張明軍

●成果報(bào)告

運(yùn)動(dòng)對(duì)RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠骨骼肌PI3-K表達(dá)的影響

張明軍

目的：研究運(yùn)動(dòng)對(duì)RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠骨骼肌PI3-K表達(dá)的影響。方法：8周齡雄性SD大鼠給予重組RBP43μgg-1體重腹腔注射，12小時(shí)注射一次，持續(xù)注射3周。設(shè)RBP4+運(yùn)動(dòng)組（RE）、RBP4安靜組（RR）和正常安靜對(duì)照組（C），RE組予3周無(wú)負(fù)重游泳訓(xùn)練，60 min/天. ELISA、液閃計(jì)、免疫組化和免疫印跡法分別檢測(cè)血清RBP4，胰島素抵抗指數(shù)HOMA-IR、葡萄糖攝取率和骨骼肌PI3-K表達(dá)。結(jié)果：RBP4注射組血清RBP4和HOMA-IR顯著高于未注射RBP4的正常安靜對(duì)照組，葡萄糖攝取率顯著低于正常安靜對(duì)照組；RE組血清RBP4和HOMA-IR顯著低于RR組，葡萄糖攝取率顯著高于RR組。RE組骨骼肌細(xì)胞PI3-K蛋白表達(dá)顯著高于RR組。結(jié)論：游泳運(yùn)動(dòng)能夠增加RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠骨骼肌PI3-K表達(dá)，促進(jìn)葡萄糖攝取，改善胰島素抵抗。

運(yùn)動(dòng)；視黃醇結(jié)合蛋白4；胰島素抵抗；磷酸肌醇-3-激酶

視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）是一類(lèi)特異性結(jié)合視黃醇的蛋白質(zhì)，主要由脂肪細(xì)胞分泌[1]。研究發(fā)現(xiàn)，RBP4是導(dǎo)致胰島素抗性的脂肪因子，在胰島素抗發(fā)展過(guò)程中起到一個(gè)關(guān)鍵作用，具有胰島素抗性的小鼠和患有肥胖和2型糖尿病的病人體內(nèi)，血清RBP4的水平是升高的[2]。升高的RBP4水平可以用于評(píng)價(jià)胰島素抵抗程度，并與心血管危險(xiǎn)因子的關(guān)系密切[3]。研究顯示，運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練能夠降低不同年齡研究對(duì)象的RBP4水平[3-4]，提示運(yùn)動(dòng)可以通過(guò)降低RBP4水平，提高胰島素敏感性。

前期對(duì)運(yùn)動(dòng)改善RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗機(jī)制進(jìn)行探索發(fā)現(xiàn)，RBP4抑制了胰島素信號(hào)傳導(dǎo)的關(guān)鍵蛋白胰島素受體（IR）和胰島素受體底物1（IRS-1）的蛋白表達(dá)和磷酸化，進(jìn)行8周游泳運(yùn)動(dòng)后，IRS-1的磷酸化抑制被解除，葡萄糖攝取率提高[5]。在胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中，具有酪氨酸激酶活性的跨膜受體胰島素受體與胰島素結(jié)合后，自身發(fā)生自磷酸化，使胰島素受體底物的酪氨酸殘基磷酸化，使酪氨酸激酶自身激活，活化的受體酪氨酸激酶殘基為效應(yīng)蛋白提供了附著點(diǎn)，募集眾多重要的效應(yīng)蛋白，將信號(hào)傳遞給細(xì)胞內(nèi)不同的信號(hào)傳遞通路，其中包括磷酸肌醇-3-激酶（PI-3-kinase）通路，胰島素介導(dǎo)的許多生物學(xué)效應(yīng)是由該通路介導(dǎo)的。本文采用重組RBP4注射活體大鼠，獲得高RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗大鼠模型，觀察運(yùn)動(dòng)后胰島素抵抗和骨骼肌細(xì)胞PI3-K的表達(dá)變化，進(jìn)一步深入探討運(yùn)動(dòng)影響RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗機(jī)制。

1 研究材料與方法

1.1 材 料

胰島素（Sigma-Aldrich）、2-Deoxy-D-[I-3H]-glucose（Sigma-Aldrich）、抗PI3-K多克隆抗體（ProSpec）以及相應(yīng)的第二抗體、RBP4ELISA試劑盒（Biosource）、胰島素放射免疫試劑盒（Biogenesis）、重組RBP4（Alexis）均購(gòu)自廈門(mén)慧嘉生物技術(shù)公司。

