邵一鳴

中國(guó)疾病預(yù)防控制中心性病艾滋病預(yù)防控制中心病毒免疫室，北京102206

獲得性免疫缺陷綜合征(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)由人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)引起，自1981年發(fā)現(xiàn)以來(lái)已成為全球危害最為嚴(yán)重的傳染病之一。盡管防治力度不斷加大，AIDS在全球的蔓延勢(shì)頭仍未得到有效控制。世界衛(wèi)生組織(World Health Organization，WHO)報(bào)告，至2009年全球共有約3 330萬(wàn)HIV/AIDS患者，HIV新感染者260多萬(wàn)例[1]。我國(guó)HIV/AIDS感染報(bào)告數(shù)字由2000年的每年5 000多例增加到2009年的每年68 000多例，主要流行由經(jīng)血傳播轉(zhuǎn)為經(jīng)性傳播，主要累及人群從高危人群轉(zhuǎn)為高危人群與普通人群并行，流行地區(qū)也從農(nóng)村擴(kuò)展到城市，防治形勢(shì)十分嚴(yán)峻[2]。國(guó)內(nèi)、外AIDS的防治對(duì)HIV疫苗的需求更為迫切。本文簡(jiǎn)要回顧HIV疫苗研究的歷史，并結(jié)合近年來(lái)的最新研究進(jìn)展，對(duì)其未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)及機(jī)遇提出一些意見(jiàn)和建議。

1 以往HIV疫苗研究的經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)

HIV疫苗是當(dāng)今人類面臨最難攻克的疫苗之一，科學(xué)界已經(jīng)為之奮斗了20多年，至今未有重大突破。頭10年是第1代HIV疫苗的研究階段。該階段的研究以誘導(dǎo)傳統(tǒng)中和抗體為主，主要參照第1個(gè)成功的基因工程疫苗——乙型肝炎疫苗的技術(shù)策略，開展針對(duì)HIV膜蛋白的蛋白疫苗和多肽疫苗研究。第1代疫苗在經(jīng)過(guò)幾十次Ⅰ、Ⅱ期臨床試驗(yàn)后，美國(guó)VaxGen公司研制的gp120疫苗在美國(guó)和泰國(guó)開展了2次Ⅲ期臨床試驗(yàn)[3]。到21世紀(jì)初，該型疫苗上述試驗(yàn)均以失敗告終[3,4]。

第2代HIV疫苗的研究始于第1代gp120疫苗試驗(yàn)失敗前的20世紀(jì)末。因第1代HIV疫苗Ⅱ期臨床試驗(yàn)結(jié)果十分不理想，疫苗界來(lái)不及等其Ⅲ期臨床試驗(yàn)結(jié)果出來(lái)就放棄了該條技術(shù)路線，從誘導(dǎo)中和抗體的B細(xì)胞疫苗轉(zhuǎn)向誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞的T細(xì)胞疫苗，以降低感染后病毒載量為主要設(shè)計(jì)目標(biāo)。經(jīng)過(guò)10年以非復(fù)制型病毒載體(痘病毒、腺病毒等)為主的研究和幾十次Ⅰ、Ⅱ期臨床試驗(yàn)后，由Merck公司研制的基于腺病毒Ad5載體的T細(xì)胞HIV疫苗也于2007年再次失敗[5]。該疫苗不僅沒(méi)有對(duì)HIV感染產(chǎn)生保護(hù)或降低接種者感染后的病毒載量，還在已感染Ad5的人群中觀察到比對(duì)照組更高的HIV感染率，這對(duì)HIV疫苗研究產(chǎn)生了極大沖擊。

