魚(yú)肉的呈鮮味物質(zhì):天冬氨酸、谷氨酸含量增加，而發(fā)苦味的亮氨酸、異亮氨酸等含量減少。王曉飛等［28］測(cè)定麥穗魚(yú)的生態(tài)冰溫帶為:－1℃ ～0.6℃;健康魚(yú)體、暫養(yǎng)48 h后，控制不同溫度下的降溫速率將麥穗魚(yú)的溫度降至0.6℃，放入塑料保鮮袋無(wú)水充氧封口包裝，在低溫 (0±1)℃下?；羁蛇_(dá)12 h。黑鯛的生態(tài)冰溫為 －1.1℃ ～6℃［29］;經(jīng)過(guò) 48 h暫養(yǎng)后緩慢降溫到6℃，在低溫 (2±0.5)℃無(wú)水條件下供純氧可以使黑鯛存活6 h。孫寧［30］以聚苯乙烯盒作運(yùn)輸容器，填充物分別為浸水海綿和木屑，進(jìn)行羅氏沼蝦活蝦的無(wú)水活體運(yùn)輸模擬試驗(yàn)，取得較高的存活率，證實(shí)羅氏沼蝦活蝦無(wú)水運(yùn)輸?shù)目尚行浴?/p>

2.4 超低溫運(yùn)輸

超低溫運(yùn)輸是指將環(huán)境溫度降到－60℃以下，達(dá)到保存生物材料數(shù)月，甚至數(shù)年以上的運(yùn)輸方法。由于超低溫溫度太低，而且成本高，所以在水產(chǎn)材料方面，一般只用來(lái)保存魚(yú)類的精液、貝類配子及胚胎以及海藻等水產(chǎn)材料。為了防止超低溫對(duì)水產(chǎn)材料的低溫傷害，要向保存液中加入低溫保護(hù)劑 (抗凍劑)，如二甲基亞砜、乙二醇、乙酰胺、丙二醇等。英國(guó)學(xué)者 Blaxter［31］首次作了冰凍保存太平洋鯡魚(yú)精巢的試驗(yàn)，獲得了成功。用干冰(－79℃)保存6個(gè)月的精巢解凍授精，獲得80%的受精率，開(kāi)創(chuàng)了冷凍精液也可以獲得高受精率的先例。Erdahl［32］冷凍鮭魚(yú)精液，獲得大于90%的受精率。Mounib［33］冷凍保存大西洋鮭精液，液氮保存1年后，受精率為80%。近年來(lái)，超低溫冷凍保存得到更進(jìn)一步的發(fā)展。肖志忠等［34］的高效大黃魚(yú)精液的超低溫保存實(shí)驗(yàn)取得成功。廖馨等［35］對(duì)青蝦精子的超低溫冷凍保存技術(shù)進(jìn)行了研究，以壬氏液為稀釋液，添加8%DMSO為抗凍保護(hù)劑，4℃ 平衡 30 min， －20℃平衡 15 min，－80℃平衡15 min后投入液氮中保存，解凍時(shí)將冷凍管浸入55℃水浴中10～15 s至半融取出自然解凍，精子能維持 60%的存活力。葉霆等［36］以0.5 mL的麥細(xì)管為凍存管，以Cortland溶液為稀釋液，以10%DMSO為抗凍劑超低溫凍存黑鯛精子，凍精的激活率和受精率分別達(dá)到92.51%+1.25%和89.35%+1.99%。

3 小結(jié)

水產(chǎn)活體暫養(yǎng)和運(yùn)輸流通過(guò)程中的生理變化是研究暫養(yǎng)和運(yùn)輸方法的基礎(chǔ)，只有進(jìn)行深入的水產(chǎn)活體生理研究，才能為暫養(yǎng)和運(yùn)輸提供理論依據(jù)。

現(xiàn)代水產(chǎn)活體流通的運(yùn)輸方式多為各種方法的綜合運(yùn)用［29－33］，只有綜合利用好各種運(yùn)輸方法才能使水產(chǎn)活體的運(yùn)輸效果好。隨著各種運(yùn)輸方式研究的發(fā)展深入，水產(chǎn)活體的流通運(yùn)輸必將朝著存活率高，運(yùn)輸密度大，運(yùn)輸時(shí)間長(zhǎng)，操作簡(jiǎn)便，成本低廉的方向發(fā)展。

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