1.2 方 法

1.2.1 重組RBP4注射與運(yùn)動(dòng)方案 雄性SD大鼠18只，8周齡，體重180～210 g，隨機(jī)分為RBP4+運(yùn)動(dòng)組（RE）12只、RBP4安靜組（RR）6只，2組大鼠給予重組RBP4腹腔注射[2]，3μg/g體重，12小時(shí)注射一次，持續(xù)注射3周。RE組大鼠同時(shí)進(jìn)行游泳訓(xùn)練，按照Ploug方法[6]訓(xùn)練3周，RE組6只大鼠同時(shí)在直徑47 cm內(nèi)壁光滑的塑料桶內(nèi)進(jìn)行游泳訓(xùn)練，水深60 cm，水溫保持在35℃，游泳訓(xùn)練時(shí)間為晚上19點(diǎn)；大鼠10 min/天適應(yīng)性游泳訓(xùn)練2天，第3天后每天無(wú)負(fù)重持續(xù)游泳60 min，每周訓(xùn)練5天，周六、周日休息，持續(xù)3周。訓(xùn)練早期大鼠不適應(yīng)，出現(xiàn)反復(fù)下沉和溺水傾向時(shí)，撈出休息，然后補(bǔ)足訓(xùn)練時(shí)間；出現(xiàn)大鼠抱團(tuán)、漂浮現(xiàn)象時(shí)予以驅(qū)趕，使之處于持續(xù)運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，保證訓(xùn)練效果。安靜對(duì)照組大鼠浸水后撈出。游泳結(jié)束后干毛巾擦拭，電吹風(fēng)吹干。雄性SD大鼠6只為正常安靜對(duì)照組（C）。

1.2.2 血清RBP4和胰島素抵抗指數(shù)的檢測(cè) RBP4的測(cè)定采用雙抗體夾心酶標(biāo)免疫分析法。胰島素測(cè)定采用放射免疫分析法。評(píng)價(jià)胰島素敏感性的方法采用穩(wěn)態(tài)模式評(píng)估法，該方法是假定肝臟和外周組織的胰島素抵抗相等，按血葡萄糖和胰島素在不同器官（包括胰腺、肝和周?chē)M織）的相互影響而建立的數(shù)學(xué)模型。此模型的計(jì)算公式涉及空腹血糖和空腹胰島素，即穩(wěn)態(tài)模型的胰島素抵抗指數(shù)（HOMA－IR）=空腹胰島素（國(guó)際單位/ L）×以空腹葡萄糖（mmoL/L）/22.5。

1.2.3 骨骼肌細(xì)胞葡萄糖攝取率和PI-3K表達(dá)的檢測(cè) 骨骼肌細(xì)胞葡萄糖攝取率檢測(cè)。第3周運(yùn)動(dòng)后，6只免疫組化法檢測(cè)PI3－K表達(dá)的大鼠10%水合氯醛腹腔注射麻醉，心臟取血，4%多聚甲醛灌注后取腓腸肌，進(jìn)行24小時(shí)外固定。6只免疫印跡法檢測(cè)PI3－K表達(dá)的大鼠10%水合氯醛腹腔注射麻醉，心臟取血，斷頭處死后分離腓腸肌細(xì)胞，25 mmol/L 2－Deoxy－D－[I－3H]－glucose分別孵育各組骨骼肌細(xì)胞，之后，細(xì)胞轉(zhuǎn)入Kerbs－Ringers液，分別添加胰島素（10U/L）或不予胰島素孵育24 h，液閃計(jì)數(shù)儀測(cè)定骨骼肌細(xì)胞葡萄糖攝取率。各組內(nèi)同比重復(fù)2次，實(shí)驗(yàn)共重復(fù)5次。