在國(guó)際HIV疫苗界進(jìn)行科學(xué)反思的同時(shí)，國(guó)內(nèi)社會(huì)上也出現(xiàn)了一股思潮：認(rèn)為美國(guó)科研機(jī)構(gòu)和大公司都失敗了，沒(méi)有希望了，我國(guó)應(yīng)減少或放棄此項(xiàng)研究，待國(guó)外成功后再加大研究力度。而筆者認(rèn)為，正因?yàn)閲?guó)際上還沒(méi)突破，我們才應(yīng)該抓住機(jī)遇，加大投入，聯(lián)合攻關(guān)，以求在出現(xiàn)突破時(shí)占有一席之地。如果國(guó)際上已有突破，如幾十年前Merck公司研制成功乙型肝炎疫苗，這時(shí)才應(yīng)該減少對(duì)原創(chuàng)性研究的投入，以保證技術(shù)引進(jìn)所需的資金。包括我國(guó)在內(nèi)的世界各國(guó)，至今還在使用Merck公司的技術(shù)生產(chǎn)乙型肝炎疫苗。

從第1、2代HIV疫苗研究的失敗中至少有以下值得汲取的經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)：①第1代HIV疫苗的研究簡(jiǎn)單模仿乙型肝炎疫苗的技術(shù)路線，忽視了不同病毒感染機(jī)制、病毒變異和自然感染時(shí)有無(wú)免疫保護(hù)及其作用的本質(zhì)不同；②在首次Ⅲ期臨床試驗(yàn)失敗后過(guò)早放棄中和抗體的陣地，退守到T細(xì)胞免疫的防線；③在HIV疫苗的科學(xué)問(wèn)題還沒(méi)有解決時(shí)，就將資源過(guò)分集中于“主流研發(fā)路線”，限制了本該進(jìn)行的百花齊放式的探索性研究；④“主流研發(fā)路線”進(jìn)行了大量重復(fù)研究，消耗了大量人力和物力資源；⑤在疫苗研發(fā)中追求100%的安全性，違背疫苗總會(huì)有一定不良反應(yīng)的客觀規(guī)律，放棄了許多免疫原性更好的疫苗載體，如復(fù)制型病毒載體疫苗的研究。

2 國(guó)際HIV疫苗研究的新動(dòng)向和標(biāo)志性進(jìn)展

HIV疫苗研究一直在失敗和挫折中不斷探索前行，近年來(lái)新的研究理念和技術(shù)路線也在不斷涌現(xiàn)[6]。研究的新動(dòng)向和新領(lǐng)域包括改造HIV天然抗原的新免疫原設(shè)計(jì)研究、以提高HIV抗原免疫原性并兼顧細(xì)胞免疫和體液免疫的復(fù)制型病毒載體研究、以誘導(dǎo)黏膜免疫為主的新載體研究和更加注重經(jīng)誘導(dǎo)固有免疫繼而激活繼發(fā)免疫的新佐劑研究等。病毒學(xué)家和疫苗學(xué)家也更致力于與系統(tǒng)生物學(xué)家和免疫學(xué)家合作，以系統(tǒng)生物學(xué)和系統(tǒng)免疫學(xué)的方法來(lái)指導(dǎo)疫苗免疫保護(hù)機(jī)制的研究，借以尋找并指導(dǎo)HIV疫苗研究的新方向[7-9]。此外，HIV疫苗臨床試驗(yàn)?zāi)康囊舶l(fā)生轉(zhuǎn)變。與傳統(tǒng)的以注冊(cè)為目的的臨床試驗(yàn)不同，HIV疫苗臨床試驗(yàn)將轉(zhuǎn)向以回答只有在人體試驗(yàn)才能得到結(jié)果的特定科學(xué)問(wèn)題而設(shè)計(jì)的試驗(yàn)。平行推進(jìn)多項(xiàng)此類試驗(yàn)，將不會(huì)延緩還會(huì)加速開展傳統(tǒng)的Ⅲ期臨床試驗(yàn)的進(jìn)程[10]。

近兩年來(lái)，國(guó)際HIV疫苗研究進(jìn)展很快，僅舉以下幾項(xiàng)重要的標(biāo)志性成果加以介紹。

2.1 泰國(guó)RV144 Ⅲ期臨床試驗(yàn)

