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        先天性巨結(jié)腸乳鼠模型的建立和評價(jià)

        2010-01-25 01:01:30王玲朝王春暉王寶西
        中國循證兒科雜志 2010年3期
        關(guān)鍵詞:乳鼠神經(jīng)節(jié)腸管

        王玲朝 王春暉 江 遜 林 燕 王寶西

        先天性巨結(jié)腸(hirschsprung's disease,HD)是病變結(jié)腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞缺如的一種腸道發(fā)育畸形,其病因尚未闡明[1],目前認(rèn)為是遺傳及環(huán)境多種因素綜合所致[2]。HD發(fā)病率約為1/5 000,男∶女為4∶1。HD主要病理改變?yōu)椴∽兘Y(jié)腸段神經(jīng)節(jié)細(xì)胞缺如,病變結(jié)腸持續(xù)性痙攣、狹窄,近端腸腔擴(kuò)張,內(nèi)容物潴留。HD新生兒可表現(xiàn)為胎糞排出延遲和腸梗阻等癥狀,嬰兒及成人可表現(xiàn)為嚴(yán)重的便秘和腹脹,常合并小腸結(jié)腸炎、低位性腸梗阻,嚴(yán)重影響生活質(zhì)量甚至危及生命[2~4]。

        由于直接進(jìn)行人體研究受到倫理學(xué)限制,Sato等[5]于1978年首先用苯扎氯銨(BAC)選擇性損毀鼠腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞成功建立大鼠巨結(jié)腸模型,之后該模型被廣泛應(yīng)用于損毀神經(jīng)方面的研究。Yoneda等[6]于2002年用BAC建立了小鼠巨結(jié)腸模型。目前應(yīng)用于HD研究的動(dòng)物模型有花斑致死鼠和致死斑點(diǎn)鼠[7],該模型與人類HD的病理學(xué)改變非常相似,但其培育困難,早期常死于嚴(yán)重的小腸結(jié)腸炎,存活時(shí)間短,不利于長期觀察研究。既往用BAC建立的大鼠和小鼠模型,是在大鼠和小鼠腸道神經(jīng)系統(tǒng)已經(jīng)發(fā)育健全的基礎(chǔ)上建立的,不符合HD的發(fā)病微環(huán)境。6~7日齡乳鼠腸道神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育尚不健全且接近于胚胎時(shí)期[8],用6~7日齡乳鼠建立的模型更接近于HD的發(fā)病微環(huán)境。本研究以乳鼠制備HD模型,并進(jìn)行模型評價(jià),為進(jìn)一步深入研究HD及其相關(guān)并發(fā)癥的病因、病理機(jī)制、生理機(jī)制、病程演變特征及以Cajal間質(zhì)細(xì)胞(ICC)為靶點(diǎn)治療HD奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

        1 方法

        1.1 動(dòng)物和試劑 6~7日齡SD乳鼠9窩,每窩10只[由第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物中心提供,生產(chǎn)許可證:SCXK(陜)2008-002],乳鼠由母鼠喂養(yǎng),母鼠采用二級鼠料喂養(yǎng),動(dòng)物飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)均遵照第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)與使用規(guī)定。主要試劑:BAC(Sigma公司);兔抗大鼠S-100蛋白多克隆抗體、兔抗大鼠NSE多克隆抗體、兔抗大鼠c-Kit多克隆抗體和羊抗兔FITC-IgG(均購自Boster公司)。

        1.2 分組和HD模型建立 將9窩乳鼠從1~9編號,從隨機(jī)數(shù)字表第5行第8列開始依次讀取1位數(shù)作為隨機(jī)數(shù),錄于編號下,將全部隨機(jī)數(shù)從小至大編序號,規(guī)定序號1~3為實(shí)驗(yàn)組,4~6為對照組,7~9為正常組,各組均為3窩。實(shí)驗(yàn)組術(shù)前將4~5日齡SD乳鼠在第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物中心適應(yīng)性飼養(yǎng)2 d。乙醚麻醉,在無菌條件下行下腹部正中切口,提取降結(jié)腸(圖1),在其腸系膜的無血管區(qū),將0.1%BAC溶液浸泡過的濾紙條(0.8 cm×1 cm)緊貼腸壁環(huán)形包繞結(jié)腸1周,每5 min滴加0.1%BAC溶液100 μL于濾紙上,保持濾紙濕潤。15 min后移去濾紙條,用溫生理鹽水棉球蘸洗結(jié)腸及腹腔,回納腸管,絲線縫合關(guān)腹。對照組用生理鹽水代替0.1%BAC溶液處理降結(jié)腸15 min,操作同實(shí)驗(yàn)組。正常組不做任何處理。術(shù)后母鼠喂養(yǎng),每籠1窩分籠飼養(yǎng)。