免疫組化法檢測(cè)腓腸肌細(xì)胞PI－3K的表達(dá)。HE常規(guī)染色：制作4 μm的石蠟切片，脫蠟，Harris蘇木素液染色，脫水、透明、中性樹(shù)膠封片，顯微鏡下觀察：細(xì)胞核呈藍(lán)色胞漿呈紅色。免疫組織化學(xué)染色：脫蠟，檸檬酸鹽緩沖液（pH＝6.0）高溫高壓熱修復(fù)抗原，3%過(guò)氧化氫溶液浸泡10 min阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，PBS振洗。l∶20正常二抗血清室溫10 min封閉，甩去血清后加一抗（1∶200），置濕盒內(nèi)37℃60 min，PBS清洗，擦片后加二抗（試劑盒配置），置濕盒內(nèi)37℃孵育10 min，清洗，加入2滴DAB顯微鏡下觀察，顯色3～5 min，流水沖洗10～15 min終止顯色。脫水、透明、固封。顯微鏡下觀察：核紫藍(lán)色，陽(yáng)性呈棕黃色，胞漿或胞膜染色陽(yáng)性，以低倍顯微鏡在每張切片上隨即選取5個(gè)視野，數(shù)碼成像系統(tǒng)攝片，IPP5.0（美國(guó)）專(zhuān)業(yè)圖像分析系統(tǒng)分析染色陽(yáng)性物質(zhì)，測(cè)定累計(jì)光密度（intergrated optical density，IOD）。

免疫印跡法檢測(cè)PI3－K的表達(dá)。DNP離心分離骨骼肌細(xì)胞，細(xì)胞分別經(jīng)PBS洗2次，使用細(xì)胞溶解液消化1 h，離心15 min（4℃、12 000 g），采取上清液放入－80℃中保存?zhèn)溆?。West bloting法測(cè)定PI－3K蛋白表達(dá)，100 μg細(xì)胞溶解物SDS－PAGE蛋白分離，然后轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜。在室溫用5%低脂奶粉PBS液封膜3 h。加入抗PI3－K抗體（工作濃度1∶4 000）4℃孵育過(guò)夜，洗滌后加入相應(yīng)辣根過(guò)氧化酶標(biāo)記的Ⅱ抗（工作濃度1∶5 000）分別孵育1 h，洗膜方法同前。充分洗滌后與ECL（增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光劑，英國(guó)Amersham）反應(yīng)，即刻與KadakX－Omat底片曝光洗片后用LeicaQ550－IW圖像分析儀（德國(guó)）進(jìn)行掃描，測(cè)定光密度，進(jìn)行定量分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)以SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X± S）表示，Kolmogorov－Smirnov檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的正態(tài)分布，組間進(jìn)行方差分析，采用LSD檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01為差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié) 果

2.1 血清RBP4和胰島素抵抗指數(shù)變化

3周后，RE組和RR組大鼠血清RBP4水平顯著高于C組（P＜0.01）；RE組大鼠血清RBP4水平顯著低于RR組（P＜0.01）；RE組和RR組大鼠HOMA－IR顯著高于C組（P＜0.01）；RE組大鼠HOMA－IR顯著低于RR組（P＜0.01）（見(jiàn)表1）。

表1 血清RBP4和胰島素抵抗指數(shù)變化Tab 1 Changes in serum RBP4 and HOMA-IR of rats（n=6）

2.2 骨骼肌細(xì)胞葡萄糖攝取率變化

3周后，RE組和RR組大鼠骨骼肌基礎(chǔ)狀態(tài)下（未添加胰島素）和胰島素刺激狀態(tài)下的葡萄糖攝取率均顯著低于C組（P＜0.01）；與RR組相比，RE組骨骼肌基礎(chǔ)狀態(tài)下（未添加胰島素）和胰島素刺激狀態(tài)下的葡萄糖攝取率顯著增加（P＜0.01）（見(jiàn)表2）。

表2大鼠骨骼肌葡萄糖攝取率變化Tab 2 Changes in glucose uptake rate of rats skeletal muscle（n=6）RBP4+運(yùn)動(dòng)組（RE）RBP4安靜組（RR） 正常安靜對(duì)照組（C）基礎(chǔ)狀態(tài) 3.3±0.2ab 1.7±0.3a 5.8±0.4胰島素刺激狀態(tài) 5.5±0.1ab 3.8±0.2a 8.1±0.4

2.3 骨骼肌細(xì)胞PI3-K的表達(dá)變化

免疫組化染色結(jié)果顯示PI3－K于骨骼肌細(xì)胞漿中表達(dá)，呈棕黃色陽(yáng)性顆粒，C組骨骼肌細(xì)胞漿內(nèi)見(jiàn)大量棕黃色陽(yáng)性顆粒，RE組骨骼肌漿內(nèi)見(jiàn)比較明顯棕黃色陽(yáng)性顆粒，RR照組僅見(jiàn)少量棕黃色陽(yáng)性顆粒分布（見(jiàn)圖1）。3周后，RE組和RR組大鼠骨骼肌PI3－K陽(yáng)性染色累計(jì)光密度均值均顯著低于C組（P＜0.01）；與RR組相比，RE組骨骼肌PI3－K陽(yáng)性染色累計(jì)光密度均值顯著增加（P＜0.01）（見(jiàn)圖2）。