跨國(guó)公司及美國(guó)軍隊(duì)與泰國(guó)衛(wèi)生部合作，在泰國(guó)進(jìn)行由第1、2代HIV疫苗組合(VaxGen的gp120和Aventis Pasteur公司的重組禽痘疫苗)而成的疫苗(RV144)Ⅲ期臨床試驗(yàn)。該試驗(yàn)于2009年宣布了出人意料的試驗(yàn)結(jié)果。對(duì)招募的16 000多名受試者進(jìn)行為期3年的觀察隨訪，結(jié)果顯示該疫苗預(yù)防HIV感染的保護(hù)率為31%[11]。盡管該疫苗因如此低的保護(hù)率無(wú)法獲美國(guó)食品藥品管理局(Food and Drug Administration，F(xiàn)DA)批準(zhǔn)上市，也無(wú)價(jià)值用于預(yù)防，但這是25年的HIV疫苗研究歷史中首次證明，預(yù)防性HIV疫苗的目標(biāo)并非遙不可及，而是可以實(shí)現(xiàn)的。該疫苗試驗(yàn)結(jié)果的發(fā)表，使整個(gè)HIV疫苗界一夜之間由以T細(xì)胞疫苗為重點(diǎn)轉(zhuǎn)回到以B細(xì)胞疫苗為重點(diǎn)的疫苗研究軌道。

2.2 獲取歷史上最強(qiáng)的廣譜中和抗體

美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院(National Institutes of Health，NIH)疫苗研究中心(Vaccine Research Center，VRC)于2010年發(fā)表了他們的重要研究結(jié)果，從HIV感染者分離到迄今為止中和活性最強(qiáng)、中和譜最廣的中和抗體VRC01，并完成其晶體結(jié)構(gòu)的解析[12，30]。VRC01抗體能模仿人體的CD4免疫細(xì)胞，“綁定” HIV的gp120膜蛋白的CD4結(jié)合表位，而后者在HIV入侵人體的機(jī)制中發(fā)揮著非常重要的作用。其結(jié)構(gòu)解析有助于理解中和機(jī)制并為新免疫原設(shè)計(jì)提供重要的參考，但并不能保證獲得誘導(dǎo)類似抗體的新型HIV免疫原。多年前發(fā)現(xiàn)廣譜中和抗體2G12后，經(jīng)過(guò)多項(xiàng)努力，也沒(méi)能設(shè)計(jì)出可誘導(dǎo)出類似抗體的免疫原[13]。近年來(lái)HIV疫苗研究多次證實(shí)，抗原性并不等于免疫原性，兩者是不同的免疫屬性。從抗原刺激到機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體是一漫長(zhǎng)過(guò)程，在免疫學(xué)上仍是一個(gè)“黑箱”。美國(guó)NIH VRC最近發(fā)現(xiàn)，從針對(duì)HIV的低親和力的胚系抗體到高親和力的成熟VRC01抗體，它們之間有極高的突變率和很大的差異。

筆者認(rèn)為，疫苗研制的成功不僅取決于對(duì)病毒抗原結(jié)構(gòu)特性的認(rèn)識(shí)，更有賴于對(duì)人類免疫系統(tǒng)的深入認(rèn)識(shí)。例如，鑒于人類基因組中豐度最高的基因之一是內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒序列[14]，探討很難誘導(dǎo)出抗HIV廣譜中和抗體的原因，還應(yīng)從身為反轉(zhuǎn)錄病毒的HIV是否通過(guò)誘導(dǎo)免疫耐受來(lái)阻止有效中和抗體產(chǎn)生而逃脫免疫監(jiān)視的角度加以考察。尋找打破此類免疫耐受的安全途徑和措施，應(yīng)成為誘導(dǎo)針對(duì)HIV廣譜中和抗體的策略。