        圖1 先天性巨結(jié)腸制備外觀模型

        Fig 1 Hirschsprung's disease neonatal rat model

        Notes Neonatal rat abdominal midline incision to show descending colon

        1.3 模型評價(jià) 術(shù)后每周觀察乳鼠生活習(xí)性、飲食、排便情況及有無腹脹。術(shù)后1、3、5、6和7周每組任意取4只乳鼠處死,實(shí)驗(yàn)組取BAC處理段結(jié)腸,對照組取生理鹽水處理段結(jié)腸,正常組取遠(yuǎn)端結(jié)腸,生理鹽水沖洗腸腔,觀察各組結(jié)腸大體形態(tài)。

        組織病理學(xué)檢查:各組結(jié)腸沿腸系膜緣縱行剪開,在濾紙上將腸壁展開,固定和編號。腸管用10%甲醛緩沖液固定24 h后取材。石蠟包埋、切片,行蘇木精-伊紅染色。光鏡下觀察各組結(jié)腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的病理學(xué)改變。

        免疫組化檢測:以SABC法檢測各組結(jié)腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞S-100蛋白和神經(jīng)細(xì)胞特異性烯醇化酶(NSE)表達(dá)。石蠟切片常規(guī)脫蠟至水,組織抗原微波修復(fù)(檸檬酸鹽修復(fù)液)正常羊血清封閉,滴加兔抗大鼠S-100蛋白多克隆抗體(1∶200),37℃孵育1 h,PBS液沖洗3次,每次2 min,滴加SABC試劑,37℃孵育20 min,PBS洗5 min,共4次,使用DAB顯色試劑盒,取1 mL蒸餾水,加入試劑盒中A、B、C試劑各1滴,混勻后加至切片。室溫顯色,鏡下控制反應(yīng)時(shí)間為20 min,蒸餾水洗滌。用PBS代替一抗作陰性對照。NSE的檢測方法同S-100蛋白。

        免疫熒光檢測:以c-Kit免疫熒光檢測各組結(jié)腸ICC的分布和表達(dá)。石蠟切片常規(guī)脫蠟至水,組織抗原微波修復(fù)(檸檬酸鹽修復(fù)液)正常羊血清封閉。滴加兔抗大鼠c-Kit多克隆抗體(1∶100),37℃孵育1 h,PBS液沖洗3次,每次5 min。再滴加羊抗兔FITC-IgG(1∶200),37℃孵育1 h,PBS液沖洗3次,每次5 min。甘油封片,用PBS代替一抗作陰性對照,激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果。

        2 結(jié)果

        實(shí)驗(yàn)組乳鼠死亡5只,其中術(shù)后1 h被母鼠啃食2只,術(shù)后1 d腸管被BAC腐蝕死亡1只,術(shù)后3 d感染死亡1只,7周后腸穿孔死亡1只。對照組乳鼠術(shù)后1 h被母鼠啃食1只。正常組乳鼠無死亡。

        2.1 一般情況和大體結(jié)腸形態(tài)學(xué)觀察 術(shù)后1~3周實(shí)驗(yàn)組和對照組乳鼠手術(shù)傷口愈合良好,吃奶及糞便正常,正常組未見異常表現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)組:術(shù)后4周3只出現(xiàn)腹脹;術(shù)后5周10只出現(xiàn)腹脹,排便減少,糞便顆粒性狀改變不明顯;術(shù)后6周12只出現(xiàn)腹脹,排便減少,較對照組和正常組糞便顆粒變大。

