李付惠,趙 麗,楊樹德,梁曉原

(1.文山學院生化系,云南文山 663000;2.云南中醫(yī)學院,云南昆明 650500)

毛丁白頭翁為菊科大丁草屬毛大丁草 (Piloselloides hirsuta(Forssk.)C.J.Jeffrey ex Cufod.)的干燥全草。多年生、披毛草本[1]。產(chǎn)于西藏、云南、四川、貴州、廣西、廣東、湖南、湖北、江西、江蘇、浙江、福建等省區(qū)。生于林緣、草叢中或曠野荒地上。日本、尼泊爾、印度、緬甸、泰國、老撾、越南、印度尼西亞、澳大利亞以及非洲均有分布[2]。其性平,味微苦辛,有清熱解毒、止咳化痰、活血散瘀之功,臨床上主要用于感冒發(fā)熱、咳嗽痰多、痢疾、小兒疳積,外用治跌打損傷、毒蛇咬傷[3]。到目前為止未見毛丁白頭翁系統(tǒng)的生藥學研究,本實驗采用來源鑒別,性狀鑒別,顯微鑒別,理化鑒別的方法對毛丁白頭翁進行了系統(tǒng)的生藥學研究,詳細描述了毛丁白頭翁的生藥學特征,為毛丁白頭翁的鑒別,質(zhì)量標準的制訂以及進一步開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 植物的來源鑒定

樣品采自云南省玉溪市新平縣,經(jīng)多年從事中藥鑒定工作的楊樹德教授鑒定為:菊科大丁草屬毛大丁草 (Piloselloides hirsuta(Forssk.)C.J.Jeffrey ex Cufod.)的干燥全草 (《云南省中藥材標準》2005版第一冊將原拉丁學名Gerbera piloselloides(L.)Cass.更名為Piloselloides hirsuta(Forssk.)C.J.Jeffrey ex Cufod.)[4]。

2 植物形態(tài)

毛丁白頭翁為多年生草本,全身被毛。根狀莖曲膝狀或粗直狀,較短,為殘存的葉柄所圍裹,具較多的須根。葉蓮座狀,基生,紙質(zhì),長圓形、倒卵狀長圓形或倒卵形,稀有卵形,長 6～17 cm,寬3～6 cm,基部漸狹或鈍,頂端圓,上面被疏粗毛,下面密被白色綿毛,全緣,邊緣有紅褐色長毛;中脈顯著凸起,側(cè)脈 6～8對,極細,中脈與基部平行,網(wǎng)脈不明顯;葉柄不等齊,長 1～7.5 cm,被綿毛?；ㄝ銌紊?通常長 15～30 cm,有時可達45 cm,頂端增粗,無苞葉,偶有 1枚鉆形苞葉者,密被毛,毛愈向上部愈密,灰白色毛在下部,淡銹色毛在中部,黃褐色毛在上部。花葶之頂為單生的頭狀花序,花期直徑達 2.5～4 cm;總苞為開展盤狀,總苞片 2層,線狀披針形或線形,外層的狹而短,頂端漸尖,長 8～12 mm,寬 0.8～1 mm,內(nèi)層長 15～19 mm,寬 1～1.6 mm,背面被銹色絨毛;蜂窩狀的花托裸露,直徑約 7 mm;外圍雌花 2層,外層花冠舌狀,長 17～19 mm,舌片背面微紅色,上面白色,匙狀長橢圓形或倒披針形,長為花冠管數(shù)倍,頂端有不明顯的 3細齒,檐部卷曲,內(nèi) 2裂絲狀,長 1.5～

3.5 mm,絲狀或毛狀雄蕊隱藏于花冠管中;內(nèi)層雌花花冠二唇形,管狀,長 11～13 mm,外唇大,頂端具 3細齒,內(nèi)唇 2深裂,較短,退化的長圓形雄蕊,基部有短尾,不甚明顯,頂端具鉤。中央兩性花,花冠長約 13 mm,擴大的冠檐呈 2唇狀,外唇3裂,內(nèi)唇 2深裂,裂片長 2.5～3 mm;花藥長約5 mm,頂端較平,基部的尾長約 1.5 mm;花柱有略扁的分枝,頂端鈍,長約 1.5 mm。紡錘形瘦果,具 6縱棱,被白色細剛毛,頂端具長 7.5～8.5 mm無毛的喙。冠毛淡褐色或橙紅色,微粗糙,長約12 mm,基部成環(huán)狀聯(lián)合?；ㄆ?2～5月和 8～12月(見圖 1)。