2.3 誘導(dǎo)中和抗體的基因治療方案

鑒于很難通過(guò)免疫途徑誘導(dǎo)出抗HIV高效廣譜中和抗體，美國(guó)賓夕法尼亞州立大學(xué)和哈佛大學(xué)的學(xué)者使用腺相關(guān)病毒載體的基因治療技術(shù)，直接將廣譜中和抗體基因注射到猴體內(nèi)。結(jié)果顯示，猴體可持續(xù)表達(dá)高水平的針對(duì)猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus，SIV)的中和抗體，維持時(shí)間達(dá)1年以上。該組猴能完全對(duì)抗SIV的靜脈攻毒[15]。此技術(shù)巧妙地繞過(guò)了機(jī)體的獲得性免疫系統(tǒng)，克服了SIV疫苗很難誘導(dǎo)猴體產(chǎn)生高水平中和抗體的障礙，為探索有效的HIV疫苗提供了一條新的技術(shù)策略。對(duì)HIV疫苗，也可考慮用基因工程技術(shù)直接呈遞抗體，作為疫苗研究的新策略。

2.4 新型T細(xì)胞疫苗設(shè)計(jì)和免疫策略

盡管Merck公司的Ad5疫苗失敗，但研制T細(xì)胞疫苗的努力并未停止。美國(guó)NIH VRC研制的DNA與Ad5聯(lián)合疫苗于2010年開始了新的Ⅱ期臨床試驗(yàn)(HVTN502)。哈佛大學(xué)及其他大學(xué)學(xué)者也設(shè)計(jì)了新的T細(xì)胞疫苗并取得進(jìn)展：使用Ad5的異源聯(lián)合免疫策略可使獼猴對(duì)抗致病性SIV的攻擊，大幅降低SIV載量[16]；對(duì)全球各亞型HIV-1優(yōu)勢(shì)表位序列進(jìn)行優(yōu)化，最終設(shè)計(jì)出嵌合表位的疫苗，并在猴體中證明可有效提高針對(duì)多種HIV-1流行株的免疫反應(yīng)[17]。多價(jià)嵌合型免疫原能誘導(dǎo)針對(duì)各種病毒蛋白多表位的CD8+T細(xì)胞反應(yīng)[18]。一般認(rèn)為，增加HIV免疫反應(yīng)表位數(shù)量和強(qiáng)度，有助于抵御異源病毒的感染(自然感染時(shí)的狀況)。

3 我國(guó)HIV疫苗研究的進(jìn)展

我國(guó)HIV疫苗研究起步雖晚，但近年來(lái)進(jìn)展較快，并具有創(chuàng)新性的研究策略和技術(shù)路線。例如，中國(guó)疾病預(yù)防控制中心(Chinese Center for Disease Control and Prevention，China CDC)根據(jù)多年系統(tǒng)的HIV分子流行病學(xué)研究，篩選出的CN54(CN97001)HIV-1毒株具有很好的代表性，其基因已被我國(guó)和多個(gè)國(guó)家選作HIV候選疫苗的抗原基因[19]。最近國(guó)外學(xué)者證明，該疫苗株膜蛋白誘導(dǎo)中和抗體的能力優(yōu)于他國(guó)的HIV疫苗毒株[20]。

我國(guó)科學(xué)家根據(jù)以前HIV疫苗研制的經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)，開展了按照馬傳染性貧血癥病毒(equine infectious anemia virus，EIAV)疫苗原理進(jìn)行HIV抗原改造的原創(chuàng)路線[21]，并取得提高中和抗體強(qiáng)度和廣度的良好結(jié)果[22]。以我國(guó)具自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的天花疫苗天壇株為基礎(chǔ)開展的臨床前疫苗研究證實(shí)，其可保護(hù)猴抵御同源猴/人類免疫缺陷嵌合病毒(simian-human immunodeficiency virus，SHIV)的攻擊。中國(guó)疾病預(yù)防控制中心和北京生物制品研究所研制的DNA和重組天壇株HIV-1疫苗已順利完成Ⅰ期臨床試驗(yàn)，正向Ⅱ期臨床試驗(yàn)邁進(jìn)[25]。該疫苗是當(dāng)前唯一進(jìn)展到臨床試驗(yàn)階段的復(fù)制型病毒載體HIV疫苗。長(zhǎng)春百克公司研制的DNA和重組痘苗病毒安卡拉株(modified vaccinia virus Ankara，MVA) HIV-1疫苗已順利開始Ⅱ期臨床試驗(yàn)。目前我國(guó)預(yù)防性和治療性HIV疫苗研究的有關(guān)情況詳見(jiàn)表1[26]。