        處死后大體解剖可見BAC處理段結(jié)腸狹窄。術(shù)后7周實(shí)驗(yàn)組均出現(xiàn)不同程度的排便減少,腹脹,精神萎靡,消瘦,糞便顆粒較對照組和正常組干燥且明顯變大,處死后大體解剖可見BAC處理段結(jié)腸腸管狹窄、痙攣,無蠕動(dòng),病變近端腸管擴(kuò)張,腸腔內(nèi)容物潴留(圖2)。對照組和正常組結(jié)腸未見明顯異常。

        圖2 實(shí)驗(yàn)組術(shù)后7周大體解剖BAC處理段結(jié)腸所見

        Fig 2 Autopsy of experimental rats 7 weeks after BAC treatment

        Notes 7 weeks after BAC treatment,a narrowed segment at the site of BAC treatment,accompanied by distended proximal colon filled with massive feces

        2.2 病理學(xué)檢查結(jié)果 正常組遠(yuǎn)端結(jié)腸和對照組生理鹽水處理段結(jié)腸可見正常的肌間及黏膜下神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,正常組見圖3A。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后1、3周BAC處理段結(jié)腸肌間及黏膜下神經(jīng)節(jié)細(xì)胞與對照組比較減少不明顯(圖3B,C),術(shù)后5、6周可見神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量逐漸減少、體積逐漸變小(圖3D,E),術(shù)后7周神經(jīng)節(jié)細(xì)胞完全消失,腸壁其他結(jié)構(gòu)完整,未發(fā)現(xiàn)瘢痕形成及炎癥細(xì)胞浸潤(圖3F)。

        圖3 正常組和實(shí)驗(yàn)組結(jié)腸組織病理學(xué)檢查(蘇木精-伊紅染色,×100)

        Fig 3 Pathology of normal and experimental group rats(HE,×100)

        Notes A:Normal ganglion cells of the normal group;B:1 week after BAC treatment,ganglion cells had no significant changes;C:3 weeks after BAC treatment,ganglion cells decreased;D:5 weeks after BAC treatment,ganglion cells decreased in the number and the size;E:6 weeks after BAC treatment,ganglion cells decreased obviously in the number and the size;F: 7 weeks after BAC treatment,ganglion cells in the myenteric and submucous plexuses completely disappeared

        2.3 S-100蛋白和NSE的表達(dá) 正常組遠(yuǎn)端結(jié)腸和對照組生理鹽水處理段結(jié)腸S-100蛋白表達(dá)在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的胞質(zhì)和胞核中,兩組差異不明顯,正常組見圖4A。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后1、3周BAC處理段結(jié)腸肌間及黏膜下神經(jīng)節(jié)細(xì)胞S-100蛋白的表達(dá)與對照組比較減少不明顯(圖4B,C),術(shù)后5、6周神經(jīng)節(jié)細(xì)胞S-100蛋白表達(dá)逐漸減少、神經(jīng)節(jié)體積逐漸變小(圖4D,E),術(shù)后7周S-100蛋白表達(dá)完全消失(圖4F)。

        圖4 S-100蛋白在正常組和實(shí)驗(yàn)組結(jié)腸組織的表達(dá)(免疫組化,×100)

        Fig 4 The expression of S-100 protein in normal and experimental group rats(immunohistochemistry,×100)

        Notes A:Normal ganglion cells appeared as brown particles in the normal group;B:1 week after BAC treatment,ganglion cells had no significant changes;C:3 weeks after BAC treatment,ganglion cells decreased;D:5 weeks after BAC treatment,ganglion cells decreased in the number and the size;E:6 weeks after BAC treatment,ganglion cells decreased obviously in the number and the size;F:7 weeks after BAC treatment,ganglion cells completely disappeared

        正常組遠(yuǎn)端結(jié)腸和對照組生理鹽水處理段結(jié)腸組織NSE表達(dá)在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的胞核中,兩組表達(dá)差異不明顯,正常組見圖5A。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后1、3周BAC處理段結(jié)腸肌間及黏膜下神經(jīng)節(jié)細(xì)胞NSE的表達(dá)與對照組比較無明顯改變(圖5B,C),術(shù)后5、6周神經(jīng)節(jié)細(xì)胞NSE表達(dá)逐漸減少、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞體積逐漸變小(圖5D,E),術(shù)后7周神經(jīng)節(jié)細(xì)胞NSE表達(dá)完全消失(圖5F)。