免疫印記結(jié)果顯示：3周后，RE組和RR組大鼠骨骼肌基礎(chǔ)狀態(tài)下（未添加胰島素）和胰島素刺激狀態(tài)下PI3－K蛋白表達(dá)均顯著低于C組（P＜0.01）；與RR組相比，RE組骨骼基礎(chǔ)狀態(tài)下（未添加胰島素）和胰島素刺激狀態(tài)下PI3－K蛋白表達(dá)顯著增加（P＜0.01）（見(jiàn)圖3）。

圖2 大鼠骨骼肌PI3-K的表達(dá)變化Fig 2 Protein expression of PI3-Kin rats skeletal muscle

圖3 大鼠骨骼肌基礎(chǔ)和胰島素刺激狀態(tài)下PI3-K的表達(dá)變化Fig 3 Protein expression of PI3-Kin rats skeletal muscle after incubalation with orwithout insulin.

3 討 論

本研究結(jié)果顯示，大鼠經(jīng)過(guò)RBP4注射3周后，RE組大鼠和RR組大鼠血清RBP4水平和HOMA－IR水平顯著高于未注射RBP4的C組大鼠。對(duì)2組RBP4注射大鼠的進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，RE組大鼠血清RBP4水平顯著低于RR組，較RR組下降30%；RE組大鼠HOMA－IR也顯著低于RR組，較RR組下降44%，結(jié)果與以往運(yùn)動(dòng)對(duì)RBP4影響的研究一致[3－4，7]。胰島素抵抗不僅是2型糖尿病的發(fā)病基礎(chǔ)，還是代謝綜合征（糖尿病、肥胖、高血壓病、動(dòng)脈粥樣硬化、脂肪肝等疾?。┑墓餐牟±砘A(chǔ)。目前的研究中常用的胰島素抵抗的評(píng)價(jià)方法包括：葡萄糖耐量試驗(yàn)（OGTT）、HOMA－IR、胰島素敏感性指數(shù)（ISI）和胰島素釋放試驗(yàn)（AIC）等，除了正常血糖高胰島素鉗夾試驗(yàn)這一“金標(biāo)準(zhǔn)”外，其它方法在評(píng)價(jià)胰島素抵抗時(shí)各有不足之處。本研究采用HOMA－IR作為胰島素抵抗的評(píng)價(jià)指標(biāo)，其數(shù)學(xué)模型的理論依據(jù)是肝臟和胰島β細(xì)胞在調(diào)節(jié)血糖和胰島素濃度時(shí)存在一個(gè)負(fù)反饋環(huán)路。該方法與正常血糖高胰島素鉗夾試驗(yàn)比較，具有簡(jiǎn)單方便，易于操作的特點(diǎn)，自Matthews等首次將HOMA－IR運(yùn)用于胰島素抵抗的評(píng)價(jià)后便成為很多研究中最為常用的指標(biāo)之一[8]。

胰島素能夠提高組織對(duì)葡萄糖的攝取率，機(jī)制是胰島素與靶細(xì)胞的胰島素信號(hào)蛋白相互作用，最終能夠增加葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體從細(xì)胞內(nèi)池向細(xì)胞膜的運(yùn)動(dòng)[9]。胰島素在不同的組織、細(xì)胞中通過(guò)復(fù)雜的信號(hào)級(jí)聯(lián)放大作用發(fā)揮不同的生理作用[10]。胰島素與IR結(jié)合，激活I(lǐng)R的酪氨酸蛋白激酶的活性，導(dǎo)致IR、IRS1、IRS2、src同源性/膠原蛋白和pp60/IRS3的酪氨酸磷酸化[10]，隨后，酪氨酸磷酸化的底物借助SH2結(jié)構(gòu)域募集磷脂酰肌醇－3激酶（PI3－K）的P85亞單位和生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白（GRB），PI3－K酶的激活導(dǎo)致了包含葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體4（GLUT4）的囊泡的轉(zhuǎn)位增加，從而增加骨骼肌和脂肪細(xì)胞的葡萄糖攝取[11]。本研究中大鼠經(jīng)過(guò)RBP4注射3周后，與C組相比，RE組和RR組大鼠均出現(xiàn)胰島素抵抗，葡萄糖攝取率均比安靜正常大鼠顯著下降；對(duì)RBP4注射后的大鼠進(jìn)行運(yùn)動(dòng)干預(yù)后發(fā)現(xiàn)，RE組大鼠骨骼肌基礎(chǔ)和胰島素刺激狀態(tài)下的葡萄糖攝取率顯著高于RR組，基礎(chǔ)和胰島素刺激狀態(tài)下的葡萄糖攝取率較RR組分別增加94%和45%。綜合上述研究結(jié)果可以判定：3周游泳運(yùn)動(dòng)能夠緩解RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗，增加骨骼肌的葡萄糖攝取，但是具體機(jī)制尚不明確。