表1我國(guó)部分HIV疫苗研究

Tab.1SelectedHIVvaccineresearchinChina

Organization Vaccine compositionAntigenClinical stageVaccine typeChangchun BCHT Biotechnology Co., Ltd.DNA,MVA (non-replicating)gag/pol/envClinical stage II Preventive vaccineChina CDC/National Sera Vaccine InstituteDNA,Tiantan vaccinia(replicating)gag/pol/nef/env140Clinical stage I Preventive vaccineChina CDCDNA, Tiantan vaccinia(non-replicating)gag/pol/env/nef/tat/rev/PreclinicalPreventive vaccineCAMS/ CAS/ The University of Hong Kong DNA,MVA/Adgag/pol/nefPreclinicalPreventive vaccineChina CDCAAV, Sendai, MVAgag/pol/nefPreclinicalTherapeutic vaccineTsinghua Yuanxing Biopharmaceutical Co., Ltd.rAdenovirusgag/polPreclinicalTherapeutic vaccine

4 HIV疫苗發(fā)展趨勢(shì)及我國(guó)機(jī)遇

成功的HIV疫苗與HIV藥物類似，是將不同原理和技術(shù)研制出的疫苗按特定免疫程序進(jìn)行聯(lián)合應(yīng)用。任何一個(gè)團(tuán)隊(duì)甚至一個(gè)國(guó)家能占有所有種類疫苗的可能性不是很大。西方國(guó)家HIV流行近年來(lái)持續(xù)下降，開展疫苗試驗(yàn)的成本大幅上升，HIV疫苗的研發(fā)和臨床試驗(yàn)越來(lái)越依賴于全球的合作，尤其是發(fā)達(dá)國(guó)家與發(fā)展中國(guó)家的合作。自一組科學(xué)家在Science上呼吁建立全球HIV疫苗企業(yè)計(jì)劃以來(lái)[27]，國(guó)際層面的HIV疫苗研制合作全面展開，蓋茨基金為全球HIV疫苗企業(yè)計(jì)劃提供了數(shù)億美元的巨額資助，并成立秘書處，推動(dòng)全球合作攻關(guān)。最近該企業(yè)計(jì)劃發(fā)布了未來(lái)5年全球HIV疫苗研發(fā)的戰(zhàn)略規(guī)劃，提出以平行推進(jìn)臨床試驗(yàn)和跨學(xué)科臨床前研究為牽引，鼓勵(lì)企業(yè)、青年科學(xué)家和發(fā)展中國(guó)家積極參與，全面推動(dòng)全球HIV疫苗的研發(fā)[28]。當(dāng)前的重點(diǎn)任務(wù)一是在非洲重復(fù)RV144試驗(yàn)，以觀察其在非洲人群中的保護(hù)效果；二是研究RV144疫苗的低保護(hù)率相關(guān)因素。試驗(yàn)的所有樣本對(duì)全球科學(xué)家開放，但研究方案須經(jīng)國(guó)際科學(xué)委員會(huì)的審核并通過(guò)方可取用)[29]；三是大力推動(dòng)創(chuàng)新型HIV疫苗的基礎(chǔ)和臨床研究。

2009年初，我國(guó)HIV疫苗學(xué)者在國(guó)家科技重大專項(xiàng)的支持下，結(jié)成中國(guó)HIV疫苗聯(lián)盟(China AIDS Vaccine Initiative，CAVI)，開展學(xué)術(shù)交流、資料共享、團(tuán)結(jié)合作、聯(lián)合攻關(guān)。CAVI成立提高了我國(guó)HIV疫苗的自主創(chuàng)新能力和國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力，在國(guó)際上產(chǎn)生了積極的影響。2009年，WHO、NIH和全球HIV疫苗企業(yè)計(jì)劃與CAVI合作，在北京召開了亞洲HIV疫苗大會(huì)，啟動(dòng)了亞太HIV疫苗網(wǎng)絡(luò)(AIDS Vaccine for Asia Network, AVAN)的籌建工作。2010年AVAN正式成立[26]，CAVI被亞洲國(guó)家推舉為AVAN的秘書處，組織和協(xié)調(diào)HIV疫苗研發(fā)的地區(qū)合作。