        圖5 NSE在正常組和實(shí)驗(yàn)組結(jié)腸組織的表達(dá)(免疫組化,×100)

        Fig 5 The expression of NSE in normal and experimental group rats(immunohistochemistry,×100)

        Notes A:Normal ganglion cells appeared as brown particles in the normal group;B:1 week after BAC treatment,ganglion cells had no significant changes;C:3 weeks after BAC treatment,ganglion cells decreased;D:5 weeks after BAC treatment,ganglion cells decreased in the number and the size;E:6 weeks after BAC treatment,ganglion cells decreased obviously in the number and the size;F:7 weeks after BAC treatment,ganglion cells completely disappeared

        2.4 免疫熒光檢測c-Kit的表達(dá) 正常組遠(yuǎn)端結(jié)腸和對照組處理段結(jié)腸ICC的分布和形態(tài)相似,差異不明顯,ICC在切面上幾乎呈現(xiàn)連續(xù)性分布,相互連接形成網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu),正常ICC多呈紡錘形,有2~3條突起,正常組ICC的分布和形態(tài)見圖6A。術(shù)后1周實(shí)驗(yàn)組BAC處理段結(jié)腸c-Kit的表達(dá)與正常組較為接近(圖6B),術(shù)后3、5、6和7周c-Kit的表達(dá)逐漸減少,提示ICC在BAC處理段結(jié)腸的分布明顯減少,ICC分布均較對照組和正常組明顯減少,網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)受到破壞,形態(tài)也出現(xiàn)異常,表現(xiàn)為突起變短、變鈍(圖6C~F)。

        圖6 正常組和實(shí)驗(yàn)組結(jié)腸組織c-Kit的表達(dá)(免疫熒光, ×200)

        Fig 6 The expression of c-Kit in normal and experimental group rats(immunofluorescence,×200)

        Notes A:Normal ICC of normal group; B:ICC 1 week after BAC treatment had no significant changes;C:ICC 3 weeks after BAC treatment decreased,D:ICC 5 weeks after BAC treatment decreased obviously,the network was disappeared;E:ICC 6 weeks after BAC treatment decreased obviously,the network was disappeared,and the configuration was abnormal;F:ICC 7 weeks after BAC treatment,decreased obviously,the network was disappeared,and the configuration was abnormal,the ICC got blunted and short processes

        3 討論

        研究發(fā)現(xiàn),HD與ICC的減少有密切關(guān)系[9]。Rolle等[10]發(fā)現(xiàn)HD患者結(jié)腸腸管的肌間ICC比正常對照組顯著減少。王寶西等[11]研究發(fā)現(xiàn)ICC分布減少和形態(tài)異??蓪?dǎo)致HD的發(fā)生。HD患兒由于病變結(jié)腸腸壁缺少神經(jīng)節(jié)細(xì)胞使腸壁痙攣、腸腔狹窄,使糞便滯留在近端結(jié)腸,該段腸管繼發(fā)性擴(kuò)張、肥厚,形成巨結(jié)腸。因此選擇性損毀結(jié)腸肌間及黏膜下神經(jīng)節(jié)細(xì)胞是制備HD動(dòng)物模型的理論依據(jù)。BAC選擇性損傷腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的機(jī)制可能是BAC長分子鏈與神經(jīng)軸突膜活性基團(tuán)多個(gè)位點(diǎn)結(jié)合并注入膜內(nèi),引起膜腫脹,離子自由進(jìn)入膜內(nèi),進(jìn)而引起膜的去極化,導(dǎo)致動(dòng)作電位和靜息電位快速和不可逆地減小。當(dāng)BAC作用于結(jié)腸壁時(shí),膜電位比平滑肌細(xì)胞低的神經(jīng)細(xì)胞易受到損傷,從而選擇性地?fù)p傷神經(jīng)細(xì)胞,而不損傷其他細(xì)胞組織[12]。中國學(xué)者也用該方法成功地建立了成年動(dòng)物HD模型[13~15],但各研究中BAC濃度、作用時(shí)間、作用腸段長度,模型完成所需時(shí)間及所采用動(dòng)物有所不同。本研究采用0.1%BAC作用在1 cm的乳鼠結(jié)腸段15 min,術(shù)后7周神經(jīng)節(jié)細(xì)胞完全消失,提示模型建立成功。