PI3－K是由調(diào)節(jié)亞基和催化亞基組成的異源二聚體，P85調(diào)節(jié)亞基是多種細(xì)胞內(nèi)激酶和受體酪氨酸激酶的磷酸化底物，能夠通過(guò)本身SH2結(jié)構(gòu)域與許多酪氨酸激酶種磷酸化的酪氨酸殘基結(jié)合，P85－酪氨酸蛋白激酶之間可以通過(guò)包括IRS－1在內(nèi)的適配蛋白發(fā)揮作用。在組成PI3－K家族的成員中，ClassIPI3－Ks是由兩個(gè)亞類(lèi)IA和IB組成，分別傳導(dǎo)來(lái)自酪氨酸激酶和G蛋白耦聯(lián)受體的信號(hào)。PI3－K催化磷脂酰肌醇在D3位的磷酸化，使底物PIP2轉(zhuǎn)化為PIP3。P85α、β、γ 3種不同基因編碼中P85α可能對(duì)P110亞基活性有負(fù)性調(diào)節(jié)作用，該調(diào)節(jié)功能的發(fā)揮與P85的兩個(gè)SH2結(jié)構(gòu)域、一個(gè)位于蛋白內(nèi)部與P110結(jié)合的結(jié)構(gòu)域、一個(gè)位于氨基酸末端的SH3結(jié)構(gòu)域和BCR同源結(jié)構(gòu)域有關(guān)，PI3－K的另外兩個(gè)剪切異構(gòu)體P55α和P50α由于缺失SH3結(jié)構(gòu)域和BCR同源結(jié)構(gòu)域，催化活性超過(guò)P85α。P110亞基也由3種基因編碼（α、β、γ），還有相同結(jié)構(gòu)域，PI3－K家族的成員中ClassII和ClassIII可能與抗原遞呈和細(xì)胞毒作用有關(guān)。P13－K可被生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和胰島素等細(xì)胞外信號(hào)刺激激活。P13－K的靶蛋白是蛋白激酶B（PKB）/Akt，在磷脂酰肌醇依賴(lài)的蛋白激酶（PDK）的協(xié)同作用下，P13－K激活產(chǎn)物導(dǎo)致Akt從胞漿轉(zhuǎn)位到質(zhì)膜，并促進(jìn)Akt的Ser473和Thy308位點(diǎn)磷酸化，激活的Akt主要通過(guò)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、糖原合成酶激酶－3（GSK－3）等下游底物磷酸化而發(fā)揮廣泛的生物學(xué)效應(yīng)[12－13]。為了進(jìn)一步探索運(yùn)動(dòng)改善RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗機(jī)制，我們挑選胰島素信號(hào)傳導(dǎo)通路中的關(guān)鍵酶PI3－K為觀察指標(biāo)，分別采用免疫組化和免疫印跡的方法對(duì)骨骼肌細(xì)胞內(nèi)PI3－K的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：RBP4注射3周后，RE組和RR組大鼠的PI3－K表達(dá)均比C組顯著下降；運(yùn)動(dòng)干預(yù)后，RE組大鼠骨骼肌內(nèi)PI3－K的表達(dá)量則較RR組顯著增加，隨后的免疫印跡結(jié)果也與免疫組化一致。