可以相信，在國(guó)家科技重大專項(xiàng)的大力支持下，CAVI的科學(xué)家一定可以在完成既定專項(xiàng)研究計(jì)劃的基礎(chǔ)上，積極參與亞太地區(qū)和全球?qū)用娴腍IV疫苗國(guó)際合作，抓住機(jī)遇，實(shí)現(xiàn)中國(guó)HIV疫苗的跨越式發(fā)展，為HIV疫苗的早日攻克貢獻(xiàn)中國(guó)科學(xué)家的力量。

致謝：

感謝羅振武、鄭本峰和滕濤對(duì)此文撰寫中文獻(xiàn)整理和編輯的幫助。

[1] UNAIDS report on the global AIDS epidemic 2010 [R/OL]. http://www.unaids.org/globalreport/Global_report.htm.

[2] 衛(wèi)生部，UNAIDS, WHO. 2009年中國(guó)艾滋病疫情估計(jì)工作報(bào)告[R/OL]. http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/ cmsresources/mohjbyfkzj/cmsrsdocument/doc9721.pdf.

[3] Flynn NM, Forthal DN, Harro CD, Judson FN, Mayer KH, Para MF, rgp120 HIV Vaccine Study Group. Placebo-controlled phase 3 trial of a recombinant glycoprotein 120 vaccine to prevent HIV-1 infection [J]. J Infect Dis, 2005, 191(5): 654-665.

[4] Pitisuttithum P, Gilbert P, Gurwith M, Heyward W, Martin M, van Griensven F, Hu D, Tappero JW, Choopanya K, Bangkok Vaccine Evaluation Group. Randomized, double-blind, placebo-controlled efficacy trial of a bivalent recombinant glycoprotein 120 HIV-1 vaccine among injection drug users in Bangkok, Thailand [J]. J Infect Dis, 2006, 194(12): 1661-1671.

[5] Buchbinder SP, Mehrotra DV, Duerr A, Fitzgerald DW, Mogg R, Li D, Gilbert PB, Lama JR, Marmor M, Del Rio C, McElrath MJ, Casimiro DR, Gottesdiener KM, Chodakewitz JA, Corey L, Robertson MN, Step Study Protocol Team. Efficacy assessment of a cell-mediated immunity HIV-1 vaccine (the Step Study): a double-blind, randomised, placebo-controlled, test-of-concept trial [J]. Lancet, 2008, 372(9653): 1881-1893.

[6] Fauci AS, Johnston MI, Dieffenbach CW, Burton DR, Hammer SM, Hoxie JA, Martin M, Overbaugh J, Watkins DI, Mahmoud A, Greene WC. HIV vaccine research: the way forward [J]. Science, 2008, 321(5888): 530-532.

[7] Querec TD, Akondy RS, Lee EK, Cao W, Nakaya HI, Teuwen D, Pirani A, Gernert K, Deng J, Marzolf B, Kennedy K, Wu H, Bennouna S, Oluoch H, Miller J, Vencio RZ, Mulligan M, Aderem A, Ahmed R, Pulendran B. Systems biology approach predicts immunogenicity of the yellow fever vaccine in humans [J]. Nat Immunol, 2009, 10(1): 116-125.

[8] Brass AL, Dykxhoorn DM, Benita Y, Yan N, Engelman A, Xavier RJ, Lieberman J, Elledge SJ. Identification of host proteins required for HIV infection through a functional genomic screen [J]. Science, 2008, 319(5865): 921-926.

[9] Pulendran B. Learning immunology from the yellow fever vaccine: innate immunity to systems vaccinology [J]. Nat Rev Immunol, 2009, 9(10): 741-747.