        在預(yù)實(shí)驗(yàn)中術(shù)后乳鼠存活率僅為50%,多在術(shù)后3 d內(nèi)死亡,主要原因?yàn)椋喝藶榈漠愇都把E造成母鼠啃食乳鼠;手術(shù)不熟練致使乳鼠手術(shù)損傷加重;術(shù)后乳鼠對新環(huán)境不適應(yīng);術(shù)中和術(shù)后乳鼠體溫降低;清洗腹腔不徹底使BAC腐蝕乳鼠腹腔其他臟器;術(shù)后切口感染等。通過總結(jié),采取術(shù)前乳鼠在飼養(yǎng)室適應(yīng)1~2 d新環(huán)境;熟練手術(shù)步驟,做到快、準(zhǔn)、輕和細(xì),盡量減少對乳鼠的創(chuàng)傷;盡量減少BAC滲入腹腔;術(shù)中和術(shù)后加強(qiáng)對乳鼠保暖;術(shù)后給乳鼠體表涂抹適量母鼠尿液,覆蓋人為異味;術(shù)中嚴(yán)格無菌操作,術(shù)后切口涂適量青霉素粉劑預(yù)防感染等措施使乳鼠存活率明顯提高。

        本研究發(fā)現(xiàn)ICC在實(shí)驗(yàn)組和對照組的分布、數(shù)量和形態(tài)上均有差異。實(shí)驗(yàn)組術(shù)后3~7周ICC的數(shù)量明顯減少,殘存ICC突起變短、變鈍,連續(xù)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)破壞,與HD患兒結(jié)腸狹窄段神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和ICC改變的特點(diǎn)相一致[16]。ICC是一種特殊類型的間質(zhì)細(xì)胞,廣泛分布于消化道,是胃腸慢波活動(dòng)的起搏器和傳導(dǎo)細(xì)胞,也是腸神經(jīng)作用的首要靶細(xì)胞[17]。ICC的基因表達(dá)產(chǎn)物c-Kit對于ICC表型的發(fā)育和維持是必需的,因此c-Kit成為胃腸道ICC的特異性標(biāo)志物??杀磉_(dá)于ICC、肥大細(xì)胞及造血細(xì)胞等多種細(xì)胞[18]。在胃腸道組織中只有ICC和肥大細(xì)胞表達(dá)c-Kit,從而有較高的特異性[19],c-Kit 受體被廣泛用于胃腸道ICC的鑒定[20]。肥大細(xì)胞數(shù)量很少,且其細(xì)胞形態(tài)很容易和ICC區(qū)分[21],因此,本研究應(yīng)用c-Kit特異性抗體和形態(tài)學(xué)的方法鑒定ICC,c-Kit表達(dá)減少,提示ICC的減少。

        本研究用6~7日齡乳鼠成功建立HD模型,模型建立后實(shí)驗(yàn)組乳鼠出現(xiàn)排便減少,腹脹,精神萎靡,消瘦,體重減輕,糞便顆粒變干和變大。大體解剖發(fā)現(xiàn)BAC處理段腸管狹窄、痙攣,無蠕動(dòng),病變近端腸管擴(kuò)張,腸腔內(nèi)容物潴留。NSE和S-100蛋白表達(dá)逐漸減少至消失,表明神經(jīng)節(jié)細(xì)胞逐漸減少至消失,c-Kit的表達(dá)逐漸減少;提示模型建立成功。

        本研究的不足之處和局限性:①技術(shù)方法不完善,未能使用免疫組化雙標(biāo)及多標(biāo)術(shù)使各組的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、ICC共同顯色,以使結(jié)果更嚴(yán)謹(jǐn)和直觀;②未從分子生物學(xué)方面研究模型的特性。

        [1]Zhou MN(周妙妮),Zhang CN,Li JC.Research progress of molecular genetic pathogenesis of Hirschsprung disease.International Journal of Genetics(國際遺傳學(xué)雜志),2007,30(3):217-220