圖1 毛丁白頭翁植物原圖

3 性狀鑒別

樣品根狀莖粗短,類圓柱形或結(jié)節(jié)狀,長 3.5～5 cm,常被灰白色茸毛。根簇生,細圓柱形,表面灰褐色至灰黃棕色,有細縱紋,質(zhì)脆易折斷,斷面類白色至白色,中心呈灰褐色。殘留葉片灰綠色至綠褐色,葉柄、葉片背面均被白色至灰棕色絨毛,有時可見花葶。氣微香,味苦、微澀 (見圖 2)。

圖2 毛丁白頭翁藥材圖

4 顯微鑒別

4.1 葉橫切面顯微組織特征

葉上表皮細胞排列緊密,大小均勻,細胞類長方形,外被角質(zhì)層,可見眾多非腺毛;下表皮細胞細小,類方形或長方形,外被角質(zhì)層,可見較多氣孔及非腺毛;柵欄細胞長圓柱形,1列,排列緊密;海綿細胞排列稀疏,不規(guī)則狀;主脈維管束常由 3個維管束組成,中間一個較大,兩邊維管束較小;維管束上、下兩方均有數(shù)層厚角組織,厚角組織里有纖維束;木質(zhì)部位于上方,導管 2～11列,每列由 2～7個導管排列組成,韌皮部位于下方,較狹窄(見圖 3)。

圖3 毛丁白頭翁葉橫切面顯微特征圖 (10×10)

4.2 葉片上表面觀組織特征

葉上表皮細胞較大,呈波狀彎曲,上有不定式氣孔,副衛(wèi)細胞 3～4個,單細胞非腺毛較多,呈圓錐形,偶見草酸鈣方晶分布在薄壁細胞中 (見圖 4)。

圖4 毛丁白頭翁葉上表面觀組織特征圖 (10×10)

4.3 葉片下表面觀組織特征

葉下表皮細胞多角形,呈不規(guī)則彎曲,直徑約42～65μm,細胞大小不等;非腺毛眾多,氣孔多為平軸式 (見圖 5)。

圖5 毛丁白頭翁葉下表面觀組織特征圖 (10×10)

4.4 根橫切面顯微組織特征

根類圓形,外被角質(zhì)層,表皮細胞 1列,類方形或扁圓形,直徑約 20μm,上被較多非腺毛,非腺毛細胞壁常彎曲;表皮細胞下為 2～3列類圓形薄壁細胞,細胞壁稍有增厚,直徑約 26μm;基本薄壁組織由 7～8列細胞組成,細胞較大,大小均勻,直徑約 68μm;內(nèi)皮層由 1列細胞組成,細胞較小,排列緊密,環(huán)狀;中柱鞘外薄壁細胞 3～4列,環(huán)繞維管束,維管束為外韌型,木質(zhì)部中導管大小不一,為不規(guī)則形,可見纖維、石細胞成群或散在,韌皮部狹窄。(見圖 6)

圖6 毛丁白頭翁根橫切面顯微特征圖 (10×4)

4.5 葉粉末顯微組織特征

葉粉末呈深褐色,非腺毛眾多,但多已斷裂,偶見完整的單細胞非腺毛;表皮細胞呈波狀彎曲,具不定式氣孔;石細胞偶見;草酸鈣方晶眾多,偶見針晶;纖維上有細小的草酸鈣方晶;螺紋導管、梯紋導管、具緣紋孔導管 (見圖 7)。

圖7 毛丁白頭翁葉粉末圖 (10×20)

4.6 根及根莖粉末顯微組織特征

呈黃褐色,石細胞大小不一,呈類圓形、類長方形等,單個散在或成團聚集,紋孔清晰可見;非腺毛單細胞多已折斷,有時可見到完整的單細胞非腺毛;根莖的表皮細胞較大,呈長方形,排列緊密,無細胞間隙;螺紋導管、具緣紋孔導管;草酸鈣方晶眾多,偶見柱晶、針晶 (見圖 8)。

圖8 毛丁白頭翁根及根莖的粉末圖 (10×20)

