張愛華，鄧德明， 陳中義

(長江大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北 荊州 434023)

皮慧芳，何 瓊，何昌浩

(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院，湖北 武漢 430030)

湖沼地區(qū)草本植物化感作用對日本血吸蟲毛蚴影響的研究

張愛華，鄧德明， 陳中義

(長江大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北 荊州 434023)

皮慧芳，何 瓊，何昌浩

(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院，湖北 武漢 430030)

目的：觀察洲灘草本植物與日本血吸蟲之間的化感作用及生態(tài)學(xué)關(guān)系，探討控制湖沼地區(qū)血吸蟲病傳播的新措施。 方法：采用改良的Rorbert’比較法和平皿法，觀察湖北省荊州市郊血吸蟲病疫區(qū)草本植物浸出液(10%)對日本血吸蟲毛蚴趨向釘螺的影響及殺滅毛蚴的作用。結(jié)果：野胡蘿卜草、貓眼草、地菜、苔草、紫花地丁等洲灘草本植物的浸出液能夠非常顯著地抑制日本血吸蟲毛蚴的趨向運(yùn)動，而小薊的浸出液具有顯著地吸引日本血吸蟲毛蚴的作用；益母草、毛茛、貓眼草、蒿及藜蒿浸出液對日本血吸蟲毛蚴具有殺滅作用。結(jié)論：洲灘草本植物的化感作用具有控制血吸蟲病傳播的潛在能力，有望成為一種控制湖沼地區(qū)血吸蟲病的新措施。

草本植物；化感作用；日本血吸蟲毛蚴

在我國，50年代以來一直執(zhí)行“以消滅釘螺為主導(dǎo)的綜合性防治措施”，但釘螺在地球上存在的歷史久遠(yuǎn)[1，2]、面積廣泛[3]，以滅螺來控制血吸病的策略遇到很大的困難。

化感作用“Allelopathy”源于希臘語“Allelon(相互)”和“Pathos(損害、妨礙)”[4，5]，1984年Rice[6]在《Allelopathy》中定義為：植物或微生物的代謝分泌物對環(huán)境中其他植物或微生物的有利或不利的作用。對洲灘草本植物-血吸蟲毛蚴-釘螺-血吸蟲尾蚴這一環(huán)節(jié)，特別是對植物與毛蚴形成的微生態(tài)環(huán)境進(jìn)行研究，即利用植物對毛蚴的化感作用阻斷日本血吸蟲感染人類的途徑，以期達(dá)到控制血吸蟲病之目的，也許比起讓釘螺絕跡這個(gè)方法更為可行。在生物多樣化和釘螺無害化理論指導(dǎo)[7]下，近年來，作者開展了洲灘植物對血吸蟲毛蚴趨向的影響及殺滅作用的研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1材料

圖1 “ф”形板示意圖

1.1.1草本植物 將采自湖北省荊州市荊州區(qū)太湖農(nóng)場洲灘地的地菜(Capsella bursa-pastoris)、貓眼草(Euphorbia helioscopia)、野胡蘿卜(Daucus carota)、苔草(Carex argyi )、苜蓿(Medicago hispida)、紫花地丁(Medicago hispida)、小薊(Cephalanoplos segetum)、益母草(Leonurus artemisia)、蒿(Artemisia apiaceea )和毛茛(Ranunculus japonnicus)等植物，分別取全株及其根、莖、葉各10g研碎，置于100ml去氯水中浸泡24h，制成10%浸泡液，備用。

1.1.2“ф”形板 將Robert’s比較法[8]中上層由有機(jī)玻璃制作并粘合的“ф”形容器，改由無需粘合的石蠟制成(見圖1)。

1.2方法

1.2.1改良的Roberts 比較法 在“ф”形板中加入剛孵出的毛蚴懸液1ml，讓毛蚴在容器內(nèi)自由活動并均勻分布。在兩側(cè)加樣點(diǎn)處用加樣器分別加入待測趨化物質(zhì)(各種洲灘草本植物浸泡液)50μl(實(shí)驗(yàn)組)和等量去氯水作為對照(對照組)，5min后，插入擋板阻止毛蚴從一側(cè)游到另一側(cè)。隨即在兩邊各加碘酒1滴，殺死并固定毛蚴，靜置片刻，在顯微鏡下計(jì)數(shù)毛蚴數(shù)，然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