胰島素是重要的P13－K/AKt/mTOR信號(hào)通路的細(xì)胞外信號(hào)刺激激素，而運(yùn)動(dòng)可以增加骨骼肌細(xì)胞對(duì)胰島素的敏感性，通過(guò)激活P13－K/AKt/mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑增加葡萄糖的吸收和利用，調(diào)節(jié)血糖平衡。RBP4是一種脂肪因子，作用廣泛，對(duì)于鼠骨骼肌細(xì)胞的胰島素信號(hào)傳導(dǎo)也會(huì)產(chǎn)生影響，研究顯示，RBP4通過(guò)影響鼠骨骼肌細(xì)胞IRS1和PI3－K酶抑制胰島素信號(hào)的傳導(dǎo)，RBP4注射21天后，小鼠骨骼肌胰島素刺激狀態(tài)下的PI3－K的活性下降了34%[2]。結(jié)合本研究結(jié)果可以推斷：PI3－K可能是胰島素信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中受到RBP4影響的信號(hào)蛋白之一，其蛋白表達(dá)量的改變可能使下游蛋白的表達(dá)以及磷酸化發(fā)生變化，最終導(dǎo)致骨骼肌細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)發(fā)生變化，葡萄糖攝取率的降低就是這些變化中的一種，或許可以作為解釋RBP4誘導(dǎo)骨骼肌細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗的機(jī)制之一。

經(jīng)過(guò)3周游泳運(yùn)動(dòng)干預(yù)后，RE組大鼠PI3-K蛋白表達(dá)顯著高于RR組，增加幅度達(dá)到74%，說(shuō)明運(yùn)動(dòng)部分增加了被RBP4抑制的PI3-K蛋白表達(dá)，通過(guò)影響P13-K/AKt/mTOR信號(hào)通路，骨骼肌的葡萄糖攝取功能也得以改善，胰島素抵抗程度也相應(yīng)減輕。由于胰島素信號(hào)傳導(dǎo)的途徑比較復(fù)雜，涉及數(shù)量和種類(lèi)繁雜的信號(hào)蛋白，本研究?jī)H僅以P13-K/AKt/mTOR信號(hào)通路中的PI3-K為觀察指標(biāo)，試圖探索運(yùn)動(dòng)影響RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗機(jī)制，即使發(fā)現(xiàn)了運(yùn)動(dòng)與RBP4誘導(dǎo)的胰島素抵抗骨骼肌細(xì)胞PI3-K之間的聯(lián)系，也只能作為一種可能的解釋?zhuān)匀恍枰獙?duì)其它蛋白和信號(hào)通路做深入研究，才有可能全面揭示運(yùn)動(dòng)改善胰島素抵抗的機(jī)制。

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Effects of Exercise on PI3-K Expression of Skeletal Muscle in RBP4-induced Insulin Resistance Rats

ZHANG Mingjun
（School of PE and Sports Science，F(xiàn)ujian Normal University，F(xiàn)uzhou 350007，China）

Objective：To study the effects of exercise on PI3-K expression of skeletal muscle cells in RBP4-induced insulin resistance rats.Methods：8-week-old SD male rats model established by intraperitoneal injection with Recombination RBP4 3μgg-1body weight，2 times per day for 3 weeks.Model rats were divided into RBP4+swimming group（RE），RBP4+rest group（RE），and normal control group（C）.RE group rata swam three weeks without load，60 min per day.ELISA，fluid flash counter，IHC and western blotting were used to detect serum RBP4，HOMA-IR，glucose uptake rate and PI3-K expression，respectively.Results：Serum RBP4 and HOMA-IR increased more in RBP4 intraperitoneal injection exercise groups than normal control group，respectively.Non insulin-stimulated and insulin-stimulated glucose uptake rat decreased more in RBP4 intraperitoneal injection exercise groups than normal control group，respectively.Serum RBP4 and HOMA-IR decreased more in RE group than RR group，respectively.Non insulin-stimulated and insulin-stimulated glucose uptake rat increased more in RE group than RR group，respectively.PI3-K expression increased more in RE group than RR group.Conclusion：Exercise could increase PI3-K expression of skeletal muscle cells in RBP4-induced Insulin Resistance Rats，promote glucose uptake rat and improve insulin resistance.

exercise；retinal-binding protein-4；insulin resistance；PI3-K

G 804.7

A

1005-0000（2010）06-0482-04

2010-09-15；

2010-11-09；錄用日期：2010-11-15

福建省教育科學(xué)“十一五”規(guī)劃課題（項(xiàng)目編號(hào)：FJI10-050）；福建省教育廳科技課題（項(xiàng)目編號(hào)：JA10229）；莆田學(xué)院教育教學(xué)改革課題（項(xiàng)目編號(hào)：JG201019）

張明軍（1968-），男，安徽滁州人，講師，在讀博士研究生，研究方向?yàn)檫\(yùn)動(dòng)人體科學(xué)。

福建師范大學(xué)體育科學(xué)學(xué)院，福建福州350007。