4.7 花粉末顯微組織特征

呈黃褐色,非腺毛有苞片非腺毛、內(nèi)層苞片非腺毛、單細胞非腺毛、多細胞非腺毛等幾種,苞片非腺毛由 1～12個細胞組成,下部 1～4個細胞短,基部細胞常膨大,頂端細胞特長,內(nèi)層苞片另有 2～3個細胞并生的非腺毛,單細胞非腺毛微彎曲,直徑 8～10μm,壁較厚,表面有疣狀突起;多細胞非腺毛由 2～12個細胞組成,直徑 10～15μm,平直或先端彎曲;螺紋導管,直徑 4～50μm;花粉粒黃色,類圓形或橢圓形,直徑大約 40μm;冠毛多為列性非腺毛,邊緣細胞向外突出;花柱碎片上部表皮細胞分化成單細胞毛,呈圓錐形,先端尖或稍鈍;柱頭頂端表皮細胞呈乳頭狀 (見圖 9)。

圖9 毛丁白頭翁花的粉末圖 (10×20)

5 理化鑒別

5.1 檢查苷及其糖類

取毛丁白頭翁熱水提取液 1 mL,加入 1 mL堿性硫酸銅試劑,于沸水中加熱 5 min,有紅色氧化亞銅沉淀析出。

取毛丁白頭翁熱水提取液 1 mL,加入 5%萘酚乙醇液 2～3滴,搖勻后沿試管壁緩緩加入濃硫酸1 mL,則在試液與濃硫酸交界面產(chǎn)生紫色或紫紅色環(huán)。

5.2 檢查酚類化合物

取毛丁白頭翁熱水提取液 1 mL,加 1%三氯化鐵乙醇溶液,溶液呈墨綠色。

將毛丁白頭翁熱水提取液滴于濾紙上,待干燥后,噴灑三氯化鐵—鐵氰化鉀試劑,斑點呈藍色。

5.3 檢查香豆素類化合物

毛丁白頭翁乙醇提取液滴于濾紙上,晾干后,在日光下觀察,熒光現(xiàn)象不明顯,置紫外光下可看見黃綠色熒光,噴灑 1%KOH試劑后,斑點熒光顏色加強。

5.4 檢查三萜及甾醇類化合物

取毛丁白頭翁乙醇提取液 2 mL置于蒸發(fā)皿中,于水浴上蒸干,殘留物加 1 mL氯仿溶解,并轉(zhuǎn)移至小試管中,沿試管壁加入濃硫酸 1 mL,氯仿層顯紅色,硫酸層于紫外光燈下觀察有綠色熒光。

5.5 檢查揮發(fā)油

毛丁白頭翁石油醚提取液滴于濾紙片上,油斑在室溫下?lián)]發(fā),不留痕跡。

6 分析與討論

毛丁白頭翁同屬植物有 70多種,藥材容易混淆,通過生藥學研究,可以從植物形態(tài)、性狀、顯微、理化等方面與其同屬植物相區(qū)別,不會導致藥材的混亂使用,也為醫(yī)藥工作者提供一定的鑒別依據(jù)。

毛丁白頭翁橫切面組織結(jié)構(gòu)圖與相應的粉末組織結(jié)構(gòu)圖相符。

理化預試驗:該植物含有揮發(fā)油、苷類、糖類、酚類、香豆素類、三萜、甾醇類、粘膠、葉綠素等化學成分,符合相關(guān)的文獻報道[5]。

本文微觀特征與宏觀特征相結(jié)合,藥材植物特征與內(nèi)在化學成分的理化特征相結(jié)合,為滇產(chǎn)毛丁白頭翁藥材的鑒別提供了科學客觀的依據(jù),從而保證毛丁白頭翁藥材使用的可靠性,同時也為滇產(chǎn)毛丁白頭翁藥材質(zhì)量標準的規(guī)范化研究提供了一些基本生藥學材料。

[1] 江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典[M].上海:上?？萍汲霭嫔?2005.446-447.

[2] 程用謙.中國植物志[M].北京:科學出版社,1996.94.

[3] 全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編 (上冊)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.193.

[4] 云南省食品藥品監(jiān)督管理局.云南省中藥材標準[M].云南:云南美術(shù)出版社,2005.4.

[5] 余傳隆,黃泰康,丁志道,等.中藥辭海 [M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,1993.1087-1089.