        [2]de Lorijn F, Boeckxstaens GE, Benninga MA. Sympto-matology,pathophysiology,diagnostic work-up,and treatment of Hirschsprung's disease in infancy and childhood.Curr Gastroenterol Rep,2007,9(3):245-253

        [3]Chen F, Winston JH, Jain SK, et al.Hirschsprung′s disease in a young adult: report of a case and review of the literature. Ann Diagn Pathol,2006,10(6):347-351

        [4]Kessmann J.Hirschsprung's disease:diagnosis and management.Am Fam Physician,2006,74(8):1319-1322

        [5]Sato A,Yamamoto M,Imamura K,et al.Pathophysiology of aganglionic colon and anorectum:an experimental study on a ganglionosis produced by a new method in the rat.J Pediatr Surg,1978,13(4):399-435

        [6]Yoneda A, Shima H, Nemeth L, et al.Selective chemical ablation of the enteric plexus in mice.Pediatr Surg Int,2002,18(4):234-237

        [7]Robertson K, Mason I, Hall S. Hirschsprung′s disease: genetic mutations in mice and men. Gut,1997,41(4):436-441

        [8]Burns AJ, Roberts RR, Bornstein JC, et al.Development of the enteric nervous system and its role in intestinal motility during fetal and early postnatal stages.Semin Pediatr Surg, 2009, 18(4):196-205

        [9]Hou Y(侯豫),Yang Y,Zhao X,et al.Expression of glial cell derived neurotrophic factor in Hirschsprung′s disease.J Appl Clin Pediatr(實(shí)用兒科臨床雜志),2008,23(7):507-509

        [10]Rolle U, Piotrowska AP, Nemeth L, et al.Altered distribution of interstitial cells of Cajal in Hirschsprung disease. Arch Pathol Lab Med,2002,126(8):928-933

        [11]Wang BX(王寶西),Hou Y,Yang Y.Expression and distribution of glial cell derived neurotrophic factor,interstitial cells of Cajal and Connexin 43 in Hirschsprung′s disease.Chin J Evid Based Pediatr(中國循證兒科雜志),2009,11(3):333-339

        [12]Levin RJ.Actions of spermicidal and virucidal agents on electrogenic ion transfer across human vaginal epithelium in vitro.Pharmacol Toxicol,1997,81(5):219-225

        [13]Xu JR(徐紀(jì)榮),Jing XQ,Chen XZ.Establishment of experimental aganglionosis model and observation of its biological features in rat.Journal of Chongqing Medical University (重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)),2005,30 (4):594-597

        [14]Liu W(劉偉),Wu RD,Dong YL,et al.An animal model of aganglional megacolon.Chin J Pediatr Surg(中華小兒外科雜志),2007,28(4):208-210

        [15]Shu XG(舒曉剛),Chen JB,Wang GB,et al.Establishment and biological characteristics of aganglionosis mouse model.Chin J Exp Surg (中華實(shí)驗(yàn)外科雜志),2008,25(5):671-672

        [16]Rumessen JJ.Ultrastructure of interstitial cells of Cajal at the colonic submuscular border in patients with ulcerative colitis.Gastroenterology,1996,111(6):1447-1455

        [17]Seki K,Komuro T.Immunocytochemical demonstration of the gap junction proteins connexin 43 and connexin 45 in the musculature of the rat small intestine.Cell Tissue Res,2001,306(3):417-422

        [18]Luo M(羅曼),Li HF.Expression of c-Kit tyrosine receptor and intercellular adhesion molecule-1 in endometriosis.China Journal of Modern Medicine(現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志),2008,18(11):1571-1574

        [19]Streutker CJ, Huizinga JD, Driman DK, et al.Interstitial cells of Cajal in health and disease.Part I:Normal ICC structure and function with associated motility disorders.Histopathology,2007,50(2):176-189

        [20]Vannucchi MG.Receptors in interstitial cells of Cajal: identification and possible physiological roles.Microsc Res Tech,1999,47(5):325-335

        [21]Yan JA(鄢俊安),Song B.Research on ICC-like Cells of Bladder.Progress in Modern Biomedicine(現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展),2009,9(3):598-600

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