[10] Corey L, Autran B, Picker L. Bridging the gaps between fundamental, preclinical and clinical research: Report from a Global HIV Vaccine Enterprise Working Group [J]. Nat Med, 2010. doi:10.1038/npre.2010.4799.2.

[11] Rerks-Ngarm S, Pitisuttithum P, Nitayaphan S, Kaewkungwal J, Chiu J, Paris R, Premsri N, Namwat C, de Souza M, Adams E, Benenson M, Gurunathan S, Tartaglia J, McNeil JG, Francis DP, Stablein D, Birx DL, Chunsuttiwat S, Khamboonruang C, Thongcharoen P, Robb ML, Michael NL, Kunasol P, Kim JH, MOPH-TAVEG Investigators. Vaccination with ALVAC and AIDSVAX to prevent HIV-1 infection in Thailand [J]. N Engl J Med, 2009, 361(23): 2209-2220.

[12] Zhou T, Georgiev I, Wu X, Yang ZY, Dai K, Finzi A, Kwon YD, Scheid JF, Shi W, Xu L, Yang Y, Zhu J, Nussenzweig MC, Sodroski J, Shapiro L, Nabel GJ, Mascola JR, Kwong PD. Structural basis for broad and potent neutralization of HIV-1 by antibody VRC01 [J]. Science, 2010, 329(5993): 811-817.

[13] Calarese DA, Lee HK, Huang CY, Best MD, Astronomo RD, Stanfield RL, Katinger H, Burton DR, Wong CH, Wilson IA. Dissection of the carbohydrate specificity of the broadly neutralizing anti-HIV-1 antibody 2G12 [J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2005, 102(38): 13372-13377.

[14] L?wer R, L?wer J, Kurth R. The viruses in all of us: characteristics and biological significance of human endogenous retrovirus sequences [J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1996, 93(11): 5177-5184.

[15] Johnson PR, Schnepp BC, Zhang J, Connell MJ, Greene SM, Yuste E, Desrosiers RC, Clark KR. Vector-mediated gene transfer engenders long-lived neutralizing activity and protection against SIV infection in monkeys [J]. Nat Med, 2009, 15(8): 901-906.

[16] Liu J, O’Brien KL, Lynch DM, Simmons NL, La Porte A, Riggs AM, Abbink P, Coffey RT, Grandpre LE, Seaman MS, Landucci G, Forthal DN, Montefiori DC, Carville A, Mansfield KG, Havenga MJ, Pau MG, Goudsmit J, Barouch DH. Immune control of an SIV challenge by a T-cell-based vaccine in rhesus monkeys [J]. Nature, 2008, 457(7225): 87-91.

[17] Corey L, McElrath MJ. HIV vaccines: mosaic approach to virus diversity [J]. Nat Med, 2010, 16(3): 268-270.

[18] Santra S, Liao HX, Zhang R, Muldoon M, Watson S, Fischer W, Theiler J, Szinger J, Balachandran H, Buzby A, Quinn D, Parks RJ, Tsao CY, Carville A, Mansfield KG, Pavlakis GN, Felber BK, Haynes BF, Korber BT, Letvin NL. Mosaic vaccines elicit CD8+T lymphocyte responses that confer enhanced immune coverage of diverse HIV strains in monkeys [J]. Nat Med, 2010, 16(3): 324-328.

[19] Harari A, Bart PA, St?hr W, Tapia G, Garcia M, Medjitna-Rais E, Burnet S, Cellerai C, Erlwein O, Barber T, Moog C, Liljestrom P, Wagner R, Wolf H, Kraehenbuhl JP, Esteban M, Heeney J, Frachette MJ, Tartaglia J, McCormack S, Babiker A, Weber J, Pantaleo G. An HIV-1 clade C DNA prime, NYVAC boost vaccine regimen induces reliable, polyfunctional, and long-lasting T cell responses [J]. J Exp Med, 2008, 205(1): 63-77.

[20] Smith DH, Winters-Digiacinto P, Mitiku M, O’Rourke S, Sinangil F, Wrin T, Montefiori DC, Berman PW. Comparative immunogenicity of HIV-1 clade C envelope proteins for prime/boost studies [J]. PLoS One, 2010, 5(8): e12076.

[21] Li H, Zhang X, Fan X, Shen T, Tong X, Shen R, Shao Y. A conservative domain shared by HIV gp120 and EIAV gp90: implications for HIV vaccine design [J]. AIDS Res Hum Retrovir, 2005, 21(12): 1057-1059.

[22] Liu L, Wan Y, Wu L, Sun J, Li H, Li H, Ma L, Shao Y. Broader HIV-1 neutralizing antibody responses induced by envelope glycoprotein mutants based on the EIAV attenuated vaccine [J]. Retrovirology, 2010: 7: 71.

[23] Huang X, Lu B, Yu W, Fang Q, Liu L, Zhuang K, Shen T, Wang H, Tian P, Zhang L, Chen Z. A novel replication-competent vaccinia vector MVTT is superior to MVA for inducing high levels of neutralizing antibody via mucosal vaccination [J]. PLoS One, 2009, 4(1): e4180.

[24] Yang GB, Liu Q, Sun Q, Liu Y, Liu Y, Li HJ, Sun MS, Dai JJ, Hong KX, Shao Y. HIV-1 specific humoral, cellular and reminiscent immune responses induced in Chinese rhesus macaques by DNA-tiantan vaccinia combined AIDS vaccine [J]. Antivir Ther, 2006, 11(Suppl 2) : 160.

[25] Shao Y, Li T, Wolf H, Liu Y, Liu Y, Wang H, Zhu H, Lv W, Lin W, Chen J, Liang H, Hong K, Jia M. The safety and immunogenicity of HIV-1 vaccines based on DNA and replication competent vaccinia vector in phase I clinical trial [J]. Retrovirology, 2009, 6(Suppl 3): 404. doi:10.1186/1742-4690-6-S3-P404.

[26] Kent SJ, Cooper DA, Chhi Vun M, Shao Y, Zhang L, Ganguly N, Bela B, Tamashiro H, Ditangco R, Rerks-Ngarm S, Pitisuttithum P, Van Kinh N, Bernstein A, Osmanov S, AIDS Vaccine for Asia Network Investigators and Supporters. AIDS vaccine for Asia Network (AVAN): expanding the regional role in developing HIV vaccines [J]. PLoS Med, 2010, 7(9): e1000331.

[27] Klausner RD, Fauci AS, Corey L, Nabel GJ, Gayle H, Berkley S, Haynes BF, Baltimore D, Collins C, Douglas RG, Esparza J, Francis DP, Ganguly NK, Gerberding JL, Johnston MI, Kazatchkine MD, McMichael AJ, Makgoba MW, Pantaleo G, Piot P, Shao Y, Tramont E, Varmus H, Wasserheit JN. Medicine. The need for a global HIV vaccine enterprise [J]. Science, 2003, 300(5628): 2036-2039.

[28] Council of the Global HIV Vaccine Enterprise. The 2010 scientific strategic plan of the Global HIV Vaccine Enterprise [J]. Nat Med, 2010, 16(9): 981-989.

[29] Grant D, Bass E. Understanding the results of RV144, the Thai prime-boost AIDS vaccine trial [J/OL]. http://www.gmhc.org/files/editor/file/ti-0310.pdf.

[30] Wu X, Yang ZY, Li Y, Hogerkorp CM, Schief WR, Seaman MS, Zhou T, Schmidt SD, Wu L, Longo NS, McKee K, O'Dell S, Louder MK, Wycuff DL, Feng Y, Nason M, Doria-Rose N, Connors M, Kwong PD, Roederer M, Wyatt RT, Nabel GJ, Mascola JR. Rational design of envelope identifies broadly neutralizing human monoclonal antibodies to HIV-1 [J]. Science, 2010, 329(5993): 856-861.