1.2.2平皿法 在實(shí)驗(yàn)和對照平皿中分別注入剛孵出的毛蚴懸液0.5ml，讓毛蚴在平皿內(nèi)自由活動并均勻分布。用加樣器在實(shí)驗(yàn)平皿中加入150μl植物浸泡液(實(shí)驗(yàn)組),對照平皿中加入等量去氯水(對照組)。1min后，分別觀察計(jì)數(shù)沉于兩平皿底面的死毛蚴數(shù)(即為殺死之毛蚴數(shù))。然后在兩平皿內(nèi)加入2滴碘液殺死毛蚴，分別計(jì)數(shù)兩平皿的死毛蚴數(shù)即為總毛蚴數(shù)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理率的差異性檢驗(yàn)采用χ2檢驗(yàn)。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1洲灘草本植物對日本血吸蟲毛蚴趨向運(yùn)動的影響野胡蘿卜草的莖、貓眼草的葉和根、地菜葉、苔草的莖、紫花地丁等洲灘草本植物的浸出液能夠非常顯著地抑制日本血吸蟲毛蚴的趨向運(yùn)動，而小薊的浸出液具有顯著地吸引日本血吸蟲毛蚴的能力。見表1。

表1 洲灘草本植物對日本血吸蟲毛蚴趨向運(yùn)動的影響

注： +、-代表對毛蚴趨向的影響，其中+為吸引，-為排斥。

2.2草本植物浸出液殺滅日本血吸蟲毛蚴效果益母草、毛茛(葉)、貓眼草(莖)、蒿(莖)浸出液對日本血吸蟲毛蚴具有殺滅作用。見表2。

表2 草本植物浸出液殺滅日本血吸蟲毛蚴效果

3 討論

本研究結(jié)果表明，野胡蘿卜草的莖、貓眼草的葉和根、地菜葉、苔草的莖、紫花地丁等洲灘草本植物的浸出液能夠十分顯著地抑制日本血吸蟲毛蚴的趨向運(yùn)動，而小薊的浸出液具有顯著地吸引日本血吸蟲毛蚴的能力；同時(shí)表明益母草、毛茛(葉)、貓眼草(莖)、蒿(莖)浸出液對日本血吸蟲毛蚴具有殺滅作用。

周述龍等[9]報(bào)告，日本血吸蟲毛蚴對釘螺的感染率與毛蚴的數(shù)量成正比，如果降低毛蚴數(shù)量，對于控制血吸蟲病傳播無疑是十分重要的。如果使用洲灘本身具有的易于生長繁殖的草本植物，使其形成優(yōu)勢種群，其具有顯著地殺滅日本血吸蟲毛蚴和阻止毛蚴趨向釘螺的作用，即可產(chǎn)生明顯的減少毛蚴感染釘螺的效果，達(dá)到不需要?dú)玑斅菥湍軌蚩刂迫祟愌x病，特別是控制湖沼型血吸蟲病傳播的目的。

這些抑制毛蚴趨向釘螺運(yùn)動和殺滅毛蚴的草本植物化感作用的有效組分、使用的適宜濃度、時(shí)間以及其作用機(jī)理等，尚需進(jìn)一步研究。

[1]周曉農(nóng).實(shí)用釘螺學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社，2005：6-8.

[2]李友松,林金祥.滇西洱源縣釘螺化石的初步研究[J].中國血吸蟲病防治雜志，2001，13(2)：98-100.

[3]郝陽，吳曉華，鄧浩，等. 2007年全國血吸蟲病疫情通報(bào)[J].中國血吸蟲病防治雜志， 2008，20(6)：401-404.

[4]余叔文.植物間相互作用-相生相克現(xiàn)象.植物生理與分子生物學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,1992：376-394.

[5]孫文浩.相生相克作用及其應(yīng)用[J].植物生理學(xué)通訊，1992，28(2)：81-87.

[6]Rice E L.Allelopathy[M]. 2nd edition. New York: Academic Press，1984：1-50.

[7]何昌浩.釘螺無害化的理論與實(shí)踐[J].中國寄生蟲病防治雜志,2003,15(6)：478.

[8]Roberts TM， Stibbs H， Chernin E，etal.A simple quantitative tegnique for testing behavioural responses of Schistosoma mansoni miracidia to chemicals[J]. J Parasitol，1978，64：277-282.

[9]周述龍，林建銀，蔣明森. 血吸蟲學(xué)[M]. 第2版. 北京：科學(xué)出版社，2001：385.

[編輯] 一 凡

2009-06-18

張愛華(1957-)，女，湖北江陵人，副教授，從事寄生蟲生態(tài)學(xué)及寄生蟲病防治工作；通訊作者：何昌浩， E-mail：hechanghao@126.com。

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2009.03.002

R532.21

A

1673-1409(2009)03